Buňky NCH644

Buněčná linie NCH644 je glioblastomu podobná kmenová buněčná linie odvozená z nádorů pacientů, u nichž chybí amplifikace EGFR, což z ní činí cenný model pro studium biologie glioblastomu, zejména v kontextu signalizace růstových faktorů a vlastností kmenových buněk. Studie prokázaly, že v buňkách NCH644 hraje základní fibroblastový růstový faktor (bFGF) významnou roli při zprostředkování růstu a udržování vlastností kmenových buněk, zatímco epidermální růstový faktor (EGF) podobné účinky nevykazuje. Buňky NCH644 reagují na bFGF zvýšením exprese markerů kmenových buněk, jako jsou CD133 a nestin, a vykazují také zvýšenou odolnost vůči apoptóze. Tato odolnost spolu s absencí amplifikace EGFR činí z NCH644 vhodný model pro pochopení chování kmenových buněk glioblastomu, zejména za různých podmínek působení růstových faktorů.

Dalším pozoruhodným rysem NCH644 je pomalejší proliferace ve srovnání s jinými glioblastomovými kmenovými buněčnými liniemi, jako je NCH421k. Při stimulaci bFGF však buňky NCH644 vykazují zvýšenou expresi EGFR, a to i v případě, že nedošlo k amplifikaci EGFR, což poukazuje na interakci mezi receptory fibroblastového růstového faktoru (FGFR) a signálními cestami EGFR. Navíc bFGF hraje roli při zvyšování klonogenity a multipotence buněk NCH644, což dále podporuje domněnku, že bFGF je klíčový pro udržení kmenových vlastností těchto buněk podobných gliomu.

Bylo také prokázáno, že buňky NCH644 obsahují subpopulace s pomalým cyklem, které vykazují zvýšenou nádorovou aktivitu a odolnost vůči léčbě, jako je ozařování a temozolomid. Tato subpopulace buněk uchovávajících značku v rámci linie NCH644 je vysoce tumorigenní a je schopna vytvářet nádory u imunokompromitovaných myší i při malém počtu buněk. Tyto vlastnosti spolu s jejich odolností vůči standardní léčbě činí z NCH644 kritický nástroj pro zkoumání terapeutických strategií zaměřených na kmenové buňky glioblastomu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminace mykoplazmaty je vyloučena jak pomocí testů založených na PCR, tak pomocí luminiscenčních metod detekce mykoplazmy.

Aby se zajistilo, že nedojde ke kontaminaci bakteriemi, plísněmi nebo kvasinkami, jsou buněčné kultury denně podrobovány vizuálním kontrolám.

Pro dlouhodobé uchování umístěte lahvičky do kapalného dusíku v plynné fázi při teplotě přibližně -150 až -196 °C. Skladování při -80 °C je přijatelné pouze jako krátký přechodný krok před přemístěním do kapalného dusíku.

Kryokonzervované buněčné linie se přepravují na suchém ledu v ověřených, izolovaných obalech s dostatečným množstvím chladiva, aby se po celou dobu přepravy udržovala teplota přibližně -78 °C. Po obdržení ihned zkontrolujte obal a neprodleně přeneste lahvičky do vhodného skladu.

Ve společnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopností našich produktů. Zaručujeme, že naše buňky budou životaschopné na začátku kultivace po dobu 60 dnů po odeslání z našich zařízení. Zaručujeme, že všechny materiály odpovídají specifikacím popsaným v certifikátu analýzy a/nebo v produktovém listu

Úplné informace naleznete v našem <a href=""/Kdo-jsme/Záruka/"" hreflang=""x-default"">Záručním prohlášení