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HCC-LM3
Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do adulto
Local da metástase
Pulmão
Sinónimos
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

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HCC-LM3

Cell line · Número do produto 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

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01Informações gerais

Descrição

A linha celular HCC-LM3 é um modelo consolidado para o estudo do carcinoma hepatocelular (CHC), nomeadamente devido ao seu elevado potencial metastático. Esta linha celular tem sido fundamental para desvendar mecanismos relacionados com a proliferação tumoral, a migração e a resistência ao tratamento. A investigação sobre as células HCC-LM3 revelou o seu envolvimento na exploração das respostas aos fármacos e das vias moleculares que influenciam a agressividade do cancro. Por exemplo, demonstrou-se que o ARN circular circMRPS35 desempenha um papel oncogénico na HCC-LM3, promovendo a proliferação, migração, invasão e quimiorresistência celular, particularmente à cisplatina. Do ponto de vista mecânico, o circMRPS35 funciona ao ligar-se ao microRNA-148a-3p, levando à regulação positiva da Syntaxin 3 (STX3), que modula a estabilidade do homólogo da fosfatase e da tensina (PTEN) através da ubiquitinação e degradação.

Além disso, estudos identificaram alterações metabólicas significativas nas células HCC-LM3 que se correlacionam com o crescimento tumoral e a sobrevivência. Esta linha celular, juntamente com outros modelos de HCC, demonstra alterações marcantes no metabolismo da glicose e dos lípidos, que favorecem a rápida proliferação tumoral e são consideradas características distintivas do cancro do fígado. A investigação que recorre ao sequenciamento de RNA de célula única esclareceu como a heterogeneidade metabólica dentro das subpopulações de hepatócitos afeta o prognóstico e os resultados terapêuticos. Notavelmente, as análises das vias metabólicas no HCC-LM3 têm sido essenciais para identificar potenciais biomarcadores e alvos terapêuticos para estratégias clínicas melhoradas.

Tecido
Fígado
Doença
Carcinoma hepatocelular do adulto
Local da metástase
Pulmão
Sinónimos
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Classificação

Organismo
Humano
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Nível de biossegurança
2

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tipo de célula
Células epiteliais
Cariótipo
Cariótipo hipotrilóide; Número médio de cromossomas: 55-58

04Identificadores

Referência
HCC-LM3 (número de catálogo da Cytion 305504)
Número de identificação fiscal do NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Expressão e suscetibilidade

Expressão proteica
Albumina+, CK8+
Expressão do antígeno
HBsAg-
Oncogenes
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Perfil mutacional
Mutação: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutação: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutação: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Vírus
Transformante: vírus da hepatite B (VHB)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
DMEM, com: 4,5 g/L de glucose, com: 4 mM de L-Glutamina, com: 3,7 g/L de NaHCO3, com: 1,0 mM de piruvato de sódio (número de artigo Cytion 820300a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Controlo de qualidade e criopreservação

Esterilidade

A contaminação por micoplasma é excluída utilizando ensaios baseados em PCR e métodos de deteção de micoplasma baseados em luminescência.

Para garantir que não há contaminação bacteriana, fúngica ou de leveduras, as culturas de células são sujeitas a inspecções visuais diárias.

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo (incluindo FBS) + 10% DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada, ou CM-1 (número de catálogo Cytion 800100), que inclui osmoprotectores optimizados e estabilizadores metabólicos para melhorar a recuperação e reduzir o stress induzido pela crio.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
39 anos
Etnia
Chinês