NCH644-celler

NCH644-cellinjen är en glioblastomstamliknande cellinje som härrör från patienttumörer som saknar EGFR-amplifiering, vilket gör den till en värdefull modell för att studera glioblastombiologi, särskilt i samband med tillväxtfaktorsignalering och stamcellsegenskaper. Studier har visat att i NCH644-celler spelar basisk fibroblasttillväxtfaktor (bFGF) en viktig roll för att förmedla tillväxt och upprätthålla stamcellsegenskaper, medan epidermal tillväxtfaktor (EGF) inte uppvisar liknande effekter. NCH644-celler svarar på bFGF genom att öka uttrycket av stamcellsmarkörer som CD133 och nestin, och de uppvisar också ökad motståndskraft mot apoptos. Denna resistens, i kombination med avsaknaden av EGFR-amplifiering, gör NCH644 till en lämplig modell för att förstå glioblastomstamliknande cellers beteende, särskilt under olika tillväxtfaktorförhållanden.

En annan anmärkningsvärd egenskap hos NCH644 är dess långsammare proliferationshastighet jämfört med andra glioblastomstamliknande cellinjer, såsom NCH421k. När NCH644-cellerna stimuleras av bFGF uppvisar de dock ett ökat uttryck av EGFR, även i avsaknad av EGFR-amplifiering, vilket belyser samspelet mellan fibroblasttillväxtfaktorreceptorer (FGFR) och EGFR-signalvägar. Dessutom spelar bFGF en roll för att öka klonogeniciteten och multipotenciteten hos NCH644-celler, vilket ytterligare stöder uppfattningen att bFGF är avgörande för att upprätthålla de gliomstamliknande egenskaperna hos dessa celler.

NCH644-celler har också visat sig innehålla subpopulationer av celler som behåller märkningen och har långsam cykling, vilka uppvisar ökad tumörframkallande förmåga och resistens mot behandlingar som strålning och temozolomid. Denna subpopulation av celler med bibehållen märkning inom NCH644-linjen är mycket tumörframkallande och kan bilda tumörer i immunkomprometterade möss även med små cellantal. Dessa egenskaper, i kombination med deras resistens mot standardbehandlingar, gör NCH644 till ett viktigt verktyg för att undersöka terapeutiska strategier som riktar sig mot glioblastomstamceller.

37°C, 5%_CO2, befuktad atmosfär.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

På Cytion står vi bakom våra produkters kvalitet och livskraft. Vi garanterar att våra celler är livsdugliga vid odlingens början i 60 dagar efter leverans från våra anläggningar. Vi försäkrar att allt material överensstämmer med de specifikationer som beskrivs i analyscertifikatet och/eller produktbladet

För fullständig information, se vår <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Garantiförklaring