HCT116-GFP

HCT116-GFP er et genetisk modificeret derivat af den humane kolorektale karcinomcellelinje HCT116, der er konstrueret til konstant at udtrykke grønt fluorescerende protein (GFP). Den oprindelige HCT116-linje stammer fra et kolonkarcinom hos en voksen patient og anvendes i vid udstrækning som model for kolorektal cancer med mangel på mismatch-reparation (MMR-mangel). Cytogenetiske analyser har vist, at HCT116-celler typisk udviser en næsten diploid karyotype med definerede kromosomale ændringer, herunder strukturelle omlejringer og variationer i kopital, der er karakteristiske for mikrosatellitinstabilitetspositive kolorektale tumorer. Indførelsen af GFP-reportergenet muliggør visualisering i realtid af cellulær adfærd uden væsentligt at ændre den oprindelige linjes iboende genetiske og fænotypiske egenskaber.

GFP-mærkningen i HCT116-GFP-celler opnås normalt gennem stabil transfektion, hvilket resulterer i ensartet fluorescens, der letter billeddannelse af levende celler, celle-sporing og kvantitativ analyse af proliferation, migration og tumorvækstdynamik. Denne modifikation er særligt værdifuld i in vitro-assays og in vivo-xenotransplantatmodeller, hvor GFP-ekspression muliggør ikke-invasiv overvågning af tumorprogression, metastatisk spredning og respons på terapeutiske interventioner. Fluorescensbaserede tilgange til fænotypisk profilering har vist, at tyktarmskræftcellelinjer, herunder HCT116, udviser tydelige intracellulære signaturer, der kan registreres ved hjælp af billedbaserede metoder, hvilket underbygger nytten af fluorescerende markører såsom GFP til high-content-screening-applikationer.

HCT116-GFP fungerer som et robust værktøj til undersøgelse af kolorektal kræftbiologi og muliggør detaljeret analyse af tumorcellers adfærd, interaktioner i mikromiljøet og terapeutisk effektivitet i både grundforsknings- og translationelle forskningssammenhænge.

Genetisk modifikation: Stabilt modificeret ved replikationsinkompetent lentiviral transduktion til at udtrykke ZsGreen1-reporteren (grønt fluorescerende protein); opbevares som en polyklonal population under puromycin-selektion (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-sikkerhedsklasse.

37°C, 5%_CO2, befugtet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsopbevaring anbringes hætteglas i flydende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Opbevaring ved -80 °C er kun acceptabelt som et kort mellemtrin før overførsel til flydende nitrogen.

Kryopræserverede cellelinjer sendes på tøris i valideret, isoleret emballage med tilstrækkeligt kølemiddel til at opretholde ca. -78 °C under hele transporten. Ved modtagelse skal beholderen straks inspiceres, og hætteglassene skal straks overføres til passende opbevaring.

Hos Cytion står vi inde for vores produkters kvalitet og levedygtighed. Vi garanterer, at vores celler vil være levedygtige ved kulturens start i 60 dage efter afsendelse fra vores faciliteter. Vi sikrer, at alle materialer er i overensstemmelse med de specifikationer, der er beskrevet i analysecertifikatet og/eller produktarket

For alle detaljer henvises til vores <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring