Перейти до вмісту
F9
Тканина
Яєчко
Хвороба
Тератокарцинома

Документи

F9

Cell line · Номер товару 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00без урахування податків та вартості доставки
Є в наявності
Лот
Рекомендовано (найсвіжіша партія)
1

01Загальна інформація

Опис

Клітинна лінія F9, модель ембріональної карциноми миші, отримана з тератоми яєчка мишей лінії C57BL/6, слугує важливим інструментом у біології розвитку та ембріології. Клітини F9 здатні диференціюватися в парієтальну ендодерму під впливом ретиноєвої кислоти та дибутирилциклічного АМФ (цАМФ). Ця диференціація характеризується значними змінами в клітинній поведінці та експресії білків, включаючи синтез активатора плазміногену, ламініну та колагену IV типу. Ці білки мають вирішальне значення для розуміння процесів розвитку тканин і формування матриксу на ранніх ембріональних стадіях.

Відзначено, що ефективність цАМФ в індукуванні диференціювання клітин F9 залежить від попередньої обробки ретиноєвою кислотою, що вказує на складну взаємодію між цими сигнальними молекулами в запуску шляхів розвитку. Крім того, клітини F9 характеризуються наявністю трьох копій гена бета-1 інтегрину, який може впливати на адгезію та рухливість клітин, що ще більше підкреслює їхню корисність для вивчення клітинних взаємодій та складу позаклітинного матриксу. Профілювання безпеки цих клітин включає тестування на вірус ектромелії (мишачої віспи), на який вони були визнані негативними, що забезпечує їхню придатність для широкого спектру експериментальних застосувань без ризику вірусного забруднення.

Тканина
Яєчко
Хвороба
Тератокарцинома

02Класифікація

Організм
Миша
Секс
Чоловік
Характеристики росту
Прихильник
Рівень біобезпеки
1

03Характеристики

Морфологія
Епітеліальноподібні

04Ідентифікатори

Посилання
F9 (номер за каталогом Cytion 400174)
Ідентифікаційний номер платника податків NCBI
10090
Целозавр
CVCL_0259

05Експресія та сприйнятливість

Віруси
MAP-тест негативний: Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.
Продукція
Активатор плазміногену, ламінін, колаген IV типу

06Обробка та вирощування

Живильне середовище
ДМЕМ, w: 4,5 г/л Глюкоза, w: 4 мМ L-глутамін, w: 3,7 г/л NaHCO3, w: 1,0 мМ піруват натрію (цит. номер 820300a)
Атмосфера інкубації

37°C, 5% CO2, волога атмосфера.

Добавки
Додайте до середовища 10% FBS
Реагент для дисоціації
Аккутаза
Пересадка в нове середовище
Видаліть старе середовище з прилиплих клітин і промийте їх PBS, в якому бракує кальцію і магнію. Для колб T25 використовуйте 3-5 мл PBS, а для колб T75 - 5-10 мл. Потім повністю покрийте клітини аккутазою, використовуючи 1-2 мл для колб Т25 і 2,5 мл для колб Т75. Залиште клітини інкубуватися при кімнатній температурі протягом 8-10 хвилин, щоб відокремити їх. Після інкубації обережно змішайте клітини з 10 мл середовища, щоб ресуспендувати їх, а потім центрифугуйте при 300xg протягом 3 хвилин. Викиньте надосадову рідину, ресуспендуйте клітини у свіжому середовищі та перенесіть їх у нові колби, які вже містять свіже середовище.
Щільність висіву
Покрийте колби для культивування клітин желатином. 1 x 104 клітин/см2 утворять конfluentний шар приблизно за 4 дні.
Оновлення рідини
2-3 рази на тиждень
Відновлення після відлиги
Після розморожування висійте клітини з щільністю 5 x 104 клітин/см2 і дайте клітинам відновитися після процесу заморожування та прикріпитися протягом щонайменше 24 годин.
Розморожування та культивування
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контроль якості та кріоконсервація

Стерильність

Зараження мікоплазмою виключається за допомогою аналізів на основі ПЛР та люмінесцентних методів виявлення мікоплазми.

Щоб переконатися у відсутності бактеріального, грибкового або дріжджового забруднення, клітинні культури піддаються щоденному візуальному контролю.

Середовище для заморожування
Як середовище кріоконсервування ми використовуємо повне живильне середовище (включаючи FBS) + 10% ДМСО для адекватної життєздатності після відтавання або CM-1 (номер за каталогом Cytion 800100), до складу якого входять оптимізовані осмопротектори та метаболічні стабілізатори для прискорення відновлення та зменшення кріоіндукованого стресу.
Умови зберігання

Для тривалого зберігання помістіть флакони в парофазний рідкий азот при температурі від -150 до -196 °C. Зберігання при -80 °C допустиме лише як короткий проміжний етап перед перенесенням у рідкий азот.

Умови доставки

Кріоконсервовані клітинні лінії транспортуються на сухому льоду в перевіреній ізольованій упаковці з достатньою кількістю холодоагенту для підтримання температури приблизно -78 °C під час транспортування. При отриманні негайно огляньте контейнер і без зволікань перемістіть флакони у відповідне місце зберігання.

08Донор

Порода / підвид
129/Sv
Вік донора
Ембріон