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HCC-LM3
Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom bei Erwachsenen
Metastasenherd
Lunge
Synonyme
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

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HCC-LM3

Cell line · Artikelnummer 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

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01Allgemeine Informationen

Beschreibung

Die HCC-LM3-Zelllinie ist ein etabliertes Modell zur Erforschung des hepatozellulären Karzinoms (HCC), insbesondere aufgrund ihres hohen Metastasierungspotenzials. Diese Zelllinie hat maßgeblich dazu beigetragen, Mechanismen im Zusammenhang mit Tumorproliferation, Migration und Therapieresistenz aufzudecken. Die Forschung an HCC-LM3-Zellen hat deren Bedeutung für die Erforschung von Arzneimittelreaktionen und der molekularen Signalwege, die die Aggressivität von Krebs beeinflussen, aufgezeigt. So wurde beispielsweise gezeigt, dass die zirkuläre RNA circMRPS35 in HCC-LM3 eine onkogene Rolle spielt und die Zellproliferation, Migration, Invasion sowie die Chemoresistenz, insbesondere gegenüber Cisplatin, fördert. Mechanistisch gesehen wirkt circMRPS35, indem es microRNA-148a-3p bindet, was zur Hochregulation von Syntaxin 3 (STX3) führt, welches die Stabilität des Phosphatase- und Tensin-Homologs (PTEN) durch Ubiquitinierung und Abbau moduliert.

Darüber hinaus haben Studien signifikante metabolische Veränderungen in HCC-LM3-Zellen identifiziert, die mit Tumorwachstum und Überleben korrelieren. Diese Zelllinie zeigt, ebenso wie andere HCC-Modelle, deutliche Veränderungen im Glukose- und Lipidstoffwechsel, die eine rasche Tumorproliferation begünstigen und als Kennzeichen von Leberkrebs gelten. Forschungen unter Verwendung von Einzelzell-RNA-Sequenzierung haben aufgezeigt, wie sich die metabolische Heterogenität innerhalb von Hepatozyten-Subpopulationen auf die Prognose und die Therapieergebnisse auswirkt. Insbesondere waren Stoffwechselweganalysen in HCC-LM3 entscheidend für die Identifizierung potenzieller Biomarker und therapeutischer Ziele zur Verbesserung klinischer Strategien.

Gewebe
Leber
Krankheit
Hepatozelluläres Karzinom bei Erwachsenen
Metastasenherd
Lunge
Synonyme
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Klassifizierung

Organismus
Mensch
Sex
Männlich
Wachstumseigenschaften
Anhänger
Biologische Sicherheitsstufe
2

03Merkmale

Morphologie
Epithelähnlich
Zelltyp
Epithelzellen
Karyotyp
Hypotriploider Karyotyp; durchschnittliche Chromosomenzahl: 55–58

04Bezeichner

Quellenangabe
HCC-LM3 (Cytion-Katalognummer 305504)
NCBI-Steuer-ID
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Expression und Anfälligkeit

Proteinexpression
Albumin-positiv, CK8-positiv
Antigenexpression
HBsAg-
Onkogene
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Mutationsprofil
Mutation: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutation: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutation: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Viren
Transformant: Hepatitis-B-Virus (HBV)

06Handhabung und Kultur

Nährmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamin, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvat (Cytion-Artikelnummer 820300a)
Inkubationsatmosphäre

37°C, 5%CO2, befeuchtete Atmosphäre.

Nahrungsergänzungsmittel
Ergänzen Sie das Medium mit 10% FBS
Dissoziationsreagenz
Accutase
Subkultivierung
Entfernen Sie das alte Medium von den adhärenten Zellen und waschen Sie sie mit PBS, das kein Kalzium und Magnesium enthält. Für T25-Kolben 3-5 ml PBS und für T75-Kolben 5-10 ml verwenden. Anschließend werden die Zellen vollständig mit Accutase bedeckt, wobei 1-2 ml für T25-Kolben und 2,5 ml für T75-Kolben verwendet werden. Lassen Sie die Zellen 8-10 Minuten bei Raumtemperatur inkubieren, um sie abzulösen. Nach der Inkubation mischen Sie die Zellen vorsichtig mit 10 ml Medium, um sie zu resuspendieren, und zentrifugieren sie dann 3 Minuten lang bei 300xg. Den Überstand verwerfen, die Zellen in frischem Medium resuspendieren und in neue Kolben überführen, die bereits frisches Medium enthalten.
Auftauen und Kultivierung
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Qualitätskontrolle und Kryokonservierung

Sterilität

Eine Kontamination mit Mykoplasmen wird sowohl durch PCR-basierte Assays als auch durch lumineszenzbasierte Mykoplasmen-Nachweisverfahren ausgeschlossen.

Um sicherzustellen, dass keine Kontamination mit Bakterien, Pilzen oder Hefen vorliegt, werden die Zellkulturen täglich visuell überprüft.

Gefriermedium
Als Kryokonservierungsmedium verwenden wir komplettes Wachstumsmedium (einschließlich FBS) + 10 % DMSO für eine angemessene Lebensfähigkeit nach dem Auftauen oder CM-1 (Cytion Katalognummer 800100), das optimierte Osmoprotektoren und Stoffwechselstabilisatoren enthält, um die Erholung zu verbessern und kryoinduzierten Stress zu reduzieren.
Lagerbedingungen

Zur Langzeitkonservierung werden die Fläschchen in flüssigem Stickstoff bei etwa -150 bis -196 °C gelagert. Eine Lagerung bei -80 °C ist nur als kurzer Zwischenschritt vor der Überführung in flüssigen Stickstoff akzeptabel.

Versandbedingungen

Kryokonservierte Zelllinien werden auf Trockeneis in einer validierten, isolierten Verpackung mit ausreichend Kühlmittel versandt, um während des gesamten Transports eine Temperatur von etwa -78 °C aufrechtzuerhalten. Prüfen Sie den Behälter bei Erhalt sofort und bringen Sie die Fläschchen unverzüglich in ein geeignetes Lager.

08Spender

Alter des Spenders
39 Jahre
Ethnische Zugehörigkeit
Chinesisch