Tartalomra ugrás
F9
Szövet
Herék
Betegség
Teratocarcinoma

Dokumentumok

F9

Cell line · Termékszám 400174

The F9 cell line, a murine embryonal carcinoma model derived from a testicular teratoma of the C57BL/6 mice, serves as an important tool in developmental ...

€430.00adó és szállítási költség nélkül
Raktáron van
Lot
Ajánlott (a legfrissebb tétel)
1

01Általános információk

Leírás

Az F9 sejtvonal, a C57BL/6 egerek hereteratomájából származó egér embriókarcinóma modellje, fontos eszköz a fejlődésbiológia és az embriológia területén. Az F9 sejtek retinsav és dibutiril-ciklikus AMP (cAMP) hatására képesek parietális endodermává differenciálódni. Ezt a differenciálódást a sejtek viselkedésének és fehérjeexpressziójának jelentős változásai jellemzik, beleértve a plazminogén-aktivátor, a laminin és a IV-es típusú kollagén szintézisét. Ezek a fehérjék kulcsfontosságúak a szövetfejlődés és a mátrixképződés folyamatainak megértéséhez a korai embrionális stádiumokban.

Megjegyezzük, hogy a cAMP hatékonysága az F9 sejtek differenciálódásának indukálásában a retinsavval történő előzetes kezelés függvénye, ami az említett jelzőmolekulák közötti összetett kölcsönhatásra utal a fejlődési útvonalak beindításában. Ezenkívül az F9 sejtekre jellemző, hogy a béta-1 integrin gén három példányát tartalmazzák, ami befolyásolhatja a sejtek adhézióját és mobilitását, ami még inkább kiemeli hasznosságukat a sejtek kölcsönhatásainak és az extracelluláris mátrix összetételének tanulmányozásában. E sejtek biztonsági profiljának elkészítése magában foglalja az ektromélia vírus (egérhimlő) vizsgálatát, amelyre negatívnak bizonyultak, ami biztosítja, hogy a sejtek a kísérleti alkalmazások széles körére alkalmasak a vírusfertőzés kockázata nélkül.

Szövet
Herék
Betegség
Teratocarcinoma

02Osztályozás

Organizmus
Egér
Szex
Férfi
Növekedési tulajdonságok
Hűséges
Biológiai biztonsági szint
1

03Jellemzők

Morfológia
Epithelszerű

04Azonosítók

Hivatkozás
F9 (Cytion katalógusszám 400174)
NCBI adóazonosító szám
10090
Cellosaurus
CVCL_0259

05Kifejeződés és fogékonyság

Vírusok
MAP-teszt negatív: M.pulmonis, MVM, Theiler's GD VII, Toolan's H-1, MHV, LDV, RCV/SDA, M-Adenovírus, B.piliformis.
Termékek
Plazminogén-aktivátor, laminin, IV-es típusú kollagén

06Kezelés és tenyésztés

Táptalaj
DMEM, w: 4,5 g/L glükóz, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM nátrium-piruvát (Cytion cikkszám 820300a)
Inkubációs környezet

37°C, 5%CO2, párásított légkör.

Kiegészítők
A táptalajt egészítsük ki 10% FBS-szel
Diszociációs reagens
Accutase
Átültetés
Távolítsa el a régi táptalajt a megtapadt sejtekről, és mossa őket kalcium- és magnéziummentes PBS-szel. T25-ös lombikokhoz 3-5 ml PBS-t, T75-ös lombikokhoz pedig 5-10 ml-t használjunk. Ezután fedjük be a sejteket teljesen Accutase-zal, T25 lombikok esetében 1-2 ml-t, T75 lombikok esetében 2,5 ml-t használva. A sejteket 8-10 percig hagyjuk szobahőmérsékleten inkubálni, hogy leváljanak. Az inkubálás után óvatosan keverjük össze a sejteket 10 ml tápfolyadékkal, hogy reszuszpendáljuk őket, majd centrifugáljuk 300xg-nél 3 percig. Dobja el a felülúszót, szuszpendálja újra a sejteket friss tápfolyadékban, és helyezze át őket új lombikokba, amelyek már friss tápfolyadékot tartalmaznak.
Ültetési sűrűség
A sejtkultúra-lombikokat bevonjuk zselatinnal. 1 x 104 sejt/cm2 körülbelül 4 nap alatt konfluens réteget képez.
Folyadékcsere
hetente 2-3 alkalommal
Az olvadás utáni helyreállás
Felolvasztás után helyezze a sejteket 5 x 104 sejt/cm2 sűrűséggel lemezre, és hagyja, hogy a sejtek felolvadjanak és legalább 24 órán át tapadjanak.
Felolvasztás és tenyésztés
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Minőségellenőrzés és kriokonzerválás

Meddőség

A mikoplazma-szennyeződést mind a PCR-alapú vizsgálatokkal, mind a lumineszcencia-alapú mikoplazma-kimutatási módszerekkel kizárják.

A bakteriális, gombás vagy élesztőgombás szennyeződés elkerülése érdekében a sejtkultúrákat napi vizuális ellenőrzésnek vetik alá.

Fagyasztóközeg
Krioprezerváló táptalajként teljes növekedési táptalajt (beleértve az FBS-t) + 10% DMSO-t használunk a megfelelő kiolvasztás utáni életképesség érdekében, vagy CM-1-et (Cytion katalógusszám: 800100), amely optimalizált ozmoprotektánsokat és metabolikus stabilizátorokat tartalmaz a regenerálódás fokozása és a krio-indukált stressz csökkentése érdekében.
Tárolási feltételek

Hosszú távú tartósítás céljából helyezze az üvegeket gőzfázisú folyékony nitrogénbe, körülbelül -150 és -196 °C közötti hőmérsékleten. A -80 °C-on történő tárolás csak rövid átmeneti lépésként fogadható el a folyékony nitrogénbe való átvitel előtt.

Szállítási feltételek

A kriokonzervált sejtvonalakat szárazjégen, validált, szigetelt csomagolásban szállítják, elegendő hűtőközeggel, hogy a szállítás során a hőmérsékletet körülbelül -78 °C-on tartsák. Átvételkor azonnal vizsgálja meg a tárolóedényt, és haladéktalanul helyezze át az injekciós üvegeket a megfelelő tárolóhelyre.

08Adományozó

Faj / alfaj
129/Sv
Az adományozó életkora
Embrió