Gå direkt till innehållet
F9
Vävnad
Testiklarna
Sjukdom
Teratokarcinom

F9

Cell line · Produktnummer 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00exkl. moms och frakt
Finns i lager
Lot
Rekommenderat (det färskaste partiet)
1

01Allmän information

Beskrivning

F9-cellinjen, en embryonal karcinommodell för möss som härrör från ett testikelteratom hos C57BL/6-möss, är ett viktigt verktyg inom utvecklingsbiologi och embryologi. F9-celler kan differentieras till parietalt endoderm när de utsätts för retinoinsyra och dibutyrylcyklisk AMP (cAMP). Denna differentiering kännetecknas av betydande förändringar i cellbeteende och proteinuttryck, inklusive syntes av plasminogenaktivator, laminin och kollagen typ IV. Dessa proteiner är avgörande för att förstå processerna för vävnadsutveckling och matrisbildning i tidiga embryonala stadier.

Det bör noteras att cAMP:s effektivitet när det gäller att inducera differentiering i F9-celler är beroende av föregående behandling med retinsyra, vilket tyder på ett komplext samspel mellan dessa signalmolekyler när det gäller att trigga utvecklingsvägar. F9-cellerna kännetecknas dessutom av att de har tre kopior av beta 1-integringenen, vilket kan påverka celladhesion och mobilitet, vilket ytterligare understryker deras användbarhet för att studera cellinteraktioner och den extracellulära matrisens sammansättning. Säkerhetsprofileringen av dessa celler inkluderar testning för ectromelia-virus (muskoppor), för vilket de har visat sig vara negativa, vilket säkerställer deras lämplighet för ett brett spektrum av experimentella tillämpningar utan risk för viruskontaminering.

Vävnad
Testiklarna
Sjukdom
Teratokarcinom

02Klassificering

Organism
Mus
Kön
Man
Tillväxtegenskaper
Följsam
Biosäkerhetsnivå
1

03Egenskaper

Morfologi
Epitelliknande

04Identifierare

Källa
F9 (Cytion katalognummer 400174)
NCBI-skattenummer
10090
Cellosaurus
CVCL_0259

05Uttryck och mottaglighet

Virus
MAP-test negativt: Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.
Produkter
Plasminogenaktivator, laminin, kollagen typ IV

06Hantering och odling

Odlingsmedium
DMEM, w: 4,5 g/L glukos, w: 4 mM L-glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvat (Cytion artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosfär

37°C, 5%CO2, befuktad atmosfär.

Kosttillskott
Komplettera mediet med 10% FBS
Dissociationsmedel
Accutase
Vidareodling
Ta bort det gamla mediet från de adherenta cellerna och tvätta dem med PBS som saknar kalcium och magnesium. Använd 3-5 ml PBS för T25-kolvar och 5-10 ml för T75-kolvar. Täck sedan cellerna helt med Accutase, använd 1-2 ml för T25-kolvar och 2,5 ml för T75-kolvar. Låt cellerna inkubera i rumstemperatur i 8-10 minuter så att de lossnar. Efter inkubationen, blanda cellerna försiktigt med 10 ml medium för att resuspendera dem och centrifugera sedan vid 300xg i 3 minuter. Kassera supernatanten, resuspendera cellerna i färskt medium och överför dem till nya kolvar som redan innehåller färskt medium.
Såtäthet
Belägg cellodlingsflaskor med gelatin. 1 x 104 celler/cm2 ger ett konfluent skikt efter cirka 4 dagar.
Vätskeförnyelse
2 till 3 gånger per vecka
Återhämtning efter upptining
Efter upptining, plattlägg cellerna med 5 x 104 celler/cm2 och låt cellerna återhämta sig från frysprocessen och fästa i minst 24 timmar.
Upptining och odling
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitetskontroll och kryokonservering

Sterilitet

Mykoplasmakontaminering utesluts med hjälp av både PCR-baserade analyser och luminiscensbaserade metoder för mykoplasmadiagnostik.

För att säkerställa att det inte finns någon kontaminering av bakterier, svamp eller jäst utsätts cellkulturerna för dagliga visuella inspektioner.

Frysmedel
Som kryokonserveringsmedium använder vi komplett tillväxtmedium (inklusive FBS) + 10% DMSO för adekvat viabilitet efter upptining, eller CM-1 (Cytion katalognummer 800100), som innehåller optimerade osmoprotektanter och metaboliska stabilisatorer för att förbättra återhämtningen och minska kryoinducerad stress.
Förvaringsförhållanden

För långtidsförvaring, placera flaskorna i flytande kväve i ångfas vid ca -150 till -196 °C. Förvaring vid -80 °C är acceptabelt endast som ett kort mellanliggande steg innan överföring till flytande kväve.

Leveransvillkor

Kryopreserverade cellinjer skickas på torris i validerade, isolerade förpackningar med tillräckligt med kylmedel för att hålla cirka -78 °C under hela transporten. Vid mottagandet ska behållaren omedelbart inspekteras och flaskorna utan dröjsmål överföras till lämplig förvaring.

08Donator

Ras / underart
129/Sv
Donatorns ålder
Embryo