Премини към съдържанието
Renca-Luc
Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Карцином на мишия бъбрек
Синоними
Luciferase Reporter RenCa Cell Line

Документи

Renca-Luc

Cell line · Номер на продукта 305696

Renca-Luc is a bioluminescent derivative of the murine Renca renal carcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. T...

€777.00без ДДС и доставка

Персонализиране / Препоръки

На склад
Лот
Препоръчани (най-новата партида)
  • CoA
1

01Обща информация

Описание

Renca-Luc е биолуминесцентен дериват на мишината клетъчна линия Renca за бъбречен карцином, модифицирана така, че да експресира стабилно репортерния ген на луциферазата на светулката. Първоначалната клетъчна линия Renca е получена спонтанно от бъбречно-клетъчен карцином при мишка от линията BALB/c и е един от най-широко използваните сингенени модели за бъбречно-клетъчен карцином (RCC) в имуноонкологичните изследвания. Туморите Renca растат агресивно и са слабо имуногенни в приемници от типа BALB/c, което прави този модел ценен за оценка на имунотерапевтични подходи, включително инхибитори на контролните точки, цитокинови терапии и ракови ваксини в имунокомпетентна среда, която възпроизвежда имуносупресивната микросреда, характерна за човешкия RCC.

Стабилната интеграция на луциферазата в Renca-Luc позволява чувствително, неинвазивно биолуминесцентно изобразяване (BLI) на туморното натоварване в ортотопични модели със субренална капсула и подкожни ксенографти при сингенни мишки от линията BALB/c. След прилагане на луциферин излъчваният сигнал корелира с броя на жизнеспособните туморни клетки, което позволява проследяване във времето на приживяването на тумора, кинетиката на растежа и терапевтичния отговор без повтарящи се инвазивни процедури. Renca-Luc се използва широко за in vivo оценка на средства срещу RCC, комбинирани стратегии за имунотерапия и инхибитори на ангиогенезата в предклиничните изследвания на рака на бъбреците.

Renca-Luc запазва установените биологични и имунологични свойства на родителската линия Renca, включително сингенената съвместимост с BALB/c и характерния ѝ слабо имуногенен фенотип. Модификацията с луцифераза значително повишава експерименталната чувствителност и позволява фармакодинамична оценка в реално време на ефикасността на лечението. Изследователите трябва да проверят активността на луциферазата, кинетиката на растежа и имунологичните характеристики при конкретните си експериментални условия, преди да пристъпят към широкомащабно in vivo приложение.

Тъкан
Бъбреци
Заболяване
Карцином на мишия бъбрек
Синоними
  • Luciferase Reporter RenCa Cell Line

02Класификация

Организъм
Мишка
Секс
Мъж
Свойства, свързани с растежа
Привърженик
Статус на ГМО
GMO-S1
Подробности относно статуса на ГМО
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Ниво на биологична безопасност
1

03Характеристики

Морфология
Подобни на епител
Туморогенен
Да, при сингенни мишки
Време за удвояване
24–48 часа

04Идентификатори

Източник
Renca-Luc (каталожен номер на Cytion 305696)
Данъчен идентификационен номер в NCBI
10090
Целозавър
CVCL_E3IJ

05Проява и предразположеност

Експресия на антигена
Luc2 (светулка, с оптимизирани кодони)

06Обработка и отглеждане

Хранителна среда
RPMI 1640, w: 2,1 mM стабилен глутамин, w: 2,0 g/L NaHCO3 (номер на статията в Cytion 820700a)
Атмосфера за инкубация

37°C, 5%CO2, овлажнена атмосфера.

Добавки
Допълнете средата с 10% FBS
Реагент за дисоциация
Accutase
Пресаждане
Отстранете старата среда от адхезивните клетки и ги промийте с PBS, която не съдържа калций и магнезий. За колби Т25 използвайте 3-5 ml PBS, а за колби Т75 - 5-10 ml. След това покрийте клетките изцяло с Accutase, като използвате 1-2 ml за колби Т25 и 2,5 ml за колби Т75. Оставете клетките да се инкубират на стайна температура за 8-10 минути, за да се отделят. След инкубацията внимателно разбъркайте клетките с 10 ml среда, за да ги ресуспендирате, след което центрофугирайте при 300xg за 3 минути. Изхвърлете супернатантата, ресуспендирайте клетките в прясна среда и ги прехвърлете в нови колби, които вече съдържат прясна среда.
Коефициент на разделяне
от 1 до 3
Плътност на засяването
1 до 3 x 104 клетки/cm2
Обновяване на течността
2 до 3 пъти седмично
Размразяване и култивиране
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Контрол на качеството и криоконсервация

Среда за замразяване
Като среда за криоконсервация използваме пълна хранителна среда + 10% DMSO за адекватна жизнеспособност след размразяване.
Условия за съхранение

За дълготрайно съхранение поставете флаконите в течен азот в парна фаза при температура около -150 до -196 °C. Съхранението при -80 °C е приемливо само като кратък междинен етап преди прехвърлянето в течен азот.

Условия за доставка

Криоконсервираните клетъчни линии се транспортират върху сух лед в утвърдени, изолирани опаковки с достатъчно хладилен агент, за да се поддържа приблизително -78 °C по време на транспортирането. При получаването незабавно прегледайте опаковката и незабавно прехвърлете флаконите за подходящо съхранение.

08Дарител

Възраст на донора
6 седмици
Етническа принадлежност
BALB/c