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F9
Tessuto
Testicolo
Malattia
Teratocarcinoma

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F9

Cell line · Codice prodotto 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00IVA e spese di spedizione escluse

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare F9, un modello di carcinoma embrionale murino derivato da un teratoma testicolare di topi C57BL/6, è uno strumento importante per la biologia dello sviluppo e l'embriologia. Le cellule F9 sono in grado di differenziarsi in endoderma parietale quando sono esposte all'acido retinoico e all'AMP ciclico dibutirrilico (cAMP). Questa differenziazione è caratterizzata da cambiamenti significativi nel comportamento cellulare e nell'espressione delle proteine, tra cui la sintesi di attivatore del plasminogeno, laminina e collagene di tipo IV. Queste proteine sono fondamentali per comprendere i processi di sviluppo dei tessuti e la formazione della matrice nelle prime fasi embrionali.

Si nota che l'efficacia del cAMP nell'indurre la differenziazione nelle cellule F9 è condizionata dal precedente trattamento con acido retinoico, il che indica una complessa interazione tra queste molecole di segnalazione nell'innescare le vie di sviluppo. Inoltre, le cellule F9 sono caratterizzate dalla presenza di tre copie del gene dell'integrina beta 1, che può influenzare l'adesione e la mobilità cellulare, sottolineando ulteriormente la loro utilità nello studio delle interazioni cellulari e della composizione della matrice extracellulare. Il profilo di sicurezza di queste cellule include test per il virus dell'ectromelia (vaiolo del topo), per il quale sono risultate negative, garantendo la loro idoneità per un'ampia gamma di applicazioni sperimentali senza il rischio di contaminazione virale.

Tessuto
Testicolo
Malattia
Teratocarcinoma

02Classificazione

Organismo
Mouse
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
1

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio

04Identificatori

Riferimento bibliografico
F9 (numero di catalogo Cytion 400174)
Codice fiscale NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0259

05Espressione e suscettibilità

Virus
MAP-test negativo: Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, GD VII di Theiler, H-1 di Toolan, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.
Prodotti
Attivatore del plasminogeno, laminina, collagene di tipo IV

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Densità di semina
Rivestire le fiasche per coltura cellulare con gelatina. 1 x 104 cellule/cm2 produrranno uno strato confluente in circa 4 giorni.
Rinnovo dei fluidi
da 2 a 3 volte alla settimana
Recupero post-scongelamento
Dopo lo scongelamento, piastrare le cellule a 5 x 104 cellule/cm2 e lasciare che le cellule si riprendano dal processo di congelamento e aderiscano per almeno 24 ore.
Scongelamento e coltura

  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Razza / sottospecie
129/Sv
Età dei donatori
Embrione