Ga naar de inhoud
HCC-LM3
Weefsel
Lever
Ziekte
Hepatocellulair carcinoom bij volwassenen
Plaats van uitzaaiingen
Long
Synoniemen
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

Documenten

HCC-LM3

Cell line · Productnummer 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

€550.00excl. btw en verzendkosten
Op voorraad
Lot
Aanbevolen (verste partij)
  • CoA
1

01Algemene informatie

Beschrijving

De HCC-LM3-cellijn is een gevestigd model voor het onderzoek naar hepatocellulair carcinoom (HCC), met name vanwege het hoge metastatische potentieel ervan. Deze cellijn heeft een cruciale rol gespeeld bij het blootleggen van mechanismen die verband houden met tumorgroei, migratie en resistentie tegen behandelingen. Onderzoek naar HCC-LM3-cellen heeft hun betrokkenheid bij het onderzoeken van reacties op geneesmiddelen en de moleculaire routes die de agressiviteit van kanker beïnvloeden, aan het licht gebracht. Zo is bijvoorbeeld aangetoond dat circulair RNA circMRPS35 een oncogene rol speelt in HCC-LM3, waarbij het celproliferatie, migratie, invasie en chemoresistentie bevordert, met name tegen cisplatine. Mechanistisch gezien werkt circMRPS35 door microRNA-148a-3p te binden, wat leidt tot de opregulatie van Syntaxin 3 (STX3), dat de stabiliteit van fosfatase en tensine-homoloog (PTEN) moduleert via ubiquitinatie en afbraak.

Bovendien hebben studies significante metabole verschuivingen in HCC-LM3-cellen geïdentificeerd die correleren met tumorgroei en overleving. Deze cellijn vertoont, samen met andere HCC-modellen, opvallende veranderingen in het glucose- en lipidenmetabolisme, die snelle tumorproliferatie ondersteunen en worden beschouwd als kenmerken van leverkanker. Onderzoek met behulp van single-cell RNA-sequencing heeft duidelijk gemaakt hoe metabole heterogeniteit binnen subpopulaties van hepatocyten de prognose en therapeutische resultaten beïnvloedt. Met name analyses van metabolische routes in HCC-LM3 zijn essentieel geweest voor het identificeren van potentiële biomarkers en therapeutische doelwitten voor verbeterde klinische strategieën.

Weefsel
Lever
Ziekte
Hepatocellulair carcinoom bij volwassenen
Plaats van uitzaaiingen
Long
Synoniemen
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Classificatie

Organisme
Mens
Seks
Man
Groei-eigenschappen
Aanhanger
Bioveiligheidsniveau
2

03Kenmerken

Morfologie
Epitheelachtig
Celtype
Epitheelcellen
Karyotype
Hypotriploïd karyotype; Gemiddeld aantal chromosomen: 55-58

04Identificatiegegevens

Bronvermelding
HCC-LM3 (Cytion-catalogusnummer 305504)
NCBI-belastingnummer
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Expressie en vatbaarheid

Eiwit-expressie
Albumine+, CK8+
Antigeenexpressie
HBsAg-
Oncogenen
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Mutatieprofiel
Mutatie: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutatie: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutatie: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Virussen
Transformant: hepatitis B-virus (HBV)

06Behandeling en kweek

Kweekmedium
DMEM, w: 4,5 g/L Glucose, w: 4 mM L-Glutamine, w: 3,7 g/L NaHCO3, w: 1,0 mM Natriumpyruvaat (Cytion artikelnummer 820300a)
Incubatieomgeving

37°C, 5%CO2, bevochtigde atmosfeer.

Supplementen
Vul het medium aan met 10% FBS
Dissociatiereagens
Accutase
Heruitplanten
Verwijder het oude medium van de adherente cellen en was ze met PBS zonder calcium en magnesium. Gebruik voor T25-flesjes 3-5 ml PBS en voor T75-flesjes 5-10 ml. Bedek de cellen vervolgens volledig met Accutase, met 1-2 ml voor T25-flesjes en 2,5 ml voor T75-flesjes. Laat de cellen gedurende 8-10 minuten bij kamertemperatuur incuberen om ze los te maken. Na incubatie de cellen voorzichtig mengen met 10 ml medium om ze te resuspenderen en vervolgens centrifugeren bij 300xg gedurende 3 minuten. Gooi het supernatant weg, resuspendeer de cellen in vers medium en breng ze over in nieuwe kolven die al vers medium bevatten.
Ontdooien en kweken
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kwaliteitscontrole en cryopreservatie

Onvruchtbaarheid

Mycoplasmaverontreiniging wordt uitgesloten met zowel PCR-gebaseerde testen als op luminescentie gebaseerde mycoplasmadetectiemethoden.

Om er zeker van te zijn dat er geen besmetting is met bacteriën, schimmels of gisten, worden de celculturen dagelijks onderworpen aan visuele inspecties.

Kweekmedium invriezen
Als cryoconserveringsmedium gebruiken we volledig groeimedium (inclusief FBS) + 10% DMSO voor voldoende levensvatbaarheid na het ontdooien, of CM-1 (Cytion catalogusnummer 800100), dat geoptimaliseerde osmoprotectanten en metabolische stabilisatoren bevat om het herstel te verbeteren en door cryo geïnduceerde stress te verminderen.
Opslagvoorwaarden

Voor langdurige bewaring plaatst u flesjes in vloeibare stikstof in dampfase bij ongeveer -150 tot -196 °C. Opslag bij -80 °C is alleen aanvaardbaar als korte tussenstap vóór overbrenging naar vloeibare stikstof.

Verzendvoorwaarden

Gecryopreserveerde cellijnen worden verzonden op droog ijs in gevalideerde, geïsoleerde verpakkingen met voldoende koelmiddel om gedurende het transport ongeveer -78 °C te handhaven. Inspecteer de verpakking onmiddellijk na ontvangst en breng de flacons onverwijld over naar de juiste opslagplaats.

08Donateur

Leeftijd van de donor
39 jaar
Etnische afkomst
Chinees