HCT116-GFP

HCT116-GFP je gensko spremenjena različica človeške celične linije HCT116, ki izvira iz kolorektalnega karcinoma in je bila genetsko spremenjena tako, da konstantno izraža zeleni fluorescenčni protein (GFP). Izvorna linija HCT116 izvira iz karcinoma debelega črevesa odraslega bolnika in se pogosto uporablja kot model kolorektalnega raka z okvaro popravljanja neskladij (MMR-deficientnega). Citogenetske analize so pokazale, da celice HCT116 običajno kažejo skoraj diploiden kariotip z opredeljenimi kromosomskimi spremembami, vključno s strukturnimi preureditvami in variacijami števila kopij, značilnimi za kolorektalne tumorje, pozitivne na nestabilnost mikrosatelitov. Uvedba poročevalskega gena GFP omogoča vizualizacijo celičnega obnašanja v realnem času, ne da bi bistveno spremenila notranje genetske in fenotipne lastnosti izvorne linije.

Označevanje z GFP v celicah HCT116-GFP se običajno doseže s stabilno transfekcijo, kar zagotavlja enakomerno fluorescenco, ki olajšuje slikanje živih celic, sledenje celic ter kvantitativno analizo proliferacije, migracije in dinamike rasti tumorja. Ta modifikacija je še posebej dragocena v in vitro testih in in vivo modelih ksenotransplantatov, kjer izražanje GFP omogoča neinvazivno spremljanje napredovanja tumorja, širjenja metastaz in odziva na terapevtske posege. Pristopi fenotipskega profiliranja na podlagi fluorescenca so pokazali, da celične linije raka debelega črevesa, vključno z HCT116, kažejo značilne intracelularne značilnosti, ki jih je mogoče zajeti z metodologijami, temelječimi na slikanju, kar podpira uporabnost fluorescenčnih markerjev, kot je GFP, za aplikacije presejanja z visoko vsebnostjo.

HCT116-GFP služi kot zanesljivo orodje za raziskovanje biologije kolorektalnega raka, saj omogoča podrobno analizo vedenja tumorskih celic, interakcij z mikrookoljem in terapevtske učinkovitosti tako v okviru temeljnih kot translacijskih raziskav.

Genska modifikacija: Stabilno modificirana z replikacijsko nesposobno lentiviralno transdukcijo za izražanje zelenega fluorescenčnega beljakovinskega poročevalca ZsGreen1; ohranjena kot poliklonalna populacija pod selekcijo s puromicinom (1–5 µg/mL). Varnostna stopnja S1/BSL-1.

37 °C, 5 %_CO2, vlažno ozračje.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

V podjetju Cytion stojimo za kakovostjo in uporabnostjo svojih izdelkov. Zagotavljamo, da bodo naše celice ob začetku gojenja še 60 dni po odpremi iz naših obratov vitalne. Zagotavljamo, da so vsi materiali skladni s specifikacijami, opisanimi v potrdilu o analizi in/ali listu izdelka

Za vse podrobnosti si oglejte našo <a href=""/Kdo smo/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garancijsko izjavo