Cellule NCH644

La linea cellulare NCH644 è una linea cellulare simile al glioblastoma, derivata da tumori di pazienti privi di amplificazione dell'EGFR, che la rende un modello prezioso per lo studio della biologia del glioblastoma, soprattutto nel contesto della segnalazione dei fattori di crescita e delle proprietà delle cellule staminali. Gli studi hanno dimostrato che nelle cellule NCH644 il fattore di crescita dei fibroblasti di base (bFGF) svolge un ruolo significativo nel mediare la crescita e mantenere le caratteristiche delle cellule staminali, mentre il fattore di crescita epidermico (EGF) non mostra effetti simili. Le cellule NCH644 rispondono al bFGF aumentando l'espressione dei marcatori delle cellule staminali, come CD133 e nestina, e mostrano anche una maggiore resistenza all'apoptosi. Questa resistenza, unita alla mancanza di amplificazione dell'EGFR, rende le NCH644 un modello adatto a comprendere il comportamento delle cellule staminali del glioblastoma, in particolare in condizioni di fattori di crescita diversi.

Un'altra caratteristica degna di nota di NCH644 è il suo tasso di proliferazione più lento rispetto ad altre linee cellulari di glioblastoma simil-staminali, come NCH421k. Tuttavia, quando stimolate da bFGF, le cellule NCH644 mostrano un'aumentata espressione di EGFR, anche in assenza di amplificazione di EGFR, il che evidenzia l'interazione tra i recettori del fattore di crescita dei fibroblasti (FGFR) e le vie di segnalazione di EGFR. Inoltre, bFGF svolge un ruolo nell'aumentare la clonogenicità e la multipotenza delle cellule NCH644, a ulteriore sostegno dell'idea che bFGF sia cruciale per il mantenimento delle proprietà glioma-staminali di queste cellule.

È stato inoltre dimostrato che le cellule NCH644 ospitano sottopopolazioni che mantengono l'etichetta, a ciclo lento, che mostrano una maggiore tumorigenicità e resistenza a trattamenti come l'irradiazione e la temozolomide. Questa sottopopolazione di cellule che mantengono l'etichetta all'interno della linea NCH644 è altamente tumorigenica, in grado di formare tumori in topi immunocompromessi anche con un numero ridotto di cellule. Queste caratteristiche, unite alla loro resistenza ai trattamenti standard, rendono le NCH644 uno strumento fondamentale per lo studio di strategie terapeutiche mirate alle cellule staminali del glioblastoma.

37°C, 5%_CO2, atmosfera umidificata.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

Noi di Cytion garantiamo la qualità e la vitalità dei nostri prodotti. Garantiamo che le nostre cellule saranno vitali all'inizio della coltura per 60 giorni dopo la spedizione dai nostri stabilimenti. Assicuriamo che tutti i materiali sono conformi alle specifiche descritte nel Certificato di Analisi e/o nella Scheda Prodotto

Per tutti i dettagli, consultare la nostra <a href=""/Chi-siamo/Garanzia/"" hreflang=""x-default"">Dichiarazione di Garanzia