الانتقال إلى المحتوى
خلايا NCH644
الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي الدبقي

المستندات

خلايا NCH644

Cell line · رقم المنتج 300124

سلسلة الخلايا NCH644 هي سلسلة خلايا شبيهة بالخلايا الجذعية لورم الأورام الدبقية، مستمدة من أورام مرضى لا تظهر فيها تضخم جين EGFR، مما يجعلها نموذجًا قيّمًا لدراسة...

€800.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
حسب الطلب
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
  • CoA
1

01معلومات عامة

الوصف

إن خط الخلايا NCH644 هو خط خلايا شبيهة بالورم الأرومي الدبقي الجذعي مشتق من أورام المرضى التي تفتقر إلى تضخيم عامل النمو EGFR، مما يجعله نموذجاً قيماً لدراسة بيولوجيا الورم الأرومي الدبقي، خاصة في سياق إشارات عامل النمو وخصائص الخلايا الجذعية. أظهرت الدراسات أنه في خلايا NCH644، يلعب عامل نمو الأرومة الليفية الأساسية (bFGF) دورًا مهمًا في التوسط في النمو والحفاظ على خصائص الخلايا الجذعية، في حين أن عامل نمو البشرة (EGF) لا يظهر تأثيرات مماثلة. تستجيب خلايا NCH644 لعامل نمو الخلايا الجذعية bFGF من خلال زيادة التعبير عن علامات الخلايا الجذعية مثل CD133 ونيستين، كما أنها تُظهر مقاومة معززة لموت الخلايا المبرمج. هذه المقاومة، إلى جانب عدم وجود تضخيم EGFR، تجعل من NCH644 نموذجًا مناسبًا لفهم سلوك الخلايا الجذعية الشبيهة بالورم الأرومي الدبقي خاصة في ظل ظروف عوامل النمو المختلفة.

ومن السمات البارزة الأخرى للورم الأرومي الدبقي الشبيه بالورم الأرومي الدبقي هي بطء معدل تكاثره مقارنةً بخطوط الخلايا الشبيهة بالورم الأرومي الدبقي الأخرى، مثل NCH421k. ومع ذلك، عندما يتم تحفيزها بواسطة عامل النمو الجذعي للورم الدبقي الأرومي الدماغي (bFGF)، تُظهر خلايا NCH644 زيادة في التعبير عن عامل النمو الليفي (FGFRs)، حتى في غياب تضخيم عامل النمو الليفي (EGFR)، مما يسلط الضوء على التفاعل بين مستقبلات عامل نمو الأرومة الليفية (FGFRs) ومسارات إشارات عامل النمو الليفي (EGFR). وعلاوة على ذلك، يلعب عامل نمو الورم الجذعي الليفي دورًا في زيادة استنساخ خلايا الورم الجذعي الدماغي (NCH644) وتعدد فاعليتها، مما يدعم فكرة أن عامل نمو الورم الجذعي الليفي (bFGF) ضروري للحفاظ على الخصائص الشبيهة بالورم الجذعي لهذه الخلايا.

كما ثبت أيضًا أن خلايا NCH644 تحتوي على مجموعات سكانية فرعية بطيئة الدوران تحتفظ بالعلامات وتظهر زيادة في نشوء الورم ومقاومة للعلاجات مثل التشعيع والتيموزولوميد. هذه المجموعة السكانية الفرعية للخلايا المحتفظة بالملصقات داخل خط NCH644 شديدة التولّد الورمي وقادرة على تكوين أورام في الفئران التي تعاني من نقص المناعة حتى مع وجود أعداد قليلة من الخلايا. هذه الخصائص، بالإضافة إلى مقاومتها للعلاجات القياسية، تجعل من NCH644 أداة مهمة لدراسة الاستراتيجيات العلاجية التي تستهدف الخلايا الجذعية للورم الأرومي الدبقي.

الأنسجة
الدماغ
المرض
الورم الأرومي الدبقي

02التصنيف

كائن حي
إنسان
الجنس
أنثى
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

مُسبِّب للأورام
نعم
حالة البلويدية
أنيوبلويد

04المعرّفات

المرجع
NCH644 (الرقم الكتالوجي لسيتيون 300124)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
9606
سيلوصور
CVCL_x914

05التعبير والقابلية للإصابة

التعبير عن المستضد
CD133 إيجابي للغاية

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM: DMEM:Ham's F12 (1:1)، ث: 3.1 جم/لتر جلوكوز، ث: 2.5 ملي مولار جلوتامين، ث: 15 ملي مولار هيبيس (15 ملي مولار هيبيس)، ث: 0.5 ملي مولار بيروفات الصوديوم، ث: 1.2 ملي مولار/لتر NaHCO3 (رقم المادة 820400a)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
أضف إلى الوسط 5 ملغ/لتر من الهيبارين، و20 نانوغرام/مل من bFGF، و20 ميكروغرام/لتر من EGF، 5 ملغ/لتر من الأنسولين، و100 ملغ/لتر من الترانسفيرين، و5,2 ميكروغرام/لتر من سيلينيت الصوديوم، و6,3 ميكروغرام/لتر من البروجسترون، و161,1 ميكروغرام/لتر من البوتريسين، و50 ملغ/لتر من الهيدروكورتيزون
إعادة الاستنبات
لزراعة مزارع الخلايا الكروية الفرعية، ابدأ بتفكيك الأجسام الكروية ميكانيكياً من خلال السحب لأعلى ولأسفل من 5 إلى 10 مرات باستخدام ماصة إيبندورف مع أطراف مرشح 1000 ميكرولتر. بعد ذلك، يُطرد الخليط بالطرد المركزي عند 300 جم لمدة 5 دقائق في درجة حرارة الغرفة لتكوير الخلايا. تخلص من المادة الطافية وأعد تعليق كريات الخلايا في وسط مستنبت جديد. وأخيراً، انقل الخلايا المعاد تعليقها إلى أوعية استزراع جديدة لتعزيز تكوين المزيد من الخلايا الكروية. تضمن هذه الطريقة تكسير الخلايا الكروية بكفاءة وتهيئتها للنمو المستمر في بيئة جديدة
كثافة البذر
2 × 105 خلية/مل
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان اترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد لمدة 24 إلى 48 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم 50% من الوسط القاعدي + 40% من الحمض الأميني القاعدي + 10% من DMSO، أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناتج عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

عمر المتبرع
66 سنة
الأصل العرقي
قوقازي