Gå til innholdet
F9
Vev
Testis
Sykdom
Teratokarsinom

Dokumenter

F9

Cell line · Produktnummer 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00ekskl. mva. og frakt
På lager
Lot
Anbefalt (det ferskeste partiet)
1

01Generell informasjon

Beskrivelse

F9-cellelinjen, en embryonal karsinommodell avledet fra et testikulært teratom fra C57BL/6-mus, er et viktig verktøy innen utviklingsbiologi og embryologi. F9-celler er i stand til å differensiere til parietal endoderm når de utsettes for retinsyre og dibutyrylsyklisk AMP (cAMP). Denne differensieringen kjennetegnes av betydelige endringer i celleatferd og proteinuttrykk, inkludert syntese av plasminogenaktivator, laminin og type IV-kollagen. Disse proteinene er avgjørende for å forstå prosessene for vevsutvikling og matriksdannelse i tidlige embryonale stadier.

Det er verdt å merke seg at cAMPs evne til å indusere differensiering i F9-celler er betinget av forutgående behandling med retinsyre, noe som tyder på et komplekst samspill mellom disse signalmolekylene når det gjelder å trigge utviklingsveier. I tillegg er F9-celler kjennetegnet ved at de har tre kopier av beta 1-integringenet, som kan påvirke celleadhesjon og mobilitet, noe som ytterligere understreker deres anvendelighet i studier av celleinteraksjoner og sammensetningen av den ekstracellulære matriks. Sikkerhetsprofileringen av disse cellene omfatter testing for ectromelia-virus (musekopper), som de har vist seg å være negative for, noe som sikrer at de egner seg til et bredt spekter av eksperimentelle anvendelser uten risiko for viruskontaminering.

Vev
Testis
Sykdom
Teratokarsinom

02Klassifisering

Organisme
Mus
Sex
Mann
Vekstegenskaper
Tilhenger
Biosikkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitel-lignende

04Identifikatorer

Kildehenvisning
F9 (Cytion-katalognummer 400174)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0259

05Uttrykk og mottakelighet

Virus
MAP-test negativ: Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M. pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B. piliformis.
Produkter
Plasminogenaktivator, laminin, kollagen type IV

06Håndtering og kultur

Næringsmedium
DMEM, m: 4,5 g/L glukose, m: 4 mM L-glutamin, m: 3,7 g/L NaHCO3, m: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikkelnummer 820300a)
Inkubasjonsatmosfære

37 °C, 5 %CO2, befuktet atmosfære.

Kosttilskudd
Suppler mediet med 10 % FBS
Dissosiasjonsmiddel
Accutase
Subkultivering
Fjern det gamle mediet fra de adherente cellene, og vask dem med PBS uten kalsium og magnesium. Bruk 3-5 ml PBS for T25-kolber og 5-10 ml for T75-kolber. Dekk deretter cellene helt med Accutase, med 1-2 ml for T25-kolber og 2,5 ml for T75-kolber. La cellene inkubere i romtemperatur i 8-10 minutter for å løsne dem. Etter inkubasjon blandes cellene forsiktig med 10 ml medium for å resuspendere dem, og sentrifuger deretter ved 300xg i 3 minutter. Kast supernatanten, resuspender cellene i nytt medium, og overfør dem til nye kolber som allerede inneholder nytt medium.
Såtetthet
Belegg cellekulturflasker med gelatin. 1 x 104 celler/cm2 vil gi et sammenhengende lag i løpet av ca. 4 dager.
Væskefornyelse
2 til 3 ganger per uke
Gjenoppretting etter tining
Etter tining, plasser cellene på 5 x 104 celler/cm2 og la cellene komme seg etter fryseprosessen og feste seg i minst 24 timer.
Tining og dyrking
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll og kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasma-kontaminering utelukkes ved hjelp av både PCR-baserte analyser og luminescensbaserte metoder for påvisning av mykoplasma.

For å sikre at det ikke finnes bakterie-, sopp- eller gjærkontaminering, blir cellekulturene inspisert visuelt hver dag.

Frysemedium
Som kryopreserveringsmedium bruker vi komplett vekstmedium (inkludert FBS) + 10 % DMSO for tilstrekkelig levedyktighet etter opptining, eller CM-1 (Cytion-katalognummer 800100), som inneholder optimaliserte osmobeskyttende midler og metabolske stabilisatorer for å øke utvinningen og redusere kryoindusert stress.
Oppbevaringsbetingelser

For langtidsoppbevaring plasseres hetteglassene i flytende nitrogen i dampfase ved ca. -150 til -196 °C. Lagring ved -80 °C er kun akseptabelt som et kort mellomtrinn før overføring til flytende nitrogen.

Fraktvilkår

Kryopreserverte cellelinjer sendes på tørris i validert, isolert emballasje med tilstrekkelig kjølemiddel til å opprettholde en temperatur på ca. -78 °C under hele transporten. Ved mottak skal beholderen inspiseres umiddelbart, og hetteglassene skal straks overføres til egnet lagringsplass.

08Donor

Rase / underart
129/Sv
Donorens alder
Embryo