Pāriet uz saturu
HCC-LM3
Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Metastāžu vieta
Plaušas
Sinonīmi
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

Dokumenti

HCC-LM3

Cell line · Preces numurs 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

€550.00bez nodokļa un piegādes izmaksām
Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

HCC-LM3 šūnu līnija ir atzīts modelis aknu šūnu karcinomas (HCC) pētīšanai, jo īpaši tās augstā metastāzēšanās potenciāla dēļ. Šī šūnu līnija ir bijusi izšķiroša, atklājot mehānismus, kas saistīti ar audzēja proliferāciju, migrāciju un rezistenci pret ārstēšanu. Pētījumi par HCC-LM3 šūnām ir atklājuši to lomu zāļu reakciju izpētē un molekulārajos procesos, kas ietekmē vēža agresivitāti. Piemēram, ir pierādīts, ka cirkulārā RNS circMRPS35 HCC-LM3 spēlē onkogēnu lomu, veicinot šūnu proliferāciju, migrāciju, invāziju un rezistenci pret ķīmijterapiju, jo īpaši pret cisplatīnu. Mehāniski circMRPS35 darbojas, absorbējot mikroRNA-148a-3p, kas izraisa Syntaxin 3 (STX3) ekspresijas paaugstināšanos, kas modulē fosfatāzes un tensīna homoloģa (PTEN) stabilitāti caur ubikvitināciju un degradāciju.

Turklāt pētījumos ir identificētas nozīmīgas metaboliskas izmaiņas HCC-LM3 šūnās, kas korelē ar audzēja augšanu un izdzīvošanu. Šī šūnu līnija, līdzīgi citiem HCC modeļiem, demonstrē izteiktas izmaiņas glikozes un lipīdu metabolismā, kas veicina strauju audzēja proliferāciju un tiek uzskatītas par aknu vēža pazīmēm. Pētījumi, kuros izmantota vienšūnu RNS sekvencēšana, ir atklājuši, kā metaboliskā heterogenitāte hepatocītu subpopulācijās ietekmē prognozi un ārstēšanas rezultātus. Jāatzīmē, ka HCC-LM3 metabolisko ceļu analīzes ir bijušas būtiskas, lai identificētu potenciālos biomarķierus un terapeitiskos mērķus uzlabotām klīniskajām stratēģijām.

Audums
Aknas
Slimība
Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
Metastāžu vieta
Plaušas
Sinonīmi
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Klasifikācija

Organisms
Cilvēks
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
Bioloģiskās drošības līmenis
2

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Šūnu tips
Epitēlija šūnas
Kariotips
Hipotriploīds kariotips; Vidējais hromosomu skaits: 55–58

04Identifikatori

Atsauce
HCC-LM3 (Cytion kataloga numurs 305504)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Pazīmes un uzņēmība

Proteīnu ekspresija
Albumīns+, CK8+
Antigēna ekspresija
HBsAg-
Onkogēni
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Mutāciju profils
Mutācija: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutācija: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutācija: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Vīrusi
Transformants: B hepatīta vīruss (HBV)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Sterilitāte

Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.

Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
39 gadi
Etniskā piederība
Ķīniešu