Μετάβαση στο περιεχόμενο
F9
Ιστός
Όρχεις
Ασθένεια
Τερατοκαρκίνωμα

Έγγραφα

F9

Cell line · Αριθμός προϊόντος 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00χωρίς ΦΠΑ και έξοδα αποστολής
Σε απόθεμα
Lot
Συνιστάται (η πιο φρέσκια παρτίδα)
1

01Γενικές πληροφορίες

Περιγραφή

Η κυτταρική σειρά F9, ένα μοντέλο εμβρυονικού καρκινώματος ποντικού που προέρχεται από τεράτωμα όρχεως ποντικού C57BL/6, χρησιμεύει ως σημαντικό εργαλείο στην αναπτυξιακή βιολογία και την εμβρυολογία. Τα κύτταρα F9 είναι ικανά να διαφοροποιηθούν σε παρειακό ενδοδερμικό όταν εκτίθενται σε ρετινοϊκό οξύ και διβουτυρυλοκυκλικό AMP (cAMP). Η διαφοροποίηση αυτή χαρακτηρίζεται από σημαντικές αλλαγές στην κυτταρική συμπεριφορά και στην έκφραση πρωτεϊνών, συμπεριλαμβανομένης της σύνθεσης του ενεργοποιητή πλασμινογόνου, της λαμινίνης και του κολλαγόνου τύπου IV. Αυτές οι πρωτεΐνες είναι ζωτικής σημασίας για την κατανόηση των διαδικασιών ανάπτυξης των ιστών και του σχηματισμού της μήτρας στα πρώιμα εμβρυϊκά στάδια.

Σημειώνεται ότι η αποτελεσματικότητα του cAMP στην επαγωγή της διαφοροποίησης στα κύτταρα F9 εξαρτάται από την προηγούμενη θεραπεία με ρετινοϊκό οξύ, υποδεικνύοντας μια πολύπλοκη αλληλεπίδραση μεταξύ αυτών των σηματοδοτικών μορίων στην ενεργοποίηση αναπτυξιακών μονοπατιών. Επιπλέον, τα κύτταρα F9 χαρακτηρίζονται από την ύπαρξη τριών αντιγράφων του γονιδίου της ιντεγκρίνης βήτα 1, το οποίο μπορεί να επηρεάζει την κυτταρική προσκόλληση και την κινητικότητα, υπογραμμίζοντας περαιτέρω τη χρησιμότητά τους στη μελέτη των κυτταρικών αλληλεπιδράσεων και της σύνθεσης της εξωκυτταρικής μήτρας. Ο προσδιορισμός του προφίλ ασφάλειας αυτών των κυττάρων περιλαμβάνει δοκιμές για τον ιό της εκτρομελίας (ποντικοπαρωτίτιδα), για τον οποίο βρέθηκαν αρνητικά, εξασφαλίζοντας την καταλληλότητά τους για ένα ευρύ φάσμα πειραματικών εφαρμογών χωρίς τον κίνδυνο ιογενούς μόλυνσης.

Ιστός
Όρχεις
Ασθένεια
Τερατοκαρκίνωμα

02Ταξινόμηση

Οργανισμός
Ποντίκι
Σεξ
Άνδρας
Ιδιότητες ανάπτυξης
Πιστός
Επίπεδο βιοασφάλειας
1

03Χαρακτηριστικά

Μορφολογία
Επιθηλιοειδής

04Αναγνωριστικά

Παραπομπή
F9 (αριθμός καταλόγου Cytion 400174)
Αριθμός φορολογικού μητρώου NCBI
10090
Κελλοσαύρος
CVCL_0259

05Έκφραση και ευαισθησία

Ιοί
MAP-test αρνητικό: Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.
Προϊόντα
Ενεργοποιητής πλασμινογόνου, λαμινίνη, κολλαγόνο τύπου IV

06Χειρισμός και καλλιέργεια

Θρεπτικό μέσο
DMEM, w: 4,5 g/L γλυκόζη, w: 4 mM L-γλουταμίνη, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM πυρουβικό νάτριο (αριθμός άρθρου Cytion 820300a)
Ατμόσφαιρα επώασης

37°C, 5%CO2, υγροποιημένη ατμόσφαιρα.

Συμπληρώματα
Συμπληρώστε το μέσο με 10% FBS
Αντιδραστήριο αποσύνδεσης
Accutase
Αναπαραγωγή σε υποκαλλιέργεια
Αφαιρέστε το παλιό μέσο από τα προσκολλημένα κύτταρα και πλύντε τα με PBS που δεν περιέχει ασβέστιο και μαγνήσιο. Για φιάλες T25, χρησιμοποιήστε 3-5 ml PBS και για φιάλες T75, χρησιμοποιήστε 5-10 ml. Στη συνέχεια, καλύψτε πλήρως τα κύτταρα με Accutase, χρησιμοποιώντας 1-2 ml για φιάλες T25 και 2,5 ml για φιάλες T75. Αφήστε τα κύτταρα να επωαστούν σε θερμοκρασία δωματίου για 8-10 λεπτά για να αποκολληθούν. Μετά την επώαση, αναμείξτε απαλά τα κύτταρα με 10 ml μέσου για να ανασυσταθούν και, στη συνέχεια, φυγοκεντρίστε στα 300xg για 3 λεπτά. Απορρίψτε το υπερκείμενο υγρό, ανασυστάστε τα κύτταρα σε φρέσκο μέσο και μεταφέρετέ τα σε νέες φιάλες που περιέχουν ήδη φρέσκο μέσο.
Πυκνότητα σποράς
Επικαλύψτε τις φιάλες καλλιέργειας κυττάρων με ζελατίνη. 1 x 104 κύτταρα/cm2 θα αποδώσουν ένα συνεχές στρώμα σε περίπου 4 ημέρες.
Ανανέωση υγρών
2 έως 3 φορές την εβδομάδα
Ανάκαμψη μετά την απόψυξη
Μετά την απόψυξη, τοποθετήστε τα κύτταρα σε πλάκα με πυκνότητα 5 x 104 κύτταρα/cm2 και αφήστε τα κύτταρα να αναρρώσουν από τη διαδικασία κατάψυξης και να προσκολληθούν για τουλάχιστον 24 ώρες.
Απόψυξη και καλλιέργεια
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Έλεγχος ποιότητας και κρυοσυντήρηση

Στειρότητα

Η μόλυνση από μυκόπλασμα αποκλείεται με τη χρήση τόσο των δοκιμασιών που βασίζονται στην PCR όσο και των μεθόδων ανίχνευσης μυκοπλάσματος με βάση τη φωταύγεια.

Για να διασφαλιστεί ότι δεν υπάρχει μόλυνση από βακτήρια, μύκητες ή ζύμες, οι κυτταροκαλλιέργειες υποβάλλονται σε καθημερινές οπτικές επιθεωρήσεις.

Μέσο κατάψυξης
Ως μέσο κρυοσυντήρησης, χρησιμοποιούμε πλήρες μέσο ανάπτυξης (συμπεριλαμβανομένου του FBS) + 10% DMSO για επαρκή βιωσιμότητα μετά την απόψυξη, ή CM-1 (αριθμός καταλόγου Cytion 800100), το οποίο περιλαμβάνει βελτιστοποιημένα ωσμοπροστατευτικά και μεταβολικούς σταθεροποιητές για την ενίσχυση της ανάκαμψης και τη μείωση του στρες που προκαλείται από την κρυοσυντήρηση.
Συνθήκες αποθήκευσης

Για μακροχρόνια συντήρηση, τοποθετήστε τα φιαλίδια σε υγρό άζωτο σε φάση ατμών σε θερμοκρασία περίπου -150 έως -196 °C. Η αποθήκευση στους -80 °C είναι αποδεκτή μόνο ως σύντομο ενδιάμεσο βήμα πριν από τη μεταφορά σε υγρό άζωτο.

Όροι αποστολής

Οι κρυοσυντηρημένες κυτταρικές σειρές αποστέλλονται σε ξηρό πάγο σε επικυρωμένη, μονωμένη συσκευασία με επαρκές ψυκτικό μέσο για τη διατήρηση περίπου των -78 °C καθ' όλη τη διάρκεια της μεταφοράς. Κατά την παραλαβή, επιθεωρήστε αμέσως τον περιέκτη και μεταφέρετε τα φιαλίδια χωρίς καθυστέρηση στην κατάλληλη αποθήκη.

08Δωρητής

Φυλή / υποείδος
129/Sv
Ηλικία δωρητή
Έμβρυο