HCT116-GFP

A HCT116-GFP é um derivado geneticamente modificado da linha celular HCT116 de carcinoma colorretal humano, concebida para expressar de forma constitutiva a proteína fluorescente verde (GFP). A linha parental HCT116 tem origem num carcinoma do cólon de um doente adulto e é amplamente utilizada como modelo de cancro colorretal com deficiência na reparação de desajustes (MMR-deficiente). Análises citogenéticas demonstraram que as células HCT116 apresentam tipicamente um cariótipo quase diploide com alterações cromossómicas definidas, incluindo rearranjos estruturais e variações no número de cópias características de tumores colorretais positivos para instabilidade de microssatélites. A introdução do gene repórter GFP permite a visualização em tempo real do comportamento celular sem alterar substancialmente as propriedades genéticas e fenotípicas intrínsecas da linha parental.

A marcação com GFP nas células HCT116-GFP é normalmente obtida através de transfecção estável, resultando numa fluorescência uniforme que facilita a imagiologia de células vivas, o rastreio celular e a análise quantitativa da proliferação, migração e dinâmica de crescimento tumoral. Esta modificação é particularmente valiosa em ensaios in vitro e em modelos de xenoenxertos in vivo, onde a expressão de GFP permite a monitorização não invasiva da progressão tumoral, da disseminação metastática e da resposta a intervenções terapêuticas. As abordagens de caracterização fenotípica baseadas na fluorescência demonstraram que as linhas celulares de cancro do cólon, incluindo a HCT116, exibem assinaturas intracelulares distintas que podem ser captadas através de metodologias baseadas em imagiologia, o que reforça a utilidade de marcadores fluorescentes, como a GFP, para aplicações de triagem de alto conteúdo.

A HCT116-GFP serve como uma ferramenta robusta para investigar a biologia do cancro colorretal, permitindo uma análise detalhada do comportamento das células tumorais, das interações microambientais e da eficácia terapêutica, tanto em contextos de investigação básica como translacional.

Modificação genética: Modificada de forma estável por transdução lentiviral incompetente para replicação, de modo a expressar o repórter de proteína fluorescente verde ZsGreen1; mantida como uma população policlonal sob seleção com puromicina (1–5 µg/mL). Contenção S1/BSL-1.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia