HCT116-GFP

HCT116-GFP is een genetisch gemodificeerde afgeleide van de menselijke colorectale carcinoomcellijn HCT116, die zo is gemanipuleerd dat deze constitutief groen fluorescerend eiwit (GFP) tot expressie brengt. De oorspronkelijke HCT116-lijn is afkomstig van een coloncarcinoom van een volwassen patiënt en wordt op grote schaal gebruikt als model voor colorectale kanker met een tekort aan mismatch-reparatie (MMR-deficiënt). Cytogenetische analyses hebben aangetoond dat HCT116-cellen doorgaans een bijna-diploïd karyotype vertonen met gedefinieerde chromosomale veranderingen, waaronder structurele herschikkingen en variaties in het aantal kopieën die kenmerkend zijn voor microsatellietinstabiliteit-positieve colorectale tumoren. Door het GFP-reportergen in te brengen, kan het celgedrag in realtime worden gevisualiseerd zonder de intrinsieke genetische en fenotypische eigenschappen van de oorspronkelijke lijn wezenlijk te veranderen.

De GFP-markering in HCT116-GFP-cellen wordt doorgaans bereikt door middel van stabiele transfectie, wat resulteert in uniforme fluorescentie die beeldvorming van levende cellen, het volgen van cellen en kwantitatieve analyse van proliferatie, migratie en de dynamiek van tumorgroei vergemakkelijkt. Deze modificatie is met name waardevol in in-vitro-assays en in-vivo-xenotransplantaatmodellen, waar GFP-expressie niet-invasieve monitoring van tumorprogressie, metastatische verspreiding en respons op therapeutische interventies mogelijk maakt. Op fluorescentie gebaseerde benaderingen voor fenotypische profilering hebben aangetoond dat colonkankercellijnen, waaronder HCT116, onderscheidende intracellulaire kenmerken vertonen die kunnen worden vastgelegd via beeldvormingstechnieken, wat het nut van fluorescerende reporters zoals GFP voor high-content screening-toepassingen onderstreept.

HCT116-GFP fungeert als een robuust hulpmiddel voor het onderzoek naar de biologie van colorectale kanker en maakt een gedetailleerde analyse mogelijk van het gedrag van tumorcellen, interacties met de micro-omgeving en de therapeutische werkzaamheid, zowel in fundamenteel als in translationeel onderzoek.

Genetische modificatie: Stabiel gemodificeerd door replicatie-incompetente lentivirale transductie om de ZsGreen1-groene fluorescerende eiwitreporter tot expressie te brengen; in stand gehouden als een polyklonale populatie onder puromycineselectie (1–5 µg/mL). S1/BSL-1-beveiligingsniveau.

37°C, 5%_CO2, bevochtigde atmosfeer.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

Bij Cytion staan we achter de kwaliteit en levensvatbaarheid van onze producten. We garanderen dat onze cellen levensvatbaar zijn bij het begin van de kweek gedurende 60 dagen na verzending vanuit onze faciliteiten. We verzekeren dat alle materialen voldoen aan de specificaties beschreven in het analysecertificaat en/of productblad

Raadpleeg voor volledige informatie onze <a href=""/Wie-zijn-wij/Garantie/"" hreflang=""x-default"">Garantieverklaring