HCT116-GFP

HCT116-GFP er et genetisk modifisert derivat av den humane kolorektale karsinomcellelinjen HCT116, som er utviklet for å uttrykke grønt fluorescerende protein (GFP) konstant. Den opprinnelige HCT116-linjen stammer fra et tykktarmskarsinom hos en voksen pasient og brukes mye som modell for kolorektal kreft med mangelfull mismatch-reparasjon (MMR-mangel). Cytogenetiske analyser har vist at HCT116-celler typisk har en nesten diploid karyotype med definerte kromosomale forandringer, inkludert strukturelle omorganiseringer og variasjoner i kopitall som er karakteristiske for kolorektale svulster med mikrosatellittinstabilitet. Innføring av GFP-reportergenet muliggjør visualisering i sanntid av celleatferd uten å endre de iboende genetiske og fenotypiske egenskapene til den opprinnelige linjen i vesentlig grad.

GFP-merking i HCT116-GFP-celler oppnås vanligvis gjennom stabil transfeksjon, noe som resulterer i jevn fluorescens som muliggjør avbildning av levende celler, cellesporing og kvantitativ analyse av proliferasjon, migrasjon og dynamikken i tumorvekst. Denne modifikasjonen er særlig verdifull i in vitro-assayer og in vivo-xenotransplantasjonsmodeller, der GFP-ekspresjon muliggjør ikke-invasiv overvåking av tumorprogresjon, metastatisk spredning og respons på terapeutiske inngrep. Fluorescensbaserte fenotypiske profileringsmetoder har vist at tykktarmskreftcellelinjer, inkludert HCT116, viser tydelige intracellulære signaturer som kan fanges opp gjennom avbildningsbaserte metoder, noe som underbygger nytten av fluorescerende markører som GFP for høyinnholds-screening.

HCT116-GFP fungerer som et robust verktøy for å undersøke biologien bak tykktarmskreft, og muliggjør detaljert analyse av tumorcelleatferd, interaksjoner i mikromiljøet og terapeutisk effekt både i grunnleggende og translasjonell forskning.

Genetisk modifisering: Stabilt modifisert ved replikasjonsinkompetent lentiviral transduksjon for å uttrykke det grønne fluorescerende proteinreporteren ZsGreen1; opprettholdes som en polyklonal populasjon under puromycin-seleksjon (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-inneslutning.

37 °C, 5 %_CO2, befuktet atmosfære.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

Hos Cytion står vi bak kvaliteten og levedyktigheten til produktene våre. Vi garanterer at cellene våre vil være levedyktige ved starten av dyrkingen i 60 dager etter at de er sendt fra våre anlegg. Vi forsikrer at alle materialer er i samsvar med spesifikasjonene som er beskrevet i analysesertifikatet og/eller produktarket

For fullstendig informasjon, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantierklæring