Клетки NCH644

Клетъчната линия NCH644 е клетъчна линия, подобна на стволовите клетки на глиобластома, получена от тумори на пациенти, при които липсва амплификация на EGFR, което я прави ценен модел за изучаване на биологията на глиобластома, особено в контекста на сигнализацията на растежните фактори и свойствата на стволовите клетки. Проучванията показват, че в клетките NCH644 основният фибробластен растежен фактор (bFGF) играе значителна роля в подпомагането на растежа и поддържането на характеристиките на стволовите клетки, докато епидермалният растежен фактор (EGF) не проявява подобни ефекти. Клетките NCH644 реагират на bFGF, като увеличават експресията на маркери за стволови клетки като CD133 и nestin, а също така проявяват повишена устойчивост към апоптоза. Тази устойчивост, съчетана с липсата на амплификация на EGFR, прави NCH644 подходящ модел за разбиране на поведението на глиобластомните стволови клетки, особено при различни условия на растежните фактори.

Друга забележителна особеност на NCH644 е по-бавната му пролиферация в сравнение с други глиобластомни стволови клетъчни линии, като например NCH421k. При стимулиране с bFGF обаче клетките NCH644 показват повишена експресия на EGFR, дори при липса на амплификация на EGFR, което подчертава взаимодействието между рецепторите за фибробластни растежни фактори (FGFR) и сигналните пътища на EGFR. Освен това bFGF играе роля за увеличаване на клоногенността и мултипотентността на клетките NCH644, което допълнително подкрепя схващането, че bFGF е от решаващо значение за поддържане на глиомоподобните свойства на тези клетки.

Установено е също, че клетките NCH644 притежават субпопулации с бавен цикъл, които запазват маркировката и проявяват повишена туморогенност и устойчивост към лечения като облъчване и темозоломид. Тази субпопулация от клетки, които задържат етикета, в рамките на линията NCH644 е силно туморогенна, способна да образува тумори в имунокомпрометирани мишки дори при малък брой клетки. Тези характеристики, съчетани с устойчивостта им към стандартни лечения, превръщат NCH644 в изключително важен инструмент за изследване на терапевтични стратегии, насочени към стволовите клетки на глиобластома.

37°C, 5%_CO2, овлажнена атмосфера.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

Ние в Cytion заставаме зад качеството и жизнеспособността на нашите продукти. Гарантираме, че нашите клетки ще бъдат жизнеспособни в началото на култивирането в продължение на 60 дни след изпращането им от нашите съоръжения. Гарантираме, че всички материали отговарят на спецификациите, описани в сертификата за анализ и/или продуктовата листа

За пълни подробности, моля, направете справка с нашата <a href=""/Кои сме ние/Гаранция/"" hreflang=""x-default"">Гаранционна декларация