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NCH644 细胞
Tissue
大脑
Disease
胶质母细胞瘤

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NCH644 细胞

Cell line · Product number 300124

The NCH644 cell line is a glioblastoma stem-like cell line derived from patient tumors that lack EGFR amplification, making it a valuable model for studyi...

US$800.00excl. tax and shipping
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1

01General information

Description

NCH644细胞系是一种胶质母细胞瘤干样细胞系，来源于缺乏表皮生长因子受体扩增的患者肿瘤，因此是研究胶质母细胞瘤生物学，特别是生长因子信号转导和干细胞特性的宝贵模型。研究表明，在NCH644细胞中，碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）在介导生长和维持干细胞特性方面起着重要作用，而表皮生长因子（EGF）则没有类似作用。NCH644细胞通过增加CD133和nestin等干细胞标记物的表达对bFGF做出反应，它们还表现出更强的抗凋亡能力。这种抗性加上缺乏表皮生长因子受体扩增，使NCH644成为了解胶质母细胞瘤干样细胞行为的合适模型，尤其是在不同生长因子条件下。

NCH644的另一个显著特点是，与NCH421k等其他胶质母细胞瘤干样细胞系相比，它的增殖速度较慢。然而，当受到bFGF刺激时，NCH644细胞显示表皮生长因子受体表达增加，即使没有表皮生长因子受体扩增，这突显了成纤维细胞生长因子受体（FGFR）和表皮生长因子受体信号通路之间的相互作用。此外，bFGF 在增加 NCH644 细胞的克隆性和多潜能性方面发挥了作用，进一步支持了 bFGF 对维持这些细胞的胶质瘤干样特性至关重要的观点。

研究还表明，NCH644细胞中存在保持标记、缓慢循环的亚群，这些亚群表现出更强的致瘤性和对辐照和替莫唑胺等治疗的耐受性。NCH644 株系中的这种标记保持细胞亚群具有很强的致瘤性，即使细胞数量很少，也能在免疫功能低下的小鼠体内形成肿瘤。这些特点加上它们对标准疗法的抵抗力，使NCH644成为研究针对胶质母细胞瘤干细胞的治疗策略的重要工具。

Tissue
大脑
Disease
胶质母细胞瘤

02Classification

Organism
Human
Sex
Female
Biosafety level
1

03Characteristics

Tumourigenic
是
Ploidy status
非整倍体

04Identifiers

Citation
NCH644（Cytion 目录号 300124）
NCBI TaxID
9606
Cellosaurus
CVCL_x914

05Expression and susceptibility

Antigen expression
CD133 高度阳性

06Handling and culture

Culture medium
DMEM:Ham's F12（1:1），w: 3.1 g/L 葡萄糖，w: 2.5 mM L-谷氨酰胺，w: 15 mM HEPES，w: 0.5 mM 丙酮酸钠，w: 1.2 g/L NaHCO3（Cytion 文章编号 820400a）。
Incubation atmosphere

37°C, 5%CO2, 加湿环境。

Supplements
在培养基中加入5 mg/L 肝素、20 ng/mL bFGF、20 微克/L EGF、 5 mg/L 胰岛素、100 mg/L 转铁蛋白、5.2 微克/L 亚硒酸钠、6.3 微克/L 黄体酮、161.1 微克/L 腐胺、50 mg/L 氢化可的松
Subculturing
对于球形培养物的亚培养，首先使用带有 1000 μl 滤芯的 Eppendorf 移液器，通过上下移液 5 到 10 次，机械地将球形培养物分离。然后，将混合物在室温下以 300g 离心 5 分钟，使细胞沉淀。弃去上清液，用新鲜培养液重悬细胞团。最后，将重新悬浮的细胞转移到新的培养容器中，以促进球形细胞的进一步形成。这种方法可确保球形体的有效分解，并为它们在新环境中继续生长做好准备。
Seeding density
2 × 10⁵ 个细胞/毫升
Fluid renewal
每周 2 至 3 次
Post-thaw recovery
解冻后，让细胞从冷冻过程中恢复至少 24 到 48 小时。
Thawing and culturing

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Quality control and cryopreservation

Sterility

使用基于 PCR 的检测方法和基于发光的支原体检测方法排除支原体污染。

为确保没有细菌、真菌或酵母菌污染，每天都要对细胞培养物进行目视检查。

Freeze medium
作为冷冻保存培养基，我们使用 50% 基础培养基 + 40% FBS + 10% DMSO 或 CM-1（Cytion 目录号 800100），其中包括优化的渗透保护剂和代谢稳定剂，以促进恢复并减少冷冻引起的应激。
Storage conditions

如需长期保存，可将样品瓶放入气相液氮中，温度约为 -150 至 -196 ℃。在-80 °C下保存只能作为转入液氮前的短暂过渡。

Shipping conditions

冷冻保存的细胞系用干冰装运，并用经过验证的隔热包装和足够的制冷剂在整个运输过程中保持约 -78 °C 的温度。收到货后，应立即检查容器，并立即将小瓶转移到适当的储藏室。

08Donor

Donor age
66 岁
Ethnicity
高加索人