Премини към съдържанието
F9
Тъкан
Тестис
Заболяване
Тератокарцином

Документи

F9

Cell line · Номер на продукта 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия F9, модел на миши ембрионален карцином, получен от тестикуларен тератом на мишки C57BL/6, служи като важен инструмент в биологията на развитието и ембриологията. Клетките F9 са способни да се диференцират в париетален ендодерм, когато са изложени на ретинолова киселина и дибутирилцикличен АМФ (cAMP). Тази диференциация се характеризира със значителни промени в клетъчното поведение и експресията на протеини, включително синтеза на плазминогенен активатор, ламинин и колаген тип IV. Тези протеини са от решаващо значение за разбирането на процесите на развитие на тъканите и образуването на матрици в ранните ембрионални стадии.

Отбелязва се, че ефективността на цАМФ при индуциране на диференциация в клетките F9 е обусловена от предварително третиране с ретиноева киселина, което показва сложно взаимодействие между тези сигнални молекули при задействане на пътищата на развитие. Освен това клетките F9 се характеризират с наличието на три копия на гена за бета 1 интегрин, който може да повлияе на клетъчната адхезия и мобилност, което допълнително подчертава тяхната полезност при изучаването на клетъчните взаимодействия и състава на извънклетъчния матрикс. Профилирането на безопасността на тези клетки включва тестване за вируса на ектромелията (миша едра шарка), за който е установено, че е отрицателен, което гарантира пригодността им за широк спектър от експериментални приложения без риск от вирусно замърсяване.

Тъкан
Тестис
Заболяване
Тератокарцином

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител

04Идентификатори

Източник
F9 (каталожен номер 400174 на Cytion)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_0259

05Проява и предразположеност

Вируси
MAP-тестът е отрицателен: Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.
Продукти
Плазминогенен активатор, ламинин, колаген тип IV

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Плътност на засяването
Покрийте колбите за клетъчна култура с желатин. 1 x 104 клетки/cm2 ще образуват конфуентен слой за около 4 дни.
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Възстановяване след размразяване
След размразяване, поставете клетките в плаки с плътност 5 x 104 клетки/cm2 и оставете клетките да се възстановят от процеса на замразяване и да се прикрепят за най-малко 24 часа.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Порода / подвид
129/Sv
Възраст на донора
Ембрион