الانتقال إلى المحتوى
F9
الأنسجة
الخصية
المرض
السرطان المسخي

المستندات

F9

Cell line · رقم المنتج 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00باستثناء الضريبة وتكاليف الشحن
متوفر
لوت
موصى بها (أحدث دفعة)
1

01معلومات عامة

الوصف

يُستخدم خط الخلايا F9، وهو نموذج لسرطان جنين الفئران المشتق من ورم مسخي في الخصية لدى الفئران C57BL/6، كأداة مهمة في بيولوجيا النمو وعلم الأجنة. إن خلايا F9 قادرة على التمايز إلى أديم داخلي جداري عند تعرضها لحمض الريتينويك وحمض ثنائي بوتريل الدوري AMP (cAMP). ويتسم هذا التمايز بتغيرات كبيرة في السلوك الخلوي والتعبير البروتيني، بما في ذلك تخليق منشط البلازمينوجين واللامينينين والكولاجين من النوع الرابع. هذه البروتينات ضرورية لفهم عمليات تطور الأنسجة وتكوين المصفوفة في المراحل الجنينية المبكرة.

ويلاحظ أن فعالية cAMP في تحفيز التمايز في خلايا F9 مشروطة بالعلاج المسبق بحمض الريتينويك، مما يشير إلى وجود تفاعل معقد بين جزيئات الإشارات هذه في تحفيز مسارات النمو. بالإضافة إلى ذلك، تتميز خلايا F9 باحتوائها على ثلاث نسخ من جين بيتا 1 إنتغرين، والذي قد يؤثر على التصاق الخلايا وحركتها، مما يؤكد فائدتها في دراسة تفاعلات الخلايا وتكوين المصفوفة خارج الخلية. ويشمل تحديد سمات السلامة لهذه الخلايا اختبار فيروس إكتروميليا (جدري الفأر)، والذي وُجد أنه سلبي بالنسبة لها، مما يضمن ملاءمتها لمجموعة واسعة من التطبيقات التجريبية دون التعرض لخطر التلوث الفيروسي.

الأنسجة
الخصية
المرض
السرطان المسخي

02التصنيف

كائن حي
الماوس
الجنس
ذكر
خصائص النمو
الملتزم
مستوى السلامة البيولوجية
1

03الخصائص

المورفولوجيا
شبيه بالظهارة

04المعرّفات

المرجع
F9 (كتالوج سيتيون رقم الكتالوج 400174)
رقم التعريف الضريبي لدى NCBI
10090
سيلوصور
CVCL_0259

05التعبير والقابلية للإصابة

الفيروسات
اختبار MAP سلبي سينداي، وإكتروميلي، وبوليوما، وفيروس K، وفيروس K، وفيروس K، وفيروس كيلهام، وريو 3، وفيروس PVM، وLCM، وM.Pulmonis، وM.VM، وM.VM، وTeiler's GD VII، وTeiler's GD VII، وToolan's H-1، وMHV، وLDV، وRCV/SDA، وM-Adenovirus، وB.piliformis.
المنتجات
منشط البلازمينوجين، اللامينين، الكولاجين من النوع الرابع

06التعامل مع النباتات وزراعتها

وسط الاستزراع
DMEM، ث: 4.5 جم/لتر جلوكوز، ث: 4 مليمتر جلوتامين، ث: 3.7 جم/لتر NaHCO3، ث: 1.0 مليمتر بيروفات الصوديوم (رقم المادة 820300a من سايتيون)
بيئة الحضانة

37 درجة مئوية، و5% من ثاني أكسيد الكربون في جو مرطب.

المكملات الغذائية
قم بتزويد الوسط ب 10٪ من ال FBS
كاشف التفكك
أكوتاس
إعادة الاستنبات
قم بإزالة الوسط القديم من الخلايا الملتصقة واغسلها باستخدام PBS الذي يفتقر إلى الكالسيوم والمغنيسيوم. بالنسبة لقوارير T25، استخدم 3-5 مل من PBS، وبالنسبة لقوارير T75، استخدم 5-10 مل. ثم، قم بتغطية الخلايا بالكامل باستخدام أكوتاز، باستخدام 1-2 مل لقوارير T25 و2.5 مل لقوارير T75. دع الخلايا تحتضن في درجة حرارة الغرفة لمدة 8-10 دقائق لفصلها. بعد الحضانة، اخلط الخلايا برفق مع 10 مل من الوسط لإعادة ترسيبها، ثم اطردها مركزيًا بسرعة 300xg لمدة 3 دقائق. تخلص من المادة الطافية، وأعد غمر الخلايا في وسط جديد وانقلها إلى قوارير جديدة تحتوي بالفعل على وسط جديد.
كثافة البذر
قم بتغطية قوارير زراعة الخلايا بالجيلاتين. 1 × 104 خلية/سم2 ستنتج طبقة متقاربة في حوالي 4 أيام.
تجديد السوائل
2 إلى 3 مرات في الأسبوع
التعافي بعد ذوبان الجليد
بعد الذوبان، ضع الخلايا في طبق بمعدل 5 × 104 خلية/سم2 واترك الخلايا تتعافى من عملية التجميد وتلتصق لمدة 24 ساعة على الأقل.
إذابة الثلج والزراعة
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07مراقبة الجودة والحفظ بالتبريد

العقم

يُستبعد التلوث بالميكوبلازما باستخدام كل من المقايسات القائمة على تفاعل البوليميراز المتسلسل (PCR) وطرق الكشف عن الميكوبلازما القائمة على التألق.

ولضمان عدم وجود تلوث بكتيري أو فطري أو خميرة يتم إخضاع مزارع الخلايا للفحص البصري اليومي.

وسط التجميد
كوسيط للحفظ بالتبريد، نستخدم وسط نمو كامل (بما في ذلك FBS) + 10% DMSO من أجل الحفاظ على حيوية كافية بعد ذوبان الجليد أو CM-1 (كتالوج Cytion رقم 800100)، والذي يتضمن مواد حماية أسموزموبيروتيكتية ومثبتات أيضية مُحسّنة لتعزيز التعافي وتقليل الإجهاد الناجم عن التبريد.
شروط التخزين

للحفظ طويل الأمد، ضع القوارير في نيتروجين سائل في طور البخار عند درجة حرارة تتراوح بين -150 و -196 درجة مئوية تقريباً. يُقبل التخزين عند درجة حرارة -80 درجة مئوية فقط كخطوة مؤقتة قصيرة قبل النقل إلى النيتروجين السائل.

شروط الشحن

تُشحن خطوط الخلايا المحفوظة بالتبريد على ثلج جاف في عبوات معزولة وموثوقة مع مبرد كافٍ للحفاظ على درجة حرارة -78 درجة مئوية تقريبًا طوال فترة النقل. عند الاستلام، افحص الحاوية على الفور وانقل القوارير دون تأخير إلى المخزن المناسب.

08المانح

السلالة / النوع الفرعي
129/سفير
عمر المتبرع
الجنين