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고환
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F9

Cell line · 제품 번호 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

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롯
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01일반 정보

설명

C57BL/6 마우스의 고환 기형종에서 유래한 쥐 배아 암종 모델인 F9 세포주는 발달 생물학 및 발생학에서 중요한 도구로 사용됩니다. F9 세포는 레티노산과 디부티릴 사이클릭 AMP(cAMP)에 노출되면 정수리 내배엽으로 분화할 수 있습니다. 이러한 분화는 플라스미노겐 활성화제, 라미닌 및 IV형 콜라겐의 합성을 포함하여 세포 행동과 단백질 발현에 상당한 변화를 가져옵니다. 이러한 단백질은 초기 배아 단계에서 조직 발달과 매트릭스 형성 과정을 이해하는 데 매우 중요합니다.

F9 세포에서 분화를 유도하는 cAMP의 효과는 레티노산으로 사전 처리할 때 조건부로 나타나며, 이는 발달 경로를 촉발하는 데 있어 이러한 신호 분자들 간의 복잡한 상호 작용을 나타냅니다. 또한 F9 세포는 세포 접착력과 이동성에 영향을 줄 수 있는 베타 1 인테그린 유전자의 사본이 3개라는 특징이 있어 세포 상호 작용과 세포 외 기질 구성 연구에 유용하다는 점이 더욱 강조됩니다. 이 세포의 안전성 프로파일링에는 외배엽 바이러스(수두) 검사도 포함되며, 음성으로 확인되어 바이러스 오염의 위험 없이 광범위한 실험 분야에 적합함을 보장합니다.

티슈
고환
질병
기형 암종

02분류

생물체
마우스
성
남성
성장 특성
준수자
생물안전 등급
1

03특징

형태학
상피 유사

04식별자

인용
F9(사이티온 카탈로그 번호 400174)
NCBI 세금 식별번호
10090
셀로사우루스
CVCL_0259

05발현 및 감수성

바이러스
MAP 검사 음성: 센다이, 엑트로멜리, 폴리오마, K-바이러스, 킬함, 레오 3, PVM, LCM, M.풀모니스, MVM, 테일러의 GD VII, 툴란의 H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-아데노바이러스, B.필리포미스.
제품
플라스미노겐 활성화제, 라미닌, IV형 콜라겐

06취급 및 배양

배지
DMEM, w: 4.5g/L 포도당, w: 4mM L-글루타민, w: 3.7g/L NaHCO3, w: 1.0mM 피루브산 나트륨(사이티온 제품 번호 820300a)
배양 조건

37°C, 5%CO2, 습한 대기.

건강보조식품
10% FBS로 배지를 보충합니다
분리 시약
아큐타제
재배양
부착된 세포에서 오래된 배지를 제거하고 칼슘과 마그네슘이 없는 PBS로 세척합니다. T25 플라스크의 경우 3~5ml, T75 플라스크의 경우 5~10ml의 PBS를 사용합니다. 그런 다음 T25 플라스크의 경우 1~2㎖, T75 플라스크의 경우 2.5㎖를 사용하여 세포를 Accutase로 완전히 덮습니다. 세포를 분리하기 위해 실온에서 8~10분간 배양합니다. 배양 후 세포를 배지 10ml와 부드럽게 혼합하여 재부유시킨 다음 300xg에서 3분간 원심분리합니다. 상층액을 버리고 세포를 신선한 배지에 다시 부유시킨 후 이미 신선한 배지가 들어 있는 새 플라스크에 옮깁니다.
파종 밀도
세포 배양 플라스크에 젤라틴을 코팅하십시오. 1 x 10⁴ 세포/cm²는 약 4일 만에 융합된 층을 형성합니다.
유체 교체
주 2~3회
해동 후 회복
해동 후 세포를 5 x 10⁴ 세포/cm² 농도로 배지에 접종하고, 동결 과정으로부터 회복 및 부착이 완료될 때까지 최소 24시간 동안 배양합니다.
해동 및 배양
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07품질 관리 및 냉동 보존

불임

마이코플라스마 오염은 PCR 기반 분석법과 발광 기반 마이코플라스마 검출법을 모두 사용하여 배제합니다.

박테리아, 곰팡이 또는 효모 오염이 없는지 확인하기 위해 세포 배양은 매일 육안 검사를 거칩니다.

배양액 동결
냉동 보존 배지로는 해동 후 충분한 생존력을 위해 완전 성장 배지(FBS 포함) + 10% DMSO를 사용하거나, 최적화된 삼투 보호제 및 대사 안정제가 포함된 CM-1(Cytion 카탈로그 번호 800100)을 사용하여 회복력을 높이고 냉동으로 인한 스트레스를 줄입니다.
보관 조건

장기 보존을 위해서는 바이알을 약 -150°C에서 -196°C의 증기상 액체 질소에 넣으세요. 80°C에서 보관하는 것은 액체 질소로 옮기기 전 짧은 중간 단계로만 허용됩니다.

배송 조건

냉동 보존 세포주는 운송 중 약 -78°C를 유지할 수 있는 충분한 냉매가 포함된 검증된 단열 포장에 드라이아이스를 넣어 배송됩니다. 수령 즉시 용기를 검사하고 바이알을 지체 없이 적절한 보관 장소로 옮깁니다.

08기부자

품종 / 아종
129/Sv
기증자 연령
Embryo