Mine otse sisu juurde
HCC-LM3
Kude
Maksa
Haigus
Täiskasvanute hepatotsellulaarne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Kopsud
Sünonüümid
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

Dokumendid

HCC-LM3

Cell line · Toote number 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

€550.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta
Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

HCC-LM3 rakuliin on tunnustatud mudel maksarakulise kartsinoomi (HCC) uurimiseks, eelkõige tänu selle suurele metastaaside tekkimise potentsiaalile. See rakuliin on olnud oluline abivahend kasvajate proliferatsiooni, migratsiooni ja ravimresistentsusega seotud mehhanismide avastamisel. HCC-LM3 rakkude uuringud on näidanud nende osalust ravimireaktsioonide ja vähki mõjutavate molekulaarsete signaaliteede uurimisel. Näiteks on näidatud, et tsirkulaarne RNA circMRPS35 mängib HCC-LM3-s onkogeenset rolli, soodustades rakkude proliferatsiooni, migratsiooni, invasiivsust ja kemoresistentsust, eriti tsisplatiini suhtes. Mehhanistiliselt toimib circMRPS35 mikroRNA-148a-3p sidumise kaudu, mis viib Syntaxin 3 (STX3) ülesreguleerimiseni, mis moduleerib fosfataasi ja tensiini homoloogi (PTEN) stabiilsust ubikvitinatsiooni ja lagundamise kaudu.

Lisaks on uuringud tuvastanud HCC-LM3 rakkudes olulisi metaboolseid muutusi, mis korreleeruvad kasvaja kasvu ja elulemusega. Selles rakuliinis, nagu ka teistes HCC mudelites, esinevad märkimisväärsed muutused glükoosi- ja lipiidide ainevahetuses, mis toetavad kiiret kasvaja proliferatsiooni ja mida peetakse maksavähi tunnusjooneks. Üksikraku RNA sekveneerimist kasutavad uuringud on valgustanud, kuidas hepatotsüütide subpopulatsioonide sisene metaboolne heterogeensus mõjutab prognoosi ja ravi tulemusi. Eelkõige on HCC-LM3 metaboolseid radu käsitlevad analüüsid olnud olulised potentsiaalsete biomarkkerite ja ravisihte tuvastamisel, et parandada kliinilisi strateegiaid.

Kude
Maksa
Haigus
Täiskasvanute hepatotsellulaarne kartsinoom
Metastaaside asukoht
Kopsud
Sünonüümid
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Klassifikatsioon

Organism
Inimene
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
Bioloogilise ohutuse tase
2

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Rakutüüp
Epiteelirakud
Karyotüüp
Hüpotriploidsed kromosoomid; Keskmine kromosoomide arv: 55–58

04Tunnused

Viide
HCC-LM3 (Cytioni katalooginumber 305504)
NCBI maksukood
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Valgu ekspressioon
Albumiin+, CK8+
Antigeeni ekspressioon
HBsAg-
Onkogeenid
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Mutatsiooniprofiil
Mutatsioon: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutatsioon: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutatsioon: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Viirused
Transformant: B-hepatiidi viirus (HBV)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
DMEM, w: 4,5 g/L glükoosi, w: 4 mM L-glutamiini, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM naatriumpüruvaati (Cytioni artikli number 820300a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Viljatus

Mükoplasmakontaminatsioon on välistatud nii PCR-põhiste analüüside kui ka luminestsentsil põhinevate mükoplasma tuvastamise meetodite abil.

Bakteriaalse, seene- või pärmsaaste puudumise tagamiseks kontrollitakse rakukultuure iga päev visuaalselt.

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikusena kasutame täielikku kasvukeskkonda (sh FBS) + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist, või CM-1 (Cytioni katalooginumber 800100), mis sisaldab optimeeritud osmoprotektante ja metaboolseid stabilisaatoreid, et parandada taastumist ja vähendada krüostressi.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
39 aastat
Etniline kuuluvus
Hiina