NCH644-solut

NCH644-solulinja on glioblastooman kantasolulinjan kaltainen solulinja, joka on peräisin potilaan kasvaimista, joissa ei ole EGFR-monistumista, mikä tekee siitä arvokkaan mallin glioblastooman biologian tutkimiseen erityisesti kasvutekijöiden signaloinnin ja kantasolujen ominaisuuksien osalta. Tutkimukset ovat osoittaneet, että NCH644-soluissa perusfibroblastikasvutekijällä (bFGF) on merkittävä rooli kasvun välittäjänä ja kantasoluominaisuuksien ylläpitäjänä, kun taas epidermisen kasvutekijän (EGF) vaikutukset eivät ole samanlaisia. NCH644-solut reagoivat bFGF:ään lisäämällä kantasolumarkkereiden, kuten CD133:n ja nestiinin, ilmentymistä, ja niillä on myös lisääntynyt vastustuskyky apoptoosia vastaan. Tämä resistenssi yhdessä EGFR:n monistumisen puuttumisen kanssa tekee NCH644-soluista sopivan mallin, jonka avulla voidaan ymmärtää glioblastooman kantasolujen kaltaisten solujen käyttäytymistä erityisesti erilaisissa kasvutekijäolosuhteissa.

Toinen merkittävä piirre NCH644:ssä on sen hitaampi lisääntymisnopeus verrattuna muihin glioblastooman kantasolulinjoihin, kuten NCH421k:hon. Kun NCH644-soluja stimuloidaan bFGF:llä, EGFR:n ilmentyminen kuitenkin lisääntyy, vaikka EGFR:n monistumista ei tapahdu, mikä korostaa fibroblastikasvutekijäreseptorien (FGFR) ja EGFR:n signaalireittien välistä vuorovaikutusta. Lisäksi bFGF:llä on merkitystä NCH644-solujen klonogeenisuuden ja monikykyisyyden lisäämisessä, mikä tukee edelleen käsitystä siitä, että bFGF:llä on ratkaiseva merkitys näiden solujen glioomakannan kaltaisten ominaisuuksien ylläpitämisessä.

NCH644-solujen on myös osoitettu sisältävän leimoja säilyttäviä, hitaasti kiertäviä osapopulaatioita, joilla on lisääntynyt kasvainten lisääntyminen ja resistenssi säteilytyksen ja temotsolomidin kaltaisille hoidoille. Tämä NCH644-linjan leimausta pidättävien solujen osapopulaatio on erittäin tumorigeeninen, ja se kykenee muodostamaan kasvaimia immuunipuutteisissa hiirissä jopa pienillä solumäärillä. Nämä ominaisuudet yhdistettynä niiden vastustuskykyyn tavanomaisille hoidoille tekevät NCH644-linjasta kriittisen työkalun, jolla voidaan tutkia glioblastooman kantasoluihin kohdistuvia hoitostrategioita.

37 °C, 5 %_CO2, kostutettu ilmakehä.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia

Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa