NCH644細胞

NCH644細胞株は、EGFRの増幅を欠く患者腫瘍に由来する膠芽腫幹細胞様細胞株であり、膠芽腫の生物学、特に成長因子シグナル伝達と幹細胞の特性を研究するための貴重なモデルとなっている。研究により、NCH644細胞では塩基性線維芽細胞増殖因子（bFGF）が増殖の仲介と幹細胞特性の維持に重要な役割を果たしているのに対し、上皮増殖因子（EGF）は同様の効果を示さないことが示された。NCH644細胞は、CD133やネスチンなどの幹細胞マーカーの発現を増加させることによってbFGFに応答し、またアポトーシスに対する抵抗性を示す。この耐性は、EGFRの増幅がないことと相まって、NCH644を、特に異なる増殖因子条件下での膠芽腫幹細胞様細胞の挙動を理解するのに適したモデルにしている。

NCH644のもう一つの特筆すべき特徴は、NCH421kのような他の膠芽腫幹細胞様細胞株と比較すると、増殖速度が遅いことである。しかしながら、bFGFで刺激すると、NCH644細胞はEGFRの増幅がなくてもEGFRの発現増加を示し、これは線維芽細胞増殖因子受容体（FGFR）とEGFRシグナル伝達経路の相互作用を強調している。さらに、bFGFはNCH644細胞のクローン形成能と多能性を高める役割を果たしており、bFGFがこれらの細胞の神経膠腫幹細胞のような性質を維持するために重要であるという考えをさらに裏付けている。

NCH644細胞はまた、放射線照射やテモゾロミドなどの治療に対して腫瘍形成能と抵抗性の増大を示す、標識保持性の低サイクルの亜集団を持っていることも示されている。NCH644株内のこの標識保持細胞亜集団は腫瘍形成性が高く、細胞数が少なくても免疫不全マウスで腫瘍を形成することができる。これらの特徴は、標準的治療に対する抵抗性と相まって、NCH644を膠芽腫幹細胞を標的とする治療戦略を研究するための重要なツールにしている。

37℃、5%_CO2、加湿雰囲気。

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

長期保存の場合、バイアルを-150～-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

サイシオンは、製品の品質と生存率を保証します。 当社では、培養を開始した時点で、当社施設からの出荷後60日間、細胞が生存可能であることを保証しています。 すべての材料が、分析証明書および／または製品シートに記載された仕様に適合していることを保証します。

詳細については、<a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Warranty Statement をご参照ください。