F9
Cell line · Tuotenumero 400174
The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...
Räätälöinti / Suositukset
- F9Cell line€430.00
Suositeltava (tuorein erä)
01Yleistä tietoa
- Kuvaus
F9-solulinja, C57BL/6-hiirten kivesten teratoomasta peräisin oleva hiiren alkion karsinoomamalli, on tärkeä väline kehitysbiologiassa ja embryologiassa. F9-solut kykenevät erilaistumaan parietaaliseksi endodermiksi, kun ne altistetaan retinohapolle ja dibutyylisykliselle AMP:lle (cAMP). Tämä erilaistuminen näkyy merkittävinä muutoksina solujen käyttäytymisessä ja proteiinien ilmentymisessä, mukaan lukien plasminogeeniaktivaattorin, laminiinin ja tyypin IV kollageenin synteesi. Nämä proteiinit ovat ratkaisevan tärkeitä kudoksen kehityksen ja matriisin muodostumisen prosessien ymmärtämiseksi alkion varhaisvaiheissa.
On huomattava, että cAMP:n tehokkuus F9-solujen erilaistumisen indusoimisessa on riippuvainen edeltävästä retinohappokäsittelystä, mikä osoittaa näiden signaalimolekyylien monimutkaista vuorovaikutusta kehityspolkujen käynnistämisessä. Lisäksi F9-soluille on ominaista, että niillä on kolme kopiota beeta 1 -integriinigeenistä, mikä saattaa vaikuttaa solujen tarttumiseen ja liikkuvuuteen, mikä korostaa entisestään niiden hyödyllisyyttä solujen vuorovaikutusten ja solunulkoisen matriisin koostumuksen tutkimisessa. Näiden solujen turvallisuusprofiileihin kuuluu ektromelia-viruksen (hiiren rokon) testaus, jonka osalta ne ovat osoittautuneet negatiivisiksi, mikä takaa niiden soveltuvuuden monenlaisiin kokeellisiin sovelluksiin ilman viruskontaminaation riskiä.
- Kudos
- Kivekset
- Sairaus
- Teratokarsinooma
02Luokittelu
- Organismi
- Hiiri
- Sukupuoli
- Mies
- Kasvuominaisuudet
- Kiinnittynyt
- Bioturvallisuustaso
- 1
03Ominaisuudet
- Morfologia
- Epiteelin kaltainen
04Tunnisteet
- Lähdeviite
- F9 (Cytionin luettelonumero 400174)
- NCBI-verotunnus
- 10090
- Cellosaurus
- CVCL_0259
05Ilmentyminen ja alttius
- Virukset
- MAP-testi negatiivinen: Theilerin GD VII, Toolanin H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.
- Tuotteet
- Plasminogeeniaktivaattori, laminiini, tyyppi IV kollageeni
06Käsittely ja viljely
- Viljelyalusta
- DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
- Inkubaatioilma
37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.
- Ravintolisät
- Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
- Dissosiaatioreagenssi
- Accutase
- Soluviljely
- Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
- Kylvötiheys
- Päällystä soluviljelypullot gelatiinilla. 1 x 104 solua/cm2 tuottaa yhtenäisen kerroksen noin 4 päivässä.
- Nesteen uusiminen
- 2-3 kertaa viikossa
- Sulamisen jälkeinen palautuminen
- Sulattamisen jälkeen levitä solut 5 x 104 solua/cm2 ja anna solujen toipua pakastusprosessista ja kiinnittyä vähintään 24 tunnin ajan.
- Sulatus ja viljely
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Laadunvalvonta ja kryosäilytys
- Hedelmättömyys
Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.
Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.
- Jäädytysaine
- Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
- Säilytysolosuhteet
Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.
- Toimitusehdot
Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.
08Lahjoittaja
- Rotua / alalajia
- 129/Sv
- Luovuttajan ikä
- Alkio
09Oikeudelliset ja turvallisuusasiat
- Turvallisuusohjeet
- Kun suunnitellaan kryoputken säilyttämistä nestemäisessä typessä sulatusta varten, on noudatettava tiukkoja turvatoimenpiteitä. Asianmukaiset suojakäsineet ja -vaatteet ovat välttämättömiä, ja kasvonaamarin tai suojalasien käyttö on välttämätöntä siirrettäessä jäädytettyjä näytteitä nestetyppisäiliöön tai siitä pois. Tällä pyritään pienentämään loukkaantumisriskiä, joka aiheutuu kryoputkien mahdollisista räjähdyksistä, jotka voivat aiheuttaa terävien sirpaleiden sinkoutumisen.
- Vastuuvapauslauseke
- Solujamme tarjotaan yksinomaan in vitro -laboratoriotutkimustarkoituksiin, eikä niitä ole tarkoitettu kliiniseen tai diagnostiseen käyttöön, eikä niitä saa antaa ihmisille tai käyttää eläinlääkinnällisiin tarkoituksiin. Käyttäjien on noudatettava kaikkia sovellettavia ohjeita ja määräyksiä, jotka koskevat näiden solujen käsittelyä ja käyttöä tutkimusympäristössä.
- Takuu
Me Cytionilla seisomme tuotteidemme laadun ja elinkelpoisuuden takana. Takaamme, että solumme ovat elinkelpoisia viljelyn alkaessa 60 päivän ajan sen jälkeen, kun ne on lähetetty laitoksestamme. Vakuutamme, että kaikki materiaalit ovat analyysitodistuksessa ja/tai tuoteselosteessa kuvattujen eritelmien mukaisia
Lisätietoja on <a href=""/Who-we-are/Warranty/"" hreflang="""x-default"">Takuulausumassa
- Aineiden siirtoa koskeva sopimus vaaditaan
- Kyllä