
- Tissue
- 冒號
- Disease
- 結腸癌
- Synonyms
- HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT116, HCT116wt, HCT-116/P, HCT-116/parental, CoCL2
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HCT116-GFP
Cell line · Product number 305649
HCT116-GFP is a genetically modified derivative of the human colorectal carcinoma cell line HCT116, engineered to constitutively express green fluorescent...
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01General information
- Description
HCT116-GFP 是人類結直腸癌細胞系 HCT116 的基因改造衍生物,經工程改造後可持續表達綠色螢光蛋白(GFP)。 親本 HCT116 細胞系源自一名成人患者的結腸癌,廣泛用作錯配修復缺陷(MMR 缺陷)結直腸癌的模型。 細胞遺傳學分析顯示,HCT116 細胞通常呈現近二倍體的核型,並具有明確的染色體改變,包括微衛星不穩定性陽性結直腸腫瘤特有的結構重排和拷貝數變異。 導入 GFP 報告基因,可在不大幅改變親本細胞系固有遺傳與表型特性的情況下,實現細胞行為的即時可視化。
HCT116-GFP 細胞中的 GFP 標記通常透過穩定轉染實現,可產生均勻的螢光,有助於活細胞成像、細胞追蹤,以及增殖、遷移和腫瘤生長動態的定量分析。 此種改造在體外實驗及體內異種移植模型中尤具價值,透過 GFP 表達,可對腫瘤進展、轉移擴散以及對治療干預的反應進行非侵入性監測。 基於螢光的表型分析方法已證實,包括 HCT116 在內的結直腸癌細胞系展現出獨特的細胞內特徵,這些特徵可透過影像學方法捕捉,這支持了如 GFP 等螢光報告基因在高內容篩選應用中的實用性。
HCT116-GFP 作為研究大腸直腸癌生物學的強大工具,能讓研究者在基礎及轉譯研究的背景下,對腫瘤細胞行為、微環境相互作用以及治療功效進行詳細分析。
基因改造:透過複製無能的慢病毒轉導進行穩定改造,以表達 ZsGreen1 綠色螢光蛋白報告基因;在嘌呤酶篩選(1–5 µg/mL)下維持為多克隆細胞群。S1/BSL-1 防護等級。
- Tissue
- 冒號
- Disease
- 結腸癌
- Synonyms
- HCT-116
- HCT.116
- HCT_116
- HCT116
- HCT116wt
- HCT-116/P
- HCT-116/parental
- CoCL2
02Classification
- Organism
- Human
- Sex
- Male
- Growth properties
- Adherent
- GMO status
- GMO-S1
- GMO status details
- GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
- Biosafety level
- 1
03Characteristics
- Doubling time
- 27 小時;17.1 小時;22 小時;25.02 小時;36 小時;18.14 ± 0.051 小時;約 25–48 小時;17.4 小時;約 21 小時
04Identifiers
- Citation
- HCT116-GFP(Cytion 型號 305649)
- NCBI TaxID
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_0291
05Expression and susceptibility
- Antigen expression
- ZsGreen1(綠色螢光蛋白)
- Mutational profile
- 突變:p.Lys437Argfs*5,純合子;突變:p.Ile2675Aspfs*6,雜合子;突變:p.Arg24Serfs*20,雜合子; 突變:p.Glu33Argfs*20,雜合子;突變:p.Asp74fs*21,雜合子;突變:p.Ser45del,雜合子; 突變:p.Met1470Cysfs*22,雜合子;突變:p.Asn1700Thrfs*9,雜合子;突變:p.Gly13Asp,雜合子; 突變:p.His1047Arg,雜合子;突變:p.Leu450Ter,雜合子;突變:p.Lys128Serfs*35,純合子
06Handling and culture
- Culture medium
- 麥考伊 5a 培養基,含:3.0 g/L 葡萄糖,含:穩定型谷氨酰胺,含:2.0 mM 丙酮酸鈉,含:2.2 g/L NaHCO₃(Cytion 產品編號 820200a)
- Incubation atmosphere
37°C,5% CO₂,加濕環境。
- Supplements
- 在培養基中加入 10% 的胎牛血清(FBS)
- Dissociation reagent
- Accutase
- Seeding density
- 2 至 4 × 10⁴ 個細胞/cm²
- Thawing and culturing
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.
Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery
07Quality control and cryopreservation
- Freeze medium
- 作為冷凍保存培養基,我們使用完全生長培養基加上 10% 的二甲基亞砜(DMSO),以確保解凍後的細胞存活率達到適當水準。
- Storage conditions
若需長期保存,請將試管置於溫度約為 −150 至 −196 °C 的氣相液氮中。僅在轉移至液氮之前,可將試管暫時存放於 −80 °C 環境中,作為短期過渡步驟。
- Shipping conditions
冷凍保存的細胞系會以乾冰冷藏,並裝於經驗證的隔熱包裝中,包裝內含有足夠的冷媒,以確保在運輸過程中溫度維持在約 −78 °C。收到貨物後,請立即檢查容器,並盡快將試管轉移至適當的儲存場所。
08Donor
- Donor age
- 48年
- Ethnicity
- 高加索人
09Legal and safety
- Safety precautions
- 若計劃將低溫試管存放在液態氮中以供日後解凍,必須嚴格遵守相關安全措施。 必須穿戴適當的防護手套和防護服,且在將冷凍樣本移入或移出液氮罐時,必須佩戴口罩或安全護目鏡。此舉旨在降低因取出時冷凍試管可能發生爆炸而導致受傷的風險,此類爆炸可能造成尖銳碎片飛濺。
- Warranty
在 Cytion,我們對產品的品質與存活率提供保障。 我們保證,自本公司設施出貨後 60 天內,我們的細胞在培養開始時仍具存活能力。 我們保證所有材料均符合 分析證明書及/或產品說明書中所載的規格。
詳情請參閱我們的 《保固聲明》。
- Material Transfer Agreement required
- Yes