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HCT116-GFP
Tissue
冒號
Disease
結腸癌
Synonyms
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT116, HCT116wt, HCT-116/P, HCT-116/parental, CoCL2

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HCT116-GFP

Cell line · Product number 305649

HCT116-GFP is a genetically modified derivative of the human colorectal carcinoma cell line HCT116, engineered to constitutively express green fluorescent...

US$800.00excl. tax and shipping
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Recommended (freshest lot)
  • CoA
1

01General information

Description

HCT116-GFP 是人類結直腸癌細胞系 HCT116 的基因改造衍生物,經工程改造後可持續表達綠色螢光蛋白(GFP)。 親本 HCT116 細胞系源自一名成人患者的結腸癌,廣泛用作錯配修復缺陷(MMR 缺陷)結直腸癌的模型。 細胞遺傳學分析顯示,HCT116 細胞通常呈現近二倍體的核型,並具有明確的染色體改變,包括微衛星不穩定性陽性結直腸腫瘤特有的結構重排和拷貝數變異。 導入 GFP 報告基因,可在不大幅改變親本細胞系固有遺傳與表型特性的情況下,實現細胞行為的即時可視化。

HCT116-GFP 細胞中的 GFP 標記通常透過穩定轉染實現,可產生均勻的螢光,有助於活細胞成像、細胞追蹤,以及增殖、遷移和腫瘤生長動態的定量分析。 此種改造在體外實驗及體內異種移植模型中尤具價值,透過 GFP 表達,可對腫瘤進展、轉移擴散以及對治療干預的反應進行非侵入性監測。 基於螢光的表型分析方法已證實,包括 HCT116 在內的結直腸癌細胞系展現出獨特的細胞內特徵,這些特徵可透過影像學方法捕捉,這支持了如 GFP 等螢光報告基因在高內容篩選應用中的實用性。

HCT116-GFP 作為研究大腸直腸癌生物學的強大工具,能讓研究者在基礎及轉譯研究的背景下,對腫瘤細胞行為、微環境相互作用以及治療功效進行詳細分析。

基因改造:透過複製無能的慢病毒轉導進行穩定改造,以表達 ZsGreen1 綠色螢光蛋白報告基因;在嘌呤酶篩選(1–5 µg/mL)下維持為多克隆細胞群。S1/BSL-1 防護等級。

Tissue
冒號
Disease
結腸癌
Synonyms
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT116
  • HCT116wt
  • HCT-116/P
  • HCT-116/parental
  • CoCL2

02Classification

Organism
Human
Sex
Male
Growth properties
Adherent
GMO status
GMO-S1
GMO status details
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Biosafety level
1

03Characteristics

Doubling time
27 小時;17.1 小時;22 小時;25.02 小時;36 小時;18.14 ± 0.051 小時;約 25–48 小時;17.4 小時;約 21 小時

04Identifiers

Citation
HCT116-GFP(Cytion 型號 305649)
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Expression and susceptibility

Antigen expression
ZsGreen1(綠色螢光蛋白)
Mutational profile
突變:p.Lys437Argfs*5,純合子;突變:p.Ile2675Aspfs*6,雜合子;突變:p.Arg24Serfs*20,雜合子; 突變:p.Glu33Argfs*20,雜合子;突變:p.Asp74fs*21,雜合子;突變:p.Ser45del,雜合子; 突變:p.Met1470Cysfs*22,雜合子;突變:p.Asn1700Thrfs*9,雜合子;突變:p.Gly13Asp,雜合子; 突變:p.His1047Arg,雜合子;突變:p.Leu450Ter,雜合子;突變:p.Lys128Serfs*35,純合子

06Handling and culture

Culture medium
麥考伊 5a 培養基,含:3.0 g/L 葡萄糖,含:穩定型谷氨酰胺,含:2.0 mM 丙酮酸鈉,含:2.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820200a)
Incubation atmosphere

37°C,5% CO₂,加濕環境。

Supplements
在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
Dissociation reagent
Accutase
Seeding density
2 至 4 × 10⁴ 個細胞/cm²
Thawing and culturing
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Quality control and cryopreservation

Freeze medium
作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基加上 10% 的二甲基亞砜(DMSO),以確保解凍後的細胞存活率達到適當水準。
Storage conditions

若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。

Shipping conditions

冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。

08Donor

Donor age
48年
Ethnicity
高加索人