Siirry sisältöön
Renca-Luc
Kudos
Munuaiset
Sairaus
Hiiren munuaiskarsinooma
Synonyymit
Luciferase Reporter RenCa Cell Line

Asiakirjat

Renca-Luc

Cell line · Tuotenumero 305696

Renca-Luc is a bioluminescent derivative of the murine Renca renal carcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. T...

€777.00ilman veroja ja toimituskuluja

Räätälöinti / Suositukset

Varastossa
Lot
Suositeltava (tuorein erä)
  • CoA
1

01Yleistä tietoa

Kuvaus

Renca-Luc on hiiren Renca-munuaissyöpäsolulinjan bioluminesoiva johdannainen, joka on muokattu ilmentämään vakaasti tulikärpäsen lusiferaasi-raportointigeeniä. Alkuperäinen Renca-solulinja on peräisin spontaanisti BALB/c-hiiren munuaissolukarsinoomasta, ja se on yksi immuno-onkologian tutkimuksessa yleisimmin käytetyistä syngeneisistä malleista munuaissolukarsinooman (RCC) tutkimuksessa. Renca-kasvaimet kasvavat aggressiivisesti ja ovat heikosti immunogeenisiä BALB/c-isäntäeläimissä, minkä vuoksi tämä malli on arvokas immunoterapiamenetelmien, kuten tarkistuspisteinhibiittorien, sytokiinihoitojen ja syöpärokotteiden, arvioinnissa immuunivastekykyisessä ympäristössä, joka jäljittelee ihmisen munuaissyövälle ominaista immunosuppressiivista mikroympäristöä.

Renca-Luc-mallin vakaa lusiferaasi-integraatio mahdollistaa herkän, ei-invasiivisen bioluminesenssikuvantamisen (BLI) kasvainkuormasta ortotopisissa munuaiskapselin alla ja ihonalaisissa ksenotransplantaattimalleissa syngeneisissä BALB/c-hiirissä. Lusiferinin antamisen jälkeen emittoituva signaali korreloi elävien kasvainsolujen lukumäärän kanssa, mikä mahdollistaa kasvaimen kiinnittymisen, kasvukineettisen kehityksen ja hoitovasteen pitkittäisseurannan ilman toistuvia invasiivisia toimenpiteitä. Renca-Luc-mallia käytetään laajalti anti-RCC-aineiden, yhdistelmäimmunoterapiastrategioiden ja angiogeneesin estäjien in vivo -arviointiin prekliinisessä munuaissyöpätutkimuksessa.

Renca-Luc säilyttää emolinjan Renca vakiintuneet biologiset ja immunologiset ominaisuudet, mukaan lukien syngeneisen yhteensopivuuden BALB/c-hiirien kanssa sekä sille ominaisen heikosti immunogeenisen fenotyypin. Lusiferaasimodifikaatio parantaa merkittävästi kokeellista herkkyyttä ja mahdollistaa hoidon tehokkuuden reaaliaikaisen farmakodynaamisen arvioinnin. Tutkijoiden tulee tarkistaa lusiferaasiaktiivisuus, kasvukineettiset ominaisuudet ja immunologiset ominaisuudet omissa kokeellisissa olosuhteissaan ennen laajamittaista in vivo -käyttöä.

Kudos
Munuaiset
Sairaus
Hiiren munuaiskarsinooma
Synonyymit
  • Luciferase Reporter RenCa Cell Line

02Luokittelu

Organismi
Hiiri
Sukupuoli
Mies
Kasvuominaisuudet
Kiinnittynyt
GMO-status
GMO-S1
GMO-statuksen tiedot
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioturvallisuustaso
1

03Ominaisuudet

Morfologia
Epiteelin kaltainen
Kasvaimia aiheuttava
Kyllä, syngeenisissä hiirissä
Kaksinkertaistumisaika
24–48 tuntia

04Tunnisteet

Lähdeviite
Renca-Luc (Cytion-tuotenumero 305696)
NCBI-verotunnus
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IJ

05Ilmentyminen ja alttius

Antigeenin ilmentyminen
Luc2 (tulikärpänen, kodonoptimoitu)

06Käsittely ja viljely

Viljelyalusta
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiilia glutamiinia, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytionin artikkelinumero 820700a)
Inkubaatioilma

37 °C, 5 %CO2, kostutettu ilmakehä.

Ravintolisät
Täydennetään elatusainetta 10 %:lla FBS:llä
Dissosiaatioreagenssi
Accutase
Soluviljely
Poista vanha väliaine tarttuneista soluista ja pese ne PBS:llä, josta puuttuu kalsiumia ja magnesiumia. Käytä T25-pulloissa 3-5 ml PBS:ää ja T75-pulloissa 5-10 ml. Peitä sitten solut kokonaan Accutase-valmisteella, käyttäen 1-2 ml T25-pulloissa ja 2,5 ml T75-pulloissa. Anna solujen inkuboitua huoneenlämmössä 8-10 minuuttia solujen irtoamiseksi. Inkuboinnin jälkeen solut sekoitetaan varovasti 10 ml:n väliaineella niiden resuspendoimiseksi ja sentrifugoidaan sitten 300xg:n nopeudella 3 minuutin ajan. Hävitä supernatantti, suspendoi solut uudelleen tuoreeseen väliaineeseen ja siirrä ne uusiin pulloihin, jotka sisältävät jo tuoretta väliaineita.
Jakosuhde
1–3
Kylvötiheys
1–3 x 104 solua/cm2
Nesteen uusiminen
2-3 kertaa viikossa
Sulatus ja viljely
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Laadunvalvonta ja kryosäilytys

Jäädytysaine
Kryosäilytysmediana käytämme täydellistä kasvualustaa + 10 % DMSO:ta, jotta elinkelpoisuus olisi riittävä sulatuksen jälkeen.
Säilytysolosuhteet

Pitkäaikaissäilytystä varten injektiopullot asetetaan höyryfaasissa olevaan nestemäiseen typpeen noin -150 - -196 °C:een. Säilytys -80 °C:ssa on hyväksyttävää vain lyhyenä välivaiheena ennen siirtoa nestemäiseen typpeen.

Toimitusehdot

Kryosäilytetyt solulinjat kuljetetaan kuivajäässä validoidussa, eristetyssä pakkauksessa, jossa on riittävästi kylmäainetta, jotta lämpötila pysyy noin -78 °C:ssa koko kuljetuksen ajan. Pakkaus on tarkastettava välittömästi sen vastaanottamisen jälkeen ja injektiopullot on siirrettävä viipymättä asianmukaiseen varastoon.

08Lahjoittaja

Luovuttajan ikä
6 viikkoa
Etnisyys
BALB/c