Przejdź do treści
HCC-LM3
Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy u dorosłych
Miejsce przerzutów
Płuco
Synonimy
HCCLM-3, HCC-LM3, LM3, MHCC-LM3, MHCCLM3

Dokumenty

HCC-LM3

Cell line · Numer produktu 305504

The HCC-LM3 cell line is an established model for studying hepatocellular carcinoma (HCC), particularly due to its high metastatic potential. This cell li...

€550.00bez podatku i kosztów wysyłki
W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Linia komórkowa HCC-LM3 stanowi uznany model do badań nad rakiem wątrobowokomórkowym (HCC), zwłaszcza ze względu na jej wysoki potencjał przerzutowy. Linia ta odegrała kluczową rolę w odkrywaniu mechanizmów związanych z proliferacją nowotworu, migracją komórek nowotworowych oraz opornością na leczenie. Badania nad komórkami HCC-LM3 ujawniły ich udział w badaniu reakcji na leki oraz szlaków molekularnych wpływających na agresywność nowotworu. Wykazano na przykład, że okrągłe RNA circMRPS35 odgrywa rolę onkogenową w HCC-LM3, sprzyjając proliferacji komórek, migracji, inwazji oraz oporności na chemioterapię, zwłaszcza na cisplatynę. Pod względem mechanistycznym circMRPS35 działa poprzez wychwytywanie mikroRNA-148a-3p, co prowadzi do regulacji w górę syntaxyny 3 (STX3), która moduluje stabilność homologu fosfatazy i tensyny (PTEN) poprzez ubikwitynację i degradację.

Ponadto badania wykazały znaczące zmiany metaboliczne w komórkach HCC-LM3, które korelują ze wzrostem guza i przeżywalnością. Linia komórkowa ta, podobnie jak inne modele HCC, wykazuje wyraźne zaburzenia metabolizmu glukozy i lipidów, które sprzyjają szybkiej proliferacji nowotworu i są uważane za cechy charakterystyczne raka wątroby. Badania z wykorzystaniem sekwencjonowania RNA pojedynczych komórek wyjaśniły, w jaki sposób heterogenność metaboliczna w obrębie subpopulacji hepatocytów wpływa na rokowanie i wyniki leczenia. Warto zauważyć, że analizy szlaków metabolicznych w HCC-LM3 miały zasadnicze znaczenie dla identyfikacji potencjalnych biomarkerów i celów terapeutycznych w celu udoskonalenia strategii klinicznych.

Chusteczka
Wątroba
Choroba
Rak wątrobowokomórkowy u dorosłych
Miejsce przerzutów
Płuco
Synonimy
  • HCCLM-3
  • HCC-LM3
  • LM3
  • MHCC-LM3
  • MHCCLM3

02Klasyfikacja

Organizm
Człowiek
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
2

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Typ komórki
Komórki nabłonkowe
Karyotyp
Kariotyp hipotriploidalny; Średnia liczba chromosomów: 55–58

04Identyfikatory

Źródło
HCC-LM3 (numer katalogowy Cytion 305504)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
9606
Cellosaurus
CVCL_6832

05Ekspresja i podatność

Ekspresja białek
Albumina+, CK8+
Ekspresja antygenu
HBsAg-
Onkogeny
AFP+, P53-, P16+, nm23-
Profil mutacji
Mutacja: BRD7, p.Glu277Glyfs*18 (c.830_831delAG); Mutacja: KEAP1, p.Pro445Glnfs*13 (c.1334delC); Mutacja: TP53, p.Glu51Ter (c.151G>T)
Wirusy
Transformant: wirus zapalenia wątroby typu B (HBV)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
DMEM, w: 4,5 g/l glukozy, w: 4 mM L-glutaminy, w: 3,7 g/l NaHCO3, w: 1,0 mM pirogronianu sodu (numer artykułu Cytion 820300a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 300 x g for 3 minutes to separate the cells and carefully discard the supernatant containing residual freezing medium.

  7. Gently resuspend the cell pellet in 10 ml of fresh culture medium. For adherent cells, divide the suspension between two T25 culture flasks; for suspension cultures, transfer all the medium into one T25 flask to promote effective cell interaction and growth.

  8. Adhere to established subculture protocols for continued growth and maintenance of the cell line, ensuring reliable experimental outcomes.

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Bezpłodność

Zanieczyszczenie mykoplazmą jest wykluczane przy użyciu zarówno testów opartych na PCR, jak i metod wykrywania mykoplazmy opartych na luminescencji.

Aby upewnić się, że nie ma zanieczyszczenia bakteriami, grzybami lub drożdżami, hodowle komórkowe są poddawane codziennym kontrolom wizualnym.

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej (w tym FBS) + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu lub CM-1 (numer katalogowy Cytion 800100), która zawiera zoptymalizowane osmoprotektanty i stabilizatory metaboliczne w celu zwiększenia regeneracji i zmniejszenia stresu wywołanego kriokonserwacją.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
39 lat
Pochodzenie etniczne
Chiński