Células NCH644

A linha celular NCH644 é uma linha celular semelhante à célula estaminal do glioblastoma, derivada de tumores de doentes sem amplificação do EGFR, o que a torna um modelo valioso para o estudo da biologia do glioblastoma, especialmente no contexto da sinalização do fator de crescimento e das propriedades das células estaminais. Estudos demonstraram que, nas células NCH644, o fator básico de crescimento dos fibroblastos (bFGF) desempenha um papel significativo na mediação do crescimento e na manutenção das caraterísticas das células estaminais, ao passo que o fator de crescimento epidérmico (EGF) não apresenta efeitos semelhantes. As células NCH644 respondem ao bFGF aumentando a expressão de marcadores de células estaminais, como o CD133 e a nestina, e também apresentam uma maior resistência à apoptose. Esta resistência, aliada à ausência de amplificação do EGFR, faz das células NCH644 um modelo adequado para compreender o comportamento das células estaminais do glioblastoma, em particular sob diferentes condições de factores de crescimento.

Outra caraterística notável da NCH644 é a sua taxa de proliferação mais lenta quando comparada com outras linhas celulares semelhantes a células estaminais de glioblastoma, como a NCH421k. No entanto, quando estimuladas por bFGF, as células NCH644 apresentam um aumento da expressão de EGFR, mesmo na ausência de amplificação do EGFR, o que evidencia a interação entre os receptores do fator de crescimento dos fibroblastos (FGFRs) e as vias de sinalização do EGFR. Além disso, o bFGF desempenha um papel no aumento da clonogenicidade e da multipotência das células NCH644, apoiando ainda mais a noção de que o bFGF é crucial para a manutenção das propriedades estaminais do glioma destas células.

Foi também demonstrado que as células NCH644 abrigam subpopulações de ciclo lento com retenção de marcadores que apresentam maior tumorigenicidade e resistência a tratamentos como a irradiação e a temozolomida. Esta subpopulação de células com retenção de marcadores na linha NCH644 é altamente tumorigénica, capaz de formar tumores em ratinhos imunocomprometidos, mesmo com um número reduzido de células. Estas caraterísticas, combinadas com a sua resistência aos tratamentos padrão, fazem da linha NCH644 uma ferramenta essencial para a investigação de estratégias terapêuticas dirigidas às células estaminais do glioblastoma.

37°C, 5%_CO2, atmosfera humidificada.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

Na Cytion, nós garantimos a qualidade e a viabilidade de nossos produtos. Garantimos que nossas células serão viáveis no início da cultura por 60 dias após o envio de nossas instalações. Asseguramos que todos os materiais estão em conformidade com as especificações descritas no Certificado de Análise e/ou Folha de Produto

Para mais informações, consulte a nossa <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Declaração de Garantia