Siirry sisältöön
HCC-LM3
Kudos
Maksa
Sairaus
Aikuisten hepatosellulaarinen karsinooma
Metastaasikohde
Keuhkot
Synonyymit
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

Asiakirjat

HCC-LM3

Cell line · Tuotenumero 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

€550.00ilman veroja ja toimituskuluja
Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

HCC-LM3-solulinja on vakiintunut malli maksasyövän (HCC) tutkimiseen, erityisesti sen suuren etäpesäkkeiden muodostumiskyvyn vuoksi. Tämä solulinja on ollut keskeisessä asemassa kasvaimen lisääntymiseen, leviämiseen ja hoidon vastustuskykyyn liittyvien mekanismien selvittämisessä. HCC-LM3-soluja koskeva tutkimus on paljastanut niiden osallisuuden lääkevasteiden ja syövän aggressiivisuuteen vaikuttavien molekyylireittien tutkimuksessa. Esimerkiksi on osoitettu, että sirkulaarinen RNA circMRPS35:llä on onkogeeninen rooli HCC-LM3:ssa, sillä se edistää solujen proliferaatiota, migraatiota, invaasiota ja kemoresistenssiä, erityisesti sisplatiinille. Mekanistisesti circMRPS35 toimii imemällä mikroRNA-148a-3p:tä, mikä johtaa Syntaxin 3:n (STX3) ilmentymisen lisääntymiseen. STX3 säätelee fosfataasi- ja tensin-homologin (PTEN) stabiilisuutta ubikvitaation ja hajoamisen kautta.

Lisäksi tutkimuksissa on havaittu HCC-LM3-soluissa merkittäviä metabolisia muutoksia, jotka korreloivat kasvaimen kasvun ja eloonjäämisen kanssa. Tässä solulinjassa, samoin kuin muissa HCC-malleissa, on havaittu merkittäviä muutoksia glukoosi- ja lipidimetabolismissa, jotka tukevat kasvaimen nopeaa proliferaatiota ja joita pidetään maksasyövän tunnusmerkkeinä. Yksisoluisen RNA-sekvensoinnin avulla tehdyt tutkimukset ovat valaisseet, kuinka hepatosyyttien alaryhmien sisäinen metabolinen heterogeenisyys vaikuttaa ennusteeseen ja hoitotuloksiin. Erityisesti HCC-LM3:n metabolisten reittien analyysit ovat olleet olennaisia potentiaalisten biomarkkerien ja terapeuttisten kohteiden tunnistamisessa parempien kliinisten strategioiden kehittämiseksi.

Kudos
Maksa
Sairaus
Aikuisten hepatosellulaarinen karsinooma
Metastaasikohde
Keuhkot
Synonyymit
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Luokittelu

Organismi
Ihminen
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
Bioturvallisuustaso
2

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Solutyyppi
Epiteelisolut
Karyotyyppi
Hypotriploidi karyotyyppi; Kromosomien keskimääräinen lukumäärä: 55–58

04Tunnisteet

Lähdeviite
HCC-LM3 (Cytionin tuotenumero 305504)
NCBI-verotunnus
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Ilmentyminen ja alttius

Proteiinin ilmentyminen
Albumiini+, CK8+
Antigeenin ilmentyminen
HBsAg-
Onkogeenit
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Mutaatioprofiili
Mutaatio: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutaatio: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutaatio: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Virukset
Transformantti: hepatiitti B -virus (HBV)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
DMEM, w: 4,5 g/l glukoosia, w: 4 mM L-glutamiinia, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM natriumpyruvaattia (Cytionin artikkelinumero 820300a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Hedelmättömyys

Mykoplasmakontaminaatio suljetaan pois sekä PCR-pohjaisilla määrityksillä että luminesenssiin perustuvilla mykoplasman osoitusmenetelmillä.

Bakteeri-, sieni- tai hiivakontaminaation välttämiseksi soluviljelmät tarkastetaan päivittäin silmämääräisesti.

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa (mukaan lukien FBS) + 10 % DMSO:ta riittävän sulatuksen jälkeisen elinkelpoisuuden varmistamiseksi tai CM-1:tä (Cytionin luettelonumero 800100), joka sisältää optimoituja osmoprotectantteja ja metabolisia stabilisaattoreita, jotka parantavat elpymistä ja vähentävät kryosäilytyksen aiheuttamaa stressiä.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
39 vuotta
Etnisyys
Kiinalainen