HCT116-GFP

HCT116-GFP е генетично модифициран вариант на клетъчната линия HCT116 от човешки колоректален карцином, създаден така, че постоянно да експресира зелен флуоресцентен протеин (GFP). Първоначалната линия HCT116 произхожда от карцином на дебелото черво на възрастен пациент и се използва широко като модел на колоректален рак с дефицит на репарация на несъответствията (MMR-дефицит). Цитогенетичните анализи показват, че клетките HCT116 обикновено притежават почти диплоиден кариотип с определени хромозомни промени, включително структурни прегрупирания и вариации в броя на копията, характерни за колоректални тумори с положителна микросателитна нестабилност. Въвеждането на репортерния ген GFP позволява визуализация в реално време на клетъчното поведение, без да се променят съществено присъщите генетични и фенотипни свойства на родителската линия.

Маркирането с GFP в HCT116-GFP клетки обикновено се постига чрез стабилна трансфекция, което води до еднородна флуоресценция, улесняваща визуализацията на живи клетки, проследяването на клетките и количествения анализ на пролиферацията, миграцията и динамиката на туморния растеж. Тази модификация е особено ценна при in vitro тестове и in vivo модели с ксенографти, където експресията на GFP позволява неинвазивно наблюдение на туморната прогресия, метастатичното разпространение и отговора към терапевтични интервенции. Подходите за фенотипно профилиране, базирани на флуоресценция, са показали, че клетъчните линии на рак на дебелото черво, включително HCT116, проявяват отличителни вътреклетъчни характеристики, които могат да бъдат уловени чрез методики, основани на визуализация, което подкрепя полезността на флуоресцентни репортери като GFP за приложения за скрининг с високо съдържание.

HCT116-GFP служи като надежден инструмент за изследване на биологията на колоректалния рак, като позволява подробен анализ на поведението на туморните клетки, взаимодействията в микросредата и терапевтичната ефикасност както в контекста на фундаменталните, така и на транслационните изследвания.

Генетична модификация: Стабилно модифицирана чрез репликационно-некомпетентна лентивирусна трансдукция за експресия на репортера зелен флуоресцентен протеин ZsGreen1; поддържана като поликлонална популация при селекция с пуромицин (1–5 µg/mL). Ниво на биологична безопасност S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация