
- Audums
- Aknas
- Slimība
- Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
- Metastāžu vieta
- Plaušas
- Sinonīmi
- HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3
Dokumenti
HCC-LM3
Cell line · Preces numurs 305504
The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...
Pielāgošana / Ieteikumi
- HCC-LM3Cell line€550.00
Ieteicams (jaunākā partija)
01Vispārīga informācija
- Apraksts
HCC-LM3 šūnu līnija ir atzīts modelis aknu šūnu karcinomas (HCC) pētīšanai, jo īpaši tās augstā metastāzēšanās potenciāla dēļ. Šī šūnu līnija ir bijusi izšķiroša, atklājot mehānismus, kas saistīti ar audzēja proliferāciju, migrāciju un rezistenci pret ārstēšanu. Pētījumi par HCC-LM3 šūnām ir atklājuši to lomu zāļu reakciju izpētē un molekulārajos procesos, kas ietekmē vēža agresivitāti. Piemēram, ir pierādīts, ka cirkulārā RNS circMRPS35 HCC-LM3 spēlē onkogēnu lomu, veicinot šūnu proliferāciju, migrāciju, invāziju un rezistenci pret ķīmijterapiju, jo īpaši pret cisplatīnu. Mehāniski circMRPS35 darbojas, absorbējot mikroRNA-148a-3p, kas izraisa Syntaxin 3 (STX3) ekspresijas paaugstināšanos, kas modulē fosfatāzes un tensīna homoloģa (PTEN) stabilitāti caur ubikvitināciju un degradāciju.
Turklāt pētījumos ir identificētas nozīmīgas metaboliskas izmaiņas HCC-LM3 šūnās, kas korelē ar audzēja augšanu un izdzīvošanu. Šī šūnu līnija, līdzīgi citiem HCC modeļiem, demonstrē izteiktas izmaiņas glikozes un lipīdu metabolismā, kas veicina strauju audzēja proliferāciju un tiek uzskatītas par aknu vēža pazīmēm. Pētījumi, kuros izmantota vienšūnu RNS sekvencēšana, ir atklājuši, kā metaboliskā heterogenitāte hepatocītu subpopulācijās ietekmē prognozi un ārstēšanas rezultātus. Jāatzīmē, ka HCC-LM3 metabolisko ceļu analīzes ir bijušas būtiskas, lai identificētu potenciālos biomarķierus un terapeitiskos mērķus uzlabotām klīniskajām stratēģijām.
- Audums
- Aknas
- Slimība
- Pieaugušo hepatocelulārā karcinoma
- Metastāžu vieta
- Plaušas
- Sinonīmi
- HCCLM-3
- HCC-LM3
- LM3
- MHCC-LM3
- MHCCLM3
02Klasifikācija
- Organisms
- Cilvēks
- Sekss
- Vīrietis
- Augšanas īpašības
- Atbalstītājs
- Bioloģiskās drošības līmenis
- 2
03Raksturlielumi
- Morfoloģija
- Epitēlijveidīgs
- Šūnu tips
- Epitēlija šūnas
- Kariotips
- Hipotriploīds kariotips; Vidējais hromosomu skaits: 55–58
04Identifikatori
- Atsauce
- HCC-LM3 (Cytion kataloga numurs 305504)
- NCBI nodokļu identifikācijas numurs
- 9606
- Cellosaurus
- CVCL_6832
05Pazīmes un uzņēmība
- Proteīnu ekspresija
- Albumīns+, CK8+
- Antigēna ekspresija
- HBsAg-
- Onkogēni
- AFP+, P53-, P16+, nm23-
- Mutāciju profils
- Mutācija: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutācija: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutācija: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
- Vīrusi
- Transformants: B hepatīta vīruss (HBV)
06Apstrāde un audzēšana
- Barotne
- DMEM, w: 4,5 g/l glikozes, w: 4 mM L-glutamīna, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM nātrija piruvāta (Cytion izstrādājuma numurs 820300a)
- Inkubācijas vide
37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.
- Papildinājumi
- Papildināt barotni ar 10% FBS
- Disociācijas reaģents
- Accutase
- Pārstādīšana
- Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
- Atkausēšana un kultivēšana
Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.
Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.
For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.
Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.
Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.
Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.
Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.
Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.
07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija
- Sterilitāte
Mikoplazmas piesārņojums tiek izslēgts, izmantojot gan uz PCR balstītus testus, gan uz luminiscenci balstītas mikoplazmas noteikšanas metodes.
Lai pārliecinātos, ka nav baktēriju, sēnīšu vai rauga piesārņojuma, šūnu kultūras katru dienu vizuāli pārbauda.
- Saldēšanas barotne
- Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni (ieskaitot FBS) + 10 % DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas, vai CM-1 (Cytion kataloga numurs 800100), kas ietver optimizētus osmoprotektorus un metaboliskos stabilizatorus, lai uzlabotu atveseļošanos un samazinātu krioinducēto stresu.
- Uzglabāšanas nosacījumi
Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.
- Piegādes nosacījumi
Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.
08Ziedotājs
- Donora vecums
- 39 gadi
- Etniskā piederība
- Ķīniešu
09Juridiskie jautājumi un drošība
- Drošības pasākumi
- Plānojot uzglabāt kriokviālu šķidrā slāpeklī turpmākai atkausēšanai, obligāti jāievēro stingri drošības pasākumi. Ir nepieciešami piemēroti aizsargcimdi un apģērbs, un, pārvietojot sasaldētos paraugus uz šķidrā slāpekļa tvertni vai no tās, ir jālieto sejas maska vai aizsargbrilles. Tas jādara, lai mazinātu traumu risku, ko var radīt iespējamas kriokrioviālu eksplozijas, kas var izraisīt asu fragmentu izmešanu.
- Garantija
Uzņēmumā Cytion mēs atbalstām savu produktu kvalitāti un dzīvotspēju. Mēs garantējam, ka mūsu šūnas būs dzīvotspējīgas kultivēšanas sākumā 60 dienas pēc nosūtīšanas no mūsu ražotnēm. Mēs nodrošinām, ka visi materiāli atbilst analīzes sertifikātā un/vai produkta lapā aprakstītajām specifikācijām
Lai iegūtu sīkāku informāciju, lūdzu, skatiet mūsu <a href=""/"/Kas mēs esam/garantija/"" hreflang=""x-default"">Garantijas paziņojumu
- Nepieciešams materiālu nodošanas līgums
- Jā