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F9
ティッシュ
精巣
病気
奇形がん

F9

Cell line · 製品番号 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

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01概要

説明

F9細胞株は、C57BL/6マウスの精巣奇形腫に由来するマウス胚性がんモデルであり、発生生物学および発生学の重要なツールとして役立っている。F9細胞は、レチノイン酸とジブチリルサイクリックAMP(cAMP)に暴露されると、頭頂内胚葉に分化することができる。この分化は、プラスミノーゲン活性化因子、ラミニン、IV型コラーゲンの合成を含む、細胞挙動とタンパク質発現の著しい変化によって特徴づけられる。これらのタンパク質は、初期胚段階における組織発生とマトリックス形成の過程を理解する上で極めて重要である。

F9細胞における分化誘導におけるcAMPの有効性は、レチノイン酸で事前に処理することが条件であることから、発生経路の引き金となるこれらのシグナル分子間の複雑な相互作用が示されている。さらに、F9細胞はβ1インテグリン遺伝子を3コピー持っているという特徴があり、細胞接着や移動性に影響を及ぼす可能性があり、細胞間相互作用や細胞外マトリックス組成の研究における有用性をさらに強調している。これらの細胞の安全性プロファイリングには、エクトロメリア・ウイルス(マウス痘)の検査も含まれているが、陰性であることが確認されており、ウイルス汚染のリスクなしに、幅広い実験的応用に適していることが保証されている。

ティッシュ
精巣
病気
奇形がん

02分類

生物
マウス
セックス
男性
成長特性
アドヘレント
バイオセーフティレベル
1

03特徴

形態学
上皮様

04識別子

引用
F9 (Cytion カタログ番号 400174)
NCBI 納税者番号
10090
セロサウルス
CVCL_0259

05発現と感受性

ウイルス
MAPテスト陰性:Sendai、Ektromelie、Polyoma、K-Virus、Kilham、Reo 3、PVM、LCM、M.pulmonis、MVM、Theiler's GD VII、Toolan's H-1、MHV、LDV、RCV/SDA、M-アデノウイルス、B.piliformis。
製品
プラスミノーゲン活性化因子、ラミニン、IV型コラーゲン

06取り扱いと飼育

培地
DMEM、w:4.5g/Lグルコース、w:4mM L-グルタミン、w:3.7g/L NaHCO3、w:1.0mMピルビン酸ナトリウム(Cytion品番820300a)
培養雰囲気

37℃、5%CO2、加湿雰囲気。

サプリメント
培地に10% FBSを加える
解離試薬
アキュターゼ
継代培養
接着した細胞から古いメデュームを取り除き、カルシウムとマグネシウ ムを除いたPBSで洗浄する。T25フラスコでは3-5ml、T75フラスコでは5-10mlのPBSを使用する。次に、T25フラスコでは1-2ml、T75フラスコでは2.5mlのアキュターゼで細胞を完全に覆う。室温で8-10分間インキュベートし、細胞を剥離させる。インキュベーション後、細胞を10mlの培地と静かに混合して再懸濁し、300xgで3分間遠心する。上清を捨て、細胞を新しいメデュームに懸濁し、新しいメデュームの入った新しいフラスコに移す。
播種密度
細胞培養フラスコにゼラチンをコーティングする。10⁴細胞/cm²の密度で播種すると、約4日で密接層が形成される。
流体の更新
週2~3回
解凍後の回復
解凍後、細胞を5×10⁴細胞/cm²で播種し、凍結処理からの回復と接着を少なくとも24時間以上行う。
解凍と培養
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07品質管理と凍結保存

無菌性

マイコプラズマ汚染は、PCRベースのアッセイと発光ベースのマイコプラズマ検出法の両方を用いて除外される。

細菌、真菌、酵母のコンタミネーションがないことを確認するため、細胞培養物は毎日目視検査が行われる。

凍結培地
凍結保存培地としては、融解後の生存率を十分に高めるために完全増殖培地(FBSを含む)+10%DMSO、または回復を促進し凍結によるストレスを軽減するために最適化された浸透保護剤と代謝安定剤を含むCM-1(Cytionカタログ番号800100)を使用している。
保管条件

長期保存の場合、バイアルを-150~-196℃の気相液体窒素に入れる。80℃での保存は、液体窒素に移す前の短い暫定措置としてのみ許容される。

配送条件

凍結保存された細胞株は、輸送中約-78℃を維持するのに十分な保冷剤とともに、有効な断熱包装でドライアイスとともに輸送される。受領後、直ちに容器を検査し、遅滞なくバイアルを適切な保管場所に移してください。

08寄付者

品種/亜種
129/Sv
ドナーの年齢
胚