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HCC-LM3
Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare adulto
Sito metastatico
Polmone
Sinonimi
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

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HCC-LM3

Cell line · Codice prodotto 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

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01Informazioni generali

Descrizione

La linea cellulare HCC-LM3 è un modello consolidato per lo studio del carcinoma epatocellulare (HCC), in particolare grazie al suo elevato potenziale metastatico. Questa linea cellulare ha svolto un ruolo fondamentale nella scoperta dei meccanismi legati alla proliferazione tumorale, alla migrazione e alla resistenza terapeutica. La ricerca sulle cellule HCC-LM3 ha rivelato il loro coinvolgimento nell'esplorazione delle risposte ai farmaci e delle vie molecolari che influenzano l'aggressività del cancro. Ad esempio, è stato dimostrato che l'RNA circolare circMRPS35 svolge un ruolo oncogenico nell'HCC-LM3, promuovendo la proliferazione cellulare, la migrazione, l'invasione e la chemioresistenza, in particolare al cisplatino. Dal punto di vista meccanicistico, circMRPS35 agisce assorbendo il microRNA-148a-3p, portando alla sovraregolazione di Syntaxin 3 (STX3), che modula la stabilità dell'omologo della fosfatasi e della tensina (PTEN) attraverso l'ubiquitinazione e la degradazione.

Inoltre, alcuni studi hanno identificato significativi cambiamenti metabolici nelle cellule HCC-LM3 che sono correlati alla crescita tumorale e alla sopravvivenza. Questa linea cellulare, insieme ad altri modelli di HCC, mostra marcate alterazioni nel metabolismo del glucosio e dei lipidi, che favoriscono la rapida proliferazione tumorale e sono considerate caratteristiche distintive del cancro al fegato. La ricerca che impiega il sequenziamento dell’RNA a singola cellula ha chiarito in che modo l’eterogeneità metabolica all’interno delle sottopopolazioni di epatociti influisca sulla prognosi e sugli esiti terapeutici. In particolare, le analisi dei percorsi metabolici nell'HCC-LM3 sono state essenziali per identificare potenziali biomarcatori e bersagli terapeutici per migliorare le strategie cliniche.

Tessuto
Fegato
Malattia
Carcinoma epatocellulare adulto
Sito metastatico
Polmone
Sinonimi
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Classificazione

Organismo
Umano
Sesso
Maschio
Proprietà di crescita
Aderente
Livello di biosicurezza
2

03Caratteristiche

Morfologia
Simile all'epitelio
Tipo di cellula
Cellule epiteliali
Cariotipo
Cariotipo ipotriploide; Numero medio di cromosomi: 55-58

04Identificatori

Riferimento bibliografico
HCC-LM3 (codice catalogo Cytion 305504)
Codice fiscale NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Espressione e suscettibilità

Espressione proteica
Albumina+, CK8+
Espressione dell'antigene
HBsAg-
Oncogeni
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Profilo mutazionale
Mutazione: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutazione: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutazione: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Virus
Trasformante: virus dell'epatite B (HBV)

06Manipolazione e coltura

Terreno di coltura
DMEM, w: 4,5 g/L di glucosio, w: 4 mM di L-Glutammina, w: 3,7 g/L di NaHCO3, w: 1,0 mM di piruvato di sodio (articolo Cytion numero 820300a)
Atmosfera di incubazione

37°C, 5%CO2, atmosfera umidificata.

Integratori
Integrare il terreno di coltura con il 10% di FBS
Reagente di dissociazione
Accutase
Subcoltura
Rimuovere il vecchio terreno dalle cellule aderenti e lavarle con PBS privo di calcio e magnesio. Per le fiasche T25, utilizzare 3-5 ml di PBS e per le fiasche T75, 5-10 ml. Quindi, coprire completamente le cellule con Accutase, utilizzando 1-2 ml per le fiasche T25 e 2,5 ml per le fiasche T75. Lasciare incubare le cellule a temperatura ambiente per 8-10 minuti per staccarle. Dopo l'incubazione, mescolare delicatamente le cellule con 10 ml di terreno per risospenderle, quindi centrifugare a 300xg per 3 minuti. Scartare il surnatante, risospendere le cellule in terreno fresco e trasferirle in nuove fiasche contenenti terreno fresco.
Scongelamento e coltura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controllo di qualità e crioconservazione

Sterilità

La contaminazione da micoplasma viene esclusa utilizzando sia saggi basati sulla PCR sia metodi di rilevamento del micoplasma basati sulla luminescenza.

Per garantire l'assenza di contaminazione batterica, fungina o da lieviti, le colture cellulari sono sottoposte a ispezioni visive quotidiane.

Terreno di coltura congelato
Come terreno di crioconservazione, utilizziamo un terreno di crescita completo (incluso FBS) + 10% DMSO per un'adeguata vitalità post-scongelamento, o CM-1 (numero di catalogo Cytion 800100), che include osmoprotettori e stabilizzatori metabolici ottimizzati per migliorare il recupero e ridurre lo stress crio-indotto.
Condizioni di conservazione

Per la conservazione a lungo termine, porre le fiale in azoto liquido in fase vapore a una temperatura compresa tra -150 e -196 °C circa. La conservazione a -80 °C è accettabile solo come breve fase intermedia prima del trasferimento in azoto liquido.

Condizioni di spedizione

Le linee cellulari crioconservate vengono spedite su ghiaccio secco in confezioni isolate e convalidate, con una quantità di refrigerante sufficiente a mantenere circa -78 °C durante il trasporto. Al ricevimento, ispezionare immediatamente il contenitore e trasferire immediatamente le fiale in un luogo di conservazione appropriato.

08Donatore

Età dei donatori
39 anni
Etnia
Cinese