HCT116-GFP

HCT116-GFP เป็นสายพันธุ์ที่ได้รับการดัดแปลงทางพันธุกรรมจากสายเซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนักของมนุษย์ HCT116 ซึ่งได้รับการออกแบบให้แสดงโปรตีนเรืองแสงสีเขียว (GFP) อย่างต่อเนื่อง สายเซลล์ HCT116 ต้นแบบมีต้นกำเนิดจากมะเร็งลำไส้ใหญ่ของผู้ป่วยผู้ใหญ่ และถูกใช้อย่างแพร่หลายเป็นแบบจำลองของมะเร็งลำไส้ใหญ่ที่มีภาวะขาดการซ่อมแซมความไม่ตรงกัน (MMR-deficient) การวิเคราะห์ทางไซโตเจเนติกส์ได้แสดงให้เห็นว่าเซลล์ HCT116 มักมีแบบโครโมโซมที่ใกล้เคียงกับแบบไดพลอยด์ พร้อมด้วยความเปลี่ยนแปลงของโครโมโซมที่ชัดเจน ซึ่งรวมถึงการจัดเรียงโครงสร้างใหม่และการเปลี่ยนแปลงจำนวนสำเนา ซึ่งเป็นลักษณะเฉพาะของเนื้องอกลำไส้ใหญ่และทวารหนักที่มีภาวะไม่เสถียรของไมโครแซทเทลไลต์ (MSI-positive) การนำยีนรายงาน GFP เข้ามาใช้ช่วยให้สามารถสังเกตพฤติกรรมของเซลล์แบบเรียลไทม์ได้ โดยไม่เปลี่ยนแปลงคุณสมบัติทางพันธุกรรมและฟีโนไทป์ที่เป็นธรรมชาติของสายพันธุ์ต้นแบบอย่างมีนัยสำคัญ

การติดฉลาก GFP ในเซลล์ HCT116-GFP มักทำได้ผ่านการทรานส์เฟกชันที่เสถียร ซึ่งให้ผลเป็นแสงฟลูออเรสเซนต์ที่สม่ำเสมอ ช่วยให้การถ่ายภาพเซลล์สด การติดตามเซลล์ และการวิเคราะห์เชิงปริมาณเกี่ยวกับการเพิ่มจำนวน การเคลื่อนที่ และพลวัตการเติบโตของเนื้องอกเป็นไปได้อย่างสะดวก การดัดแปลงนี้มีประโยชน์อย่างยิ่งในการทดลองในหลอดทดลอง (in vitro) และในแบบจำลองการปลูกถ่ายเนื้อเยื่อต่างชนิดในร่างกาย (in vivo xenograft models) ซึ่งการแสดงออกของ GFP ช่วยให้สามารถติดตามการพัฒนาของเนื้องอก การแพร่กระจายของมะเร็ง และการตอบสนองต่อการรักษาแบบไม่รุกล้ำได้ วิธีการวิเคราะห์ลักษณะทางฟีโนไทป์ที่ใช้แสงฟลูออเรสเซนส์ได้แสดงให้เห็นว่า สายพันธุ์เซลล์มะเร็งลำไส้ใหญ่ รวมถึง HCT116 มีลักษณะเฉพาะภายในเซลล์ที่สามารถตรวจจับได้ผ่านวิธีการที่ใช้การถ่ายภาพ ซึ่งสนับสนุนประโยชน์ของตัวรายงานฟลูออเรสเซนส์ เช่น GFP สำหรับการคัดกรองแบบเนื้อหาสูง (high-content screening)

HCT116-GFP เป็นเครื่องมือที่เชื่อถือได้สำหรับการศึกษาชีววิทยาของมะเร็งลำไส้ใหญ่และทวารหนัก โดยช่วยให้สามารถวิเคราะห์พฤติกรรมของเซลล์มะเร็ง การปฏิสัมพันธ์ในสภาพแวดล้อมจุลภาค และประสิทธิภาพการรักษาได้อย่างละเอียด ทั้งในบริบทการวิจัยพื้นฐานและการวิจัยเชิงประยุกต์

การดัดแปลงทางพันธุกรรม: ได้รับการดัดแปลงอย่างเสถียรผ่านกระบวนการถ่ายโอนด้วยเลนติไวรัสที่ไม่สามารถทำซ้ำได้ เพื่อแสดงตัวบ่งชี้โปรตีนเรืองแสงสีเขียว ZsGreen1; รักษาไว้ในรูปแบบประชากรโพลีโคลนอลภายใต้การคัดเลือกด้วยพูโรไมซิน (1–5 µg/mL) ระดับความปลอดภัย S1/BSL-1

37°C, 5%_CO2, บรรยากาศชื้น

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

สำหรับการเก็บรักษาในระยะยาว ให้วางหลอดบรรจุในไนโตรเจนเหลวในสถานะไอที่อุณหภูมิประมาณ −150 ถึง −196 °C การเก็บรักษาที่อุณหภูมิ −80 °C สามารถใช้ได้เฉพาะในระยะสั้นก่อนการย้ายไปยังไนโตรเจนเหลวเท่านั้น

เซลล์ไลน์ที่แช่แข็งในไนโตรเจนเหลวจะถูกจัดส่งในบรรจุภัณฑ์ที่ผ่านการตรวจสอบแล้วและมีการเก็บรักษาความเย็นด้วยน้ำแข็งแห้ง พร้อมสารทำความเย็นที่เพียงพอเพื่อรักษาอุณหภูมิประมาณ −78 °C ตลอดการขนส่ง เมื่อได้รับสินค้า ให้ตรวจสอบภาชนะทันทีและถ่ายโอนหลอดทดลองไปยังที่เก็บที่เหมาะสมโดยไม่ล่าช้า

ที่Cytion เรามุ่งมั่นในคุณภาพและความมีชีวิตของผลิตภัณฑ์ของเรา เรารับประกันว่าเซลล์ของเราจะยังมีชีวิตอยู่เมื่อเริ่มการเพาะเลี้ยงเป็นเวลา 60 วันหลังจากจัดส่งจากโรงงานของเรา เรารับรองว่าวัสดุทั้งหมดเป็นไปตามข้อกำหนดที่ระบุไว้ใน ใบรับรองการวิเคราะห์ และ/หรือแผ่นข้อมูลผลิตภัณฑ์

สำหรับรายละเอียดเพิ่มเติม กรุณาดูที่ <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">นโยบายการรับประกัน.