Langsung ke isi
HCT116-GFP
Tisu
Usus besar
Penyakit
Karsinoma usus besar
Sinonim
HCT-116, HCT.116, HCT_116, HCT116, HCT116wt, HCT-116/P, HCT-116/parental, CoCL2

HCT116-GFP

Cell line · Nomor produk 305649

HCT116-GFP is a genetically modified derivative of the human colorectal carcinoma cell line HCT116, engineered to constitutively express green fluorescent...

€800.00belum termasuk pajak dan ongkos kirim

Penyesuaian / Rekomendasi

Tersedia
Lot
Direkomendasikan (stok terbaru)
  • CoA
1

01Informasi umum

Deskripsi

HCT116-GFP adalah turunan yang dimodifikasi secara genetik dari garis sel karsinoma kolorektal manusia HCT116, yang direkayasa untuk secara konstitutif mengekspresikan protein fluoresensi hijau (GFP). Lini induk HCT116 berasal dari karsinoma kolon seorang pasien dewasa dan banyak digunakan sebagai model kanker kolorektal dengan defisiensi perbaikan ketidakcocokan (MMR-deficient). Analisis sitogenetik menunjukkan bahwa sel HCT116 umumnya menunjukkan kariotipe yang mendekati diploid dengan perubahan kromosom yang terdefinisi, termasuk penataan ulang struktural dan variasi jumlah salinan yang merupakan karakteristik tumor kolorektal dengan ketidakstabilan mikrosatelit positif. Pengenalan gen reporter GFP memungkinkan visualisasi perilaku sel secara real-time tanpa mengubah secara substansial sifat genetik dan fenotipik intrinsik dari garis induk.

Penandaan GFP pada sel HCT116-GFP umumnya dicapai melalui transfeksi stabil, yang menghasilkan fluoresensi seragam yang memfasilitasi pencitraan sel hidup, pelacakan sel, serta analisis kuantitatif terhadap proliferasi, migrasi, dan dinamika pertumbuhan tumor. Modifikasi ini sangat berharga dalam uji in vitro dan model xenograft in vivo, di mana ekspresi GFP memungkinkan pemantauan non-invasif terhadap perkembangan tumor, penyebaran metastasis, dan respons terhadap intervensi terapeutik. Pendekatan profil fenotipik berbasis fluoresensi telah menunjukkan bahwa garis sel kanker kolon, termasuk HCT116, menunjukkan tanda-tanda intraseluler yang khas yang dapat ditangkap melalui metodologi berbasis pencitraan, sehingga mendukung kegunaan penanda fluoresen seperti GFP untuk aplikasi skrining konten tinggi.

HCT116-GFP berfungsi sebagai alat yang andal untuk menyelidiki biologi kanker kolorektal, memungkinkan analisis terperinci mengenai perilaku sel tumor, interaksi mikro lingkungan, serta kemanjuran terapi baik dalam konteks penelitian dasar maupun translasi.

Modifikasi genetik: Dimodifikasi secara stabil melalui transduksi lentiviral yang tidak mampu bereplikasi untuk mengekspresikan penanda protein fluoresensi hijau ZsGreen1; dipelihara sebagai populasi poliklonal di bawah seleksi puromisin (1–5 µg/mL). Tingkat pengamanan S1/BSL-1.

Tisu
Usus besar
Penyakit
Karsinoma usus besar
Sinonim
  • HCT-116
  • HCT.116
  • HCT_116
  • HCT116
  • HCT116wt
  • HCT-116/P
  • HCT-116/parental
  • CoCL2

02Klasifikasi

Organisme
Manusia
Seks
Laki-laki
Sifat-sifat pertumbuhan
Pengikut
Status GMO
GMO-S1
Rincian status GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated ZsGreen1 green fluorescent protein reporter introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Tingkat keamanan hayati
1

03Karakteristik

Waktu penggandaan
27 jam ; 17,1 jam ; 22 jam ; 25,02 jam ; 36 jam ; 18,14 ± 0,051 jam ; ~25–48 jam ; 17,4 jam ; ~21 jam

04Pengidentifikasi

Referensi
HCT116-GFP (nomor katalog Cytion 305649)
Nomor Identifikasi Pajak NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_0291

05Ekspresi dan kerentanan

Ekspresi antigen
ZsGreen1 (protein fluoresen hijau)
Profil mutasi
Mutasi: p.Lys437Argfs*5, homozigot; Mutasi: p.Ile2675Aspfs*6, heterozigot; Mutasi: p.Arg24Serfs*20, heterozigot; Mutasi: p.Glu33Argfs*20, heterozigot; Mutasi: p.Asp74fs*21, Heterozigot; Mutasi: p.Ser45del, Heterozigot; Mutasi: p.Met1470Cysfs*22, Heterozigot; Mutasi: p.Asn1700Thrfs*9, Heterozigot; Mutasi: p.Gly13Asp, Heterozigot; Mutasi: p.His1047Arg, Heterozigot; Mutasi: p.Leu450Ter, Heterozigot; Mutasi: p.Lys128Serfs*35, Homozigot

06Penanganan dan budidaya

Media kultur
McCoys 5a, w: 3,0 g/L Glukosa, w: stabil Glutamin, w: 2,0 mM Natrium piruvat, w: 2,2 g/L NaHCO3 (Nomor artikel Cytion 820200a)
Suasana inkubasi

37°C, 5%CO2, atmosfer yang dilembabkan.

Suplemen
Tambahkan media dengan 10% FBS
Reagen disosiasi
Accutase
Kepadatan penanaman
2 hingga 4 x 10⁴ sel/cm²
Pencairan dan pembiakan
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Pengendalian mutu dan kriopreservasi

Media pembekuan
Sebagai media kriopreservasi, kami menggunakan media pertumbuhan lengkap + 10% DMSO untuk kelangsungan hidup pasca-pencairan yang memadai.
Kondisi penyimpanan

Untuk pengawetan jangka panjang, tempatkan botol dalam nitrogen cair fase uap pada suhu sekitar -150 hingga -196 °C. Penyimpanan pada suhu -80 °C hanya dapat diterima sebagai langkah sementara sebelum dipindahkan ke nitrogen cair.

Ketentuan pengiriman

Lini sel kriopreservasi dikirim di atas es kering dalam kemasan terisolasi yang divalidasi dengan refrigeran yang cukup untuk mempertahankan suhu sekitar -78 ° C selama perjalanan. Setelah diterima, segera periksa wadah dan pindahkan botol tanpa penundaan ke tempat penyimpanan yang sesuai.

08Donatur

Usia donor
48 tahun
Etnis
Kaukasia