Komórki NCH644

Linia komórkowa NCH644 jest macierzystą linią komórkową glejaka wywodzącą się z guzów pacjentów, które nie posiadają amplifikacji EGFR, co czyni ją cennym modelem do badania biologii glejaka, zwłaszcza w kontekście sygnalizacji czynnika wzrostu i właściwości komórek macierzystych. Badania wykazały, że w komórkach NCH644 podstawowy czynnik wzrostu fibroblastów (bFGF) odgrywa znaczącą rolę w pośredniczeniu we wzroście i utrzymywaniu cech komórek macierzystych, podczas gdy naskórkowy czynnik wzrostu (EGF) nie wykazuje podobnych efektów. Komórki NCH644 reagują na bFGF poprzez zwiększenie ekspresji markerów komórek macierzystych, takich jak CD133 i nestin, a także wykazują zwiększoną odporność na apoptozę. Odporność ta, w połączeniu z brakiem amplifikacji EGFR, sprawia, że NCH644 jest odpowiednim modelem do zrozumienia zachowania komórek macierzystych glejaka, szczególnie w warunkach różnych czynników wzrostu.

Inną godną uwagi cechą NCH644 jest wolniejsze tempo proliferacji w porównaniu z innymi liniami komórek macierzystych glejaka, takimi jak NCH421k. Jednak po stymulacji przez bFGF, komórki NCH644 wykazują zwiększoną ekspresję EGFR, nawet przy braku amplifikacji EGFR, co podkreśla interakcję między receptorami czynnika wzrostu fibroblastów (FGFR) a szlakami sygnalizacyjnymi EGFR. Co więcej, bFGF odgrywa rolę w zwiększaniu klonogenności i multipotencji komórek NCH644, co dodatkowo potwierdza pogląd, że bFGF ma kluczowe znaczenie dla utrzymania właściwości macierzystych glejaka tych komórek.

Wykazano również, że komórki NCH644 zawierają subpopulacje o powolnej cykliczności, które wykazują zwiększoną nowotworowość i oporność na leczenie, takie jak napromienianie i temozolomid. Ta subpopulacja komórek zatrzymujących znakowanie w linii NCH644 jest wysoce nowotworowa, zdolna do tworzenia guzów u myszy z obniżoną odpornością, nawet przy małej liczbie komórek. Te cechy, w połączeniu z ich opornością na standardowe leczenie, sprawiają, że NCH644 jest krytycznym narzędziem do badania strategii terapeutycznych ukierunkowanych na komórki macierzyste glejaka.

37°C, 5%_CO2, nawilżona atmosfera.

1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

W Cytion gwarantujemy jakość i żywotność naszych produktów. Gwarantujemy, że nasze komórki będą żywotne na początku hodowli przez 60 dni po wysyłce z naszych zakładów. Zapewniamy, że wszystkie materiały są zgodne ze specyfikacjami opisanymi w certyfikacie analizy i/lub karcie produktu

Szczegółowe informacje można znaleźć w naszej <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang=""x-default"">Oświadczeniu gwarancyjnym