HCT116-GFP

A HCT116-GFP é um derivado geneticamente modificado da linhagem celular HCT116 de carcinoma colorretal humano, projetada para expressar constitutivamente a proteína fluorescente verde (GFP). A linhagem parental HCT116 tem origem em um carcinoma de cólon de um paciente adulto e é amplamente utilizada como modelo de câncer colorretal com deficiência de reparo de incompatibilidade (MMR-deficiente). Análises citogenéticas demonstraram que as células HCT116 apresentam, tipicamente, um cariótipo quase diploide com alterações cromossômicas definidas, incluindo rearranjos estruturais e variações no número de cópias características de tumores colorretais com instabilidade de microssatélites positiva. A introdução do gene repórter GFP permite a visualização em tempo real do comportamento celular sem alterar substancialmente as propriedades genéticas e fenotípicas intrínsecas da linhagem parental.

A marcação com GFP nas células HCT116-GFP é comumente obtida por meio de transfecção estável, resultando em fluorescência uniforme que facilita a imagem de células vivas, o rastreamento celular e a análise quantitativa da proliferação, migração e dinâmica de crescimento tumoral. Essa modificação é particularmente valiosa em ensaios in vitro e em modelos de xenoenxertos in vivo, nos quais a expressão de GFP permite o monitoramento não invasivo da progressão tumoral, da disseminação metastática e da resposta a intervenções terapêuticas. Abordagens de perfil fenotípico baseadas em fluorescência demonstraram que linhagens celulares de câncer de cólon, incluindo a HCT116, exibem assinaturas intracelulares distintas que podem ser capturadas por meio de metodologias baseadas em imagens, corroborando a utilidade de repórteres fluorescentes, como a GFP, para aplicações de triagem de alto conteúdo.

A HCT116-GFP serve como uma ferramenta robusta para investigar a biologia do câncer colorretal, permitindo a análise detalhada do comportamento das células tumorais, das interações com o microambiente e da eficácia terapêutica, tanto em contextos de pesquisa básica quanto translacional.

Modificação genética: Modificada de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, a fim de expressar o repórter de proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantida como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Contenção S1/BSL-1.

37 °C, 5% de CO₂, atmosfera umidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para preservação a longo prazo, coloque os frascos em nitrogênio líquido em fase de vapor a uma temperatura entre aproximadamente −150 e −196 °C. O armazenamento a −80 °C é aceitável apenas como uma etapa intermediária de curta duração antes da transferência para o nitrogênio líquido.

As linhagens celulares criopreservadas são enviadas em gelo seco, em embalagens isoladas e validadas, com refrigerante suficiente para manter a temperatura em aproximadamente −78 °C durante todo o transporte. Ao receber a remessa, inspecione o recipiente imediatamente e transfira os frascos sem demora para o local de armazenamento adequado.

Na Cytion, garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células permanecerão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou na Ficha Técnica do Produto.

Para obter todos os detalhes, consulte nossa Declaração de Garantia.