Премини към съдържанието
HCC-LM3
Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином при възрастни
Място на метастазите
Бял дроб
Синоними
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

Документи

HCC-LM3

Cell line · Номер на продукта 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

€550.00без ДДС и доставка
На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Клетъчната линия HCC-LM3 е утвърден модел за изследване на хепатоцелуларния карцином (HCC), особено поради високия си метастатичен потенциал. Тази клетъчна линия е изиграла ключова роля в разкриването на механизмите, свързани с туморната пролиферация, миграцията и резистентността към лечение. Изследванията върху клетките HCC-LM3 разкриха тяхното участие в проучването на реакциите към лекарствата и молекулярните пътища, влияещи върху агресивността на рака. Например, беше доказано, че циркулярната РНК circMRPS35 играе онкогенна роля в HCC-LM3, като стимулира клетъчната пролиферация, миграция, инвазия и химиорезистентност, особено към цисплатин. От механична гледна точка circMRPS35 действа чрез абсорбиране на микроРНК-148a-3p, което води до повишаване на експресията на Syntaxin 3 (STX3), който модулира стабилността на фосфатазата и тензин хомолога (PTEN) чрез убитикиниране и разграждане.

Освен това, проучвания са идентифицирали значителни метаболитни промени в HCC-LM3 клетките, които корелират с туморния растеж и преживяемостта. Тази клетъчна линия, заедно с други HCC модели, демонстрира отчетливи промени в метаболизма на глюкозата и липидите, които подпомагат бързата туморна пролиферация и се считат за характерни белези на рака на черния дроб. Изследвания, използващи секвениране на РНК на единични клетки, са разкрили как метаболитната хетерогенност в рамките на субпопулациите на хепатоцитите влияе върху прогнозата и терапевтичните резултати. Забележително е, че анализите на метаболитните пътища в HCC-LM3 са били от съществено значение за идентифицирането на потенциални биомаркери и терапевтични цели за подобрени клинични стратегии.

Тъкан
Черен дроб
Заболяване
Хепатоцелуларен карцином при възрастни
Място на метастазите
Бял дроб
Синоними
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Класификация

Организъм
Човек
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Ниво на биологична безопасност
2

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Тип клетка
Епителни клетки
Кариотип
Хипотриплоиден кариотип; Средно брой хромозоми: 55–58

04Идентификатори

Източник
HCC-LM3 (каталожен номер на Cytion 305504)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
9606
Целозавър
CVCL_6832

05Проява и предразположеност

Експресия на протеини
Албумин+, КК8+
Експресия на антигена
HBsAg-
Онкогени
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Мутационен профил
Мутация: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Мутация: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Мутация: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Вируси
Трансформатор: вирус на хепатит В (HBV)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
DMEM, w: 4,5 g/L глюкоза, w: 4 mM L-глутамин, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM натриев пируват (номер на изделието на Cytion 820300a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Контрол на качеството и криоконсервация

Стерилност

Замърсяването с микоплазма се изключва както чрез PCR-базирани анализи, така и чрез луминесцентни методи за откриване на микоплазма.

За да се гарантира, че няма бактериално, гъбично или дрождево замърсяване, клетъчните култури се подлагат на ежедневни визуални проверки.

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна среда за растеж (включително FBS) + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване или CM-1 (каталожен номер 800100 на Cytion), която включва оптимизирани осмопротектори и метаболитни стабилизатори за подобряване на възстановяването и намаляване на криоиндуцирания стрес.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
39 години
Етническа принадлежност
Китайски