Preskoči na vsebino
F9
Tkivo
Testis
Bolezen
Teratokarcinom

Dokumenti

F9

Cell line · Številka izdelka 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00brez davka in stroškov poštnine
Na zalogi
Lot
Priporočeno (najsvežja pošiljka)
1

01Splošne informacije

Opis

Celična linija F9, model mišjega embrionalnega karcinoma, ki izhaja iz teratoma testisov miši C57BL/6, je pomembno orodje v razvojni biologiji in embriologiji. Celice F9 se lahko diferencirajo v parietalni endoderm, če so izpostavljene retinojski kislini in dibutirilcikličnemu AMP (cAMP). Za to diferenciacijo so značilne pomembne spremembe v obnašanju celic in izražanju beljakovin, vključno s sintezo aktivatorja plazminogena, laminina in kolagena tipa IV. Te beljakovine so ključne za razumevanje procesov razvoja tkiv in tvorbe matriksa v zgodnjih embrionalnih fazah.

Ugotovljeno je, da je učinkovitost cAMP pri indukciji diferenciacije v celicah F9 pogojena s predhodnim zdravljenjem z retinojsko kislino, kar kaže na zapleteno medsebojno delovanje teh signalnih molekul pri sprožanju razvojnih poti. Poleg tega so za celice F9 značilne tri kopije gena za integrin beta 1, ki lahko vpliva na adhezijo in mobilnost celic, kar še dodatno poudarja njihovo uporabnost pri preučevanju interakcij celic in sestave zunajceličnega matriksa. Varnostno profiliranje teh celic vključuje testiranje na virus ektromelije (mišje ošpice), za katerega je bilo ugotovljeno, da je negativen, kar zagotavlja njihovo primernost za široko paleto eksperimentalnih aplikacij brez tveganja virusne kontaminacije.

Tkivo
Testis
Bolezen
Teratokarcinom

02Razvrstitev

Organizem
Miška
Seks
Moški
Lastnosti rasti
Pripadnik
Stopnja biološke varnosti
1

03Značilnosti

Morfologija
Epitelijam podobni

04Identifikatorji

Navajanje vira
F9 (kataloška številka Cytion 400174)
Davčna identifikacijska številka NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_0259

05Izražanje in dovzetnost

Virusi
Test MAP je negativen: Sendai, Ektromelie, Polyoma, K-Virus, Kilham, Reo 3, PVM, LCM, M.pulmonis, MVM, Theilerjev GD VII, Toolanov H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovirus, B.piliformis.
Izdelki
Aktivator plazminogena, laminin, kolagen tipa IV

06Ravnanje in gojenje

Gojišče
DMEM, w: 4,5 g/L glukoze, w: 4 mM L-glutamina, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM natrijevega piruvata (številka izdelka Cytion 820300a)
Inkubacijska atmosfera

37 °C, 5 %CO2, vlažno ozračje.

Prehranska dopolnila
Gojišče dopolnite z 10 % FBS
Reagenca za disociacijo
Accutase
Preusmeritev v drugo kulturo
Odstranite staro gojišče z adherentnih celic in jih sperite s PBS, ki ne vsebuje kalcija in magnezija. Za bučke T25 uporabite 3-5 ml PBS, za bučke T75 pa 5-10 ml. Nato celice popolnoma prekrijte z Accutase, pri čemer uporabite 1-2 ml za bučke T25 in 2,5 ml za bučke T75. Celice pustite inkubirati pri sobni temperaturi 8-10 minut, da se ločijo. Po inkubaciji celice nežno premešajte z 10 ml gojišča, da se ponovno suspendirajo, nato jih 3 minute centrifugirajte pri 300xg. Zavrzite supernatant, ponovno suspendirajte celice v svežem gojišču in jih prenesite v nove bučke, ki že vsebujejo sveže gojišče.
Gostota setve
Posode za celične kulture premažite z želatino. 1 x 104 celic/cm2 bo v približno 4 dneh oblikovalo konfluentno plast.
Obnova tekočine
2 do 3-krat na teden
Obnova po odtaljevanju
Po odmrzovanju celice razporedite na ploščo v gostoti 5 x 104 celic/cm2 in jim pustite, da si opomorejo od zamrzovanja in se prilepijo na ploščo, vsaj 24 ur.
Odtaljevanje in gojenje
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola kakovosti in krioprezervacija

Sterilnost

Kontaminacija z mikoplazmo se izključi z uporabo testov na podlagi PCR in metod za odkrivanje mikoplazme na podlagi luminiscence.

Da se zagotovi, da ni kontaminacije z bakterijami, glivami ali kvasovkami, se celične kulture dnevno vizualno pregledujejo.

Medij za zamrzovanje
Kot gojišče za kriokonzervacijo uporabljamo popolno rastno gojišče (vključno s FBS) + 10 % DMSO za ustrezno vitalnost po odmrznitvi ali CM-1 (kataloška številka 800100 podjetja Cytion), ki vključuje optimizirane osmoprotektante in presnovne stabilizatorje za izboljšanje okrevanja in zmanjšanje stresa, povzročenega s kriom.
Pogoji shranjevanja

Za dolgotrajno shranjevanje viale postavite v tekoči dušik v parni fazi pri približno -150 do -196 °C. Shranjevanje pri -80 °C je sprejemljivo le kot kratek vmesni korak pred prenosom v tekoči dušik.

Pogoji dostave

Kriokonzervirane celične linije se pošiljajo na suhem ledu v potrjeni, izolirani embalaži z zadostno količino hladilnega sredstva, da se med prevozom vzdržuje približno -78 °C. Ob prejemu takoj preglejte embalažo in viale nemudoma prenesite v ustrezno skladišče.

08Donator

Pasma / podvrsta
129/Sv
Starost darovalca
Zarodek