Bunky NCH644

Bunková línia NCH644 je glioblastómová kmeňová bunková línia odvodená z nádorov pacientov, ktoré nemajú amplifikáciu EGFR, čo z nej robí cenný model na štúdium biológie glioblastómu, najmä v kontexte signalizácie rastových faktorov a vlastností kmeňových buniek. Štúdie preukázali, že v bunkách NCH644 zohráva základný fibroblastový rastový faktor (bFGF) významnú úlohu pri sprostredkovaní rastu a udržiavaní vlastností kmeňových buniek, zatiaľ čo epidermálny rastový faktor (EGF) podobné účinky nevykazuje. Bunky NCH644 reagujú na bFGF zvýšením expresie markerov kmeňových buniek, ako sú CD133 a nestín, a vykazujú aj zvýšenú odolnosť voči apoptóze. Táto odolnosť spolu s chýbajúcou amplifikáciou EGFR robí z NCH644 vhodný model na pochopenie správania kmeňových buniek podobných glioblastómu, najmä za rôznych podmienok pôsobenia rastových faktorov.

Ďalšou pozoruhodnou vlastnosťou NCH644 je pomalšia miera proliferácie v porovnaní s inými glioblastómovými kmeňovými bunkovými líniami, ako je NCH421k. Pri stimulácii bFGF však bunky NCH644 vykazujú zvýšenú expresiu EGFR, a to aj pri absencii amplifikácie EGFR, čo poukazuje na interakciu medzi receptormi fibroblastového rastového faktora (FGFR) a signálnymi dráhami EGFR. Okrem toho bFGF zohráva úlohu pri zvyšovaní klonogenity a multipotencie buniek NCH644, čo ďalej podporuje názor, že bFGF je rozhodujúci pre udržanie kmeňových vlastností týchto buniek podobných gliómu.

Ukázalo sa tiež, že bunky NCH644 ukrývajú subpopulácie s pomalým cyklom, ktoré vykazujú zvýšenú nádorovú aktivitu a odolnosť voči liečbe, ako je ožarovanie a temozolomid. Táto subpopulácia buniek zachovávajúcich značku v rámci línie NCH644 je vysoko tumorigénna a je schopná vytvárať nádory u imunokompromitovaných myší aj pri malom počte buniek. Tieto vlastnosti spolu s ich odolnosťou voči štandardnej liečbe robia z NCH644 kritický nástroj na skúmanie terapeutických stratégií zameraných na kmeňové bunky glioblastómu.

37 °C, 5 %_CO2, zvlhčená atmosféra.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Kontaminácia mykoplazmami sa vylučuje pomocou testov založených na PCR a metód detekcie mykoplaziem založených na luminiscencii.

Aby sa zabezpečilo, že nedošlo ku kontaminácii baktériami, hubami alebo kvasinkami, bunkové kultúry sa denne vizuálne kontrolujú.

Na dlhodobé uchovávanie umiestnite injekčné liekovky do kvapalnej fázy dusíka v pare pri teplote približne -150 až -196 °C. Skladovanie pri teplote -80 °C je prijateľné len ako krátky prechodný krok pred presunom do tekutého dusíka.

Kryokonzervované bunkové línie sa prepravujú na suchom ľade v overených, izolovaných obaloch s dostatočným množstvom chladiva na udržanie teploty približne -78 °C počas celej prepravy. Po prijatí ihneď skontrolujte obal a bezodkladne premiestnite injekčné liekovky do vhodného skladu.

V spoločnosti Cytion si stojíme za kvalitou a životaschopnosťou našich produktov. Garantujeme, že naše bunky budú životaschopné na začiatku kultivácie počas 60 dní po odoslaní z našich zariadení. Zaručujeme, že všetky materiály zodpovedajú špecifikáciám opísaným v certifikáte analýzy a/alebo v produktovom liste

Úplné informácie nájdete v našom <a href=""/Kto sme/záruka/"" hreflang=""x-default"">Vyhlásení o záruke