Pereiti prie turinio
HCC-LM3
Audinys
Kepenys
Liga
Suaugusiųjų hepatocelulinė karcinoma
Metastazių vieta
Plaučiai
Sinonimai
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

Dokumentai

HCC-LM3

Cell line · Prekės numeris 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

€550.00neįskaitant mokesčių ir pristatymo išlaidų
Yra sandėlyje
Lot
Rekomenduojama (šviežiausia partija)
  • CoA
1

01Bendra informacija

Aprašymas

HCC-LM3 ląstelių linija yra pripažintas hepatoceliulinės karcinomos (HCC) tyrimo modelis, ypač dėl jos didelio metastazavimo potencialo. Ši ląstelių linija buvo itin svarbi atskleidžiant mechanizmus, susijusius su naviko proliferacija, migracija ir atsparumu gydymui. Tyrimai su HCC-LM3 ląstelėmis atskleidė jų vaidmenį tiriant reakciją į vaistus ir molekulinius kelius, įtakojančius vėžio agresyvumą. Pavyzdžiui, buvo įrodyta, kad cirkuliarinė RNR circMRPS35 atlieka onkogeninį vaidmenį HCC-LM3, skatindama ląstelių proliferaciją, migraciją, invaziją ir atsparumą chemoterapijai, ypač cisplatinui. Mechanizmo požiūriu circMRPS35 veikia sugerdama mikroRNR-148a-3p, o tai lemia sinaksino 3 (STX3) ekspresijos padidėjimą, kuris reguliuoja fosfatazės ir tensino homologo (PTEN) stabilumą per ubikvitinimą ir skilimą.

Be to, tyrimai nustatė reikšmingus metabolinius pokyčius HCC-LM3 ląstelėse, kurie koreliuoja su naviko augimu ir išgyvenamumu. Ši ląstelių linija, kartu su kitais HCC modeliais, rodo ryškius gliukozės ir lipidų metabolizmo pokyčius, kurie skatina greitą naviko proliferaciją ir yra laikomi kepenų vėžio požymiais. Tyrimai, kuriuose naudojamas vienos ląstelės RNR sekvenavimas, atskleidė, kaip metabolinė heterogeniškumas hepatocitų subpopuliacijose veikia prognozę ir terapinius rezultatus. Pažymėtina, kad HCC-LM3 metabolinių kelių analizės buvo būtinos siekiant nustatyti potencialius biomarkerius ir terapinius tikslus, kad būtų galima tobulinti klinikines strategijas.

Audinys
Kepenys
Liga
Suaugusiųjų hepatocelulinė karcinoma
Metastazių vieta
Plaučiai
Sinonimai
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Klasifikacija

Organizmas
Žmogus
Seksas
Vyras
Augimo savybės
Prisijungęs
Biologinio saugumo lygis
2

03Charakteristikos

Morfologija
Į epitelį panašus
Ląstelių tipas
Epitelio ląstelės
Kariotipas
Hipotriploidinis kariotipas; Vidutinis chromosomų skaičius: 55–58

04Identifikatoriai

Nuoroda
HCC-LM3 (Cytion katalogo numeris 305504)
NCBI mokesčių identifikavimo kodas
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Išraiška ir jautrumas

Baltojų baltymų ekspresija
Albuminas+, CK8+
Antigeno ekspresija
HBsAg-
Onkogenai
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Mutacijų profilis
Mutacija: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutacija: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutacija: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Virusai
Transformantas: hepatito B virusas (HBV)

06Laikymas ir auginimas

Maitinamoji terpė
DMEM, š: 4,5 g/l gliukozės, š: 4 mM L-glutamino, š: 3,7 g/l NaHCO3, š: 1,0 mM natrio piruvato (Cytion gaminio numeris 820300a)
Inkubacijos aplinka

37 °C, 5 %CO2, drėkintoje atmosferoje.

Maisto papildai
Papildykite terpę 10 % FBS
Disociacijos reagentas
Accutase
Subkultūrinis auginimas
Pašalinkite seną terpę nuo prilipusių ląstelių ir nuplaukite jas PBS, kuriame nėra kalcio ir magnio. T25 kolboms naudokite 3-5 ml PBS, o T75 kolboms - 5-10 ml. Tuomet visiškai užpilkite ląsteles "Accutase", naudodami 1-2 ml T25 kolboms ir 2,5 ml T75 kolboms. Leiskite ląstelėms inkubuotis kambario temperatūroje 8-10 minučių, kad jos atsiskirtų. Po inkubacijos atsargiai sumaišykite ląsteles su 10 ml terpės, kad jos vėl suspenduotų, tada 3 minutes centrifuguokite 300xg greičiu. Išmeskite supernatantą, vėl sutirpinkite ląsteles šviežioje terpėje ir perkelkite jas į naujas kolbas, kuriose jau yra šviežia terpė.
Atšildymas ir auginimas
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kokybės kontrolė ir kriokonservavimas

Sterilumas

Mikoplazmos užterštumas atmetamas taikant PGR pagrįstus tyrimus ir liuminescencinius mikoplazmos aptikimo metodus.

Siekiant užtikrinti, kad nebūtų užteršimo bakterijomis, grybeliais ar mielėmis, ląstelių kultūros kasdien vizualiai tikrinamos.

Šaldymo terpė
Kaip kriokonservavimo terpę naudojame visišką augimo terpę (įskaitant FBS) + 10 % DMSO, kad būtų užtikrintas tinkamas gyvybingumas po atšildymo, arba CM-1 (Cytion katalogo numeris 800100), kurioje yra optimizuotų osmoprotektorių ir medžiagų apykaitos stabilizatorių, kad būtų pagerintas atsigavimas ir sumažintas kriokonservavimo sukeltas stresas.
Laikymo sąlygos

Norėdami ilgai saugoti, įdėkite buteliukus į garų fazės skystą azotą maždaug -150-196 °C temperatūroje. Laikymas -80 °C temperatūroje yra priimtinas tik kaip trumpas tarpinis etapas prieš perkeliant į skystąjį azotą.

Pristatymo sąlygos

Kriokonservuotos ląstelių linijos gabenamos ant sauso ledo patvirtintoje, izoliuotoje pakuotėje su pakankamu kiekiu šaldymo skysčio, kad pervežimo metu būtų palaikoma maždaug -78 °C temperatūra. Gavę pakuotę, nedelsdami ją apžiūrėkite ir nedelsdami perkelkite mėgintuvėlius į tinkamą saugyklą.

08Donoras

Donoro amžius
39 metai
Etninė priklausomybė
Kinų