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HCC-LM3
Pañuelo de papel
Hígado
Enfermedad
Carcinoma hepatocelular en adultos
Lugar de metástasis
Pulmón
Sinónimos
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

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HCC-LM3

Cell line · Número de producto 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

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01Información general

Descripción

La línea celular HCC-LM3 es un modelo consolidado para el estudio del carcinoma hepatocelular (CHC), especialmente debido a su elevado potencial metastásico. Esta línea celular ha sido fundamental para desentrañar los mecanismos relacionados con la proliferación tumoral, la migración y la resistencia al tratamiento. La investigación sobre las células HCC-LM3 ha revelado su implicación en el estudio de las respuestas a los fármacos y las vías moleculares que influyen en la agresividad del cáncer. Por ejemplo, se ha demostrado que el ARN circular circMRPS35 desempeña un papel oncogénico en HCC-LM3, promoviendo la proliferación, la migración, la invasión y la quimiorresistencia de las células, especialmente al cisplatino. Desde el punto de vista mecánico, el circMRPS35 actúa capturando el microARN-148a-3p, lo que conduce a la regulación al alza de la sintaxina 3 (STX3), que modula la estabilidad del homólogo de la fosfatasa y la tensina (PTEN) a través de la ubiquitinación y la degradación.

Además, diversos estudios han identificado cambios metabólicos significativos en las células HCC-LM3 que se correlacionan con el crecimiento tumoral y la supervivencia. Esta línea celular, junto con otros modelos de HCC, muestra alteraciones marcadas en el metabolismo de la glucosa y los lípidos, que favorecen la rápida proliferación tumoral y se consideran características distintivas del cáncer de hígado. Las investigaciones que emplean la secuenciación de ARN unicelular han puesto de manifiesto cómo la heterogeneidad metabólica dentro de las subpoblaciones de hepatocitos influye en el pronóstico y los resultados terapéuticos. Cabe destacar que los análisis de las vías metabólicas en HCC-LM3 han sido esenciales para identificar posibles biomarcadores y dianas terapéuticas con el fin de mejorar las estrategias clínicas.

Pañuelo de papel
Hígado
Enfermedad
Carcinoma hepatocelular en adultos
Lugar de metástasis
Pulmón
Sinónimos
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Clasificación

Organismo
Humano
Sexo
Hombre
Propiedades de crecimiento
Adherente
Nivel de bioseguridad
2

03Características

Morfología
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliales
Cariotipo
Cariotipo hipotriploide; número medio de cromosomas: 55-58

04Identificadores

Referencia
HCC-LM3 (número de catálogo de Cytion 305504)
N.º de identificación fiscal del NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Expresión y susceptibilidad

Expresión de proteínas
Albumina+, CK8+
Expresión de antígenos
HBsAg-
Oncogenes
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Perfil mutacional
Mutación: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutación: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutación: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Virus
Transformante: virus de la hepatitis B (VHB)

06Manejo y cultivo

Medio de cultivo
DMEM, w: 4,5 g/L de glucosa, w: 4 mM de L-glutamina, w: 3,7 g/L de NaHCO3, w: 1,0 mM de piruvato sódico (número de artículo de Cytion 820300a)
Atmósfera de incubación

37°C, 5%CO2, atmósfera humidificada.

Suplementos
Complementar el medio con un 10% de FBS
Reactivo de disociación
Accutase
Subcultivo
Retire el medio antiguo de las células adheridas y lávelas con PBS que carezca de calcio y magnesio. Para matraces T25, utilice 3-5 ml de PBS, y para matraces T75, utilice 5-10 ml. A continuación, cubra completamente las células con Accutase, utilizando 1-2 ml para matraces T25 y 2,5 ml para matraces T75. Deje incubar las células a temperatura ambiente durante 8-10 minutos para desprenderlas. Tras la incubación, mezclar suavemente las células con 10 ml de medio para resuspenderlas y, a continuación, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Desechar el sobrenadante, resuspender las células en medio fresco y transferirlas a nuevos matraces que ya contengan medio fresco.
Descongelación y cultivo
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Control de calidad y criopreservación

Esterilidad

La contaminación por micoplasma se excluye utilizando tanto ensayos basados en la PCR como métodos de detección de micoplasma basados en la luminiscencia.

Para garantizar la ausencia de contaminación bacteriana, fúngica o por levaduras, los cultivos celulares se someten a inspecciones visuales diarias.

Medio de congelación
Como medio de criopreservación, utilizamos el medio de crecimiento completo (incluido FBS) + 10% DMSO para una viabilidad adecuada tras la descongelación, o CM-1 (número de catálogo 800100 de Cytion), que incluye osmoprotectores optimizados y estabilizadores metabólicos para mejorar la recuperación y reducir el estrés crioinducido.
Condiciones de almacenamiento

Para la conservación a largo plazo, colocar los viales en nitrógeno líquido en fase vapor a una temperatura aproximada de -150 a -196 °C. El almacenamiento a -80 °C sólo es aceptable como breve paso intermedio antes de la transferencia al nitrógeno líquido.

Condiciones de envío

Las líneas celulares crioconservadas se envían en hielo seco en envases validados y aislados con suficiente refrigerante para mantener aproximadamente -78 °C durante el tránsito. A la recepción, inspeccione el envase inmediatamente y transfiera los viales sin demora al almacenamiento adecuado.

08Donante

Edad del donante
39 años
Origen étnico
Chino