Pāriet uz saturu
Renca-Luc
Audums
Nieres
Slimība
Peles nieru karcinoma
Sinonīmi
Luciferase Reporter RenCa Cell Line

Dokumenti

Renca-Luc

Cell line · Preces numurs 305696

Renca-Luc is a bioluminescent derivative of the murine Renca renal carcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. T...

€777.00bez nodokļa un piegādes izmaksām

Pielāgošana / Ieteikumi

Noliktavā
Lot
Ieteicams (jaunākā partija)
  • CoA
1

01Vispārīga informācija

Apraksts

„Renca-Luc“ ir peles Renca nieru karcinomas šūnu līnijas bioluminiscējošs atvasinājums, kas ģenētiski modificēts, lai stabili ekspresētu ugunskurku luciferāzes reportergēnu. Sākotnējā Renca šūnu līnija tika spontāni iegūta no nieru šūnu karcinomas BALB/c pelē, un tā ir viens no visplašāk izmantotajiem singēnajiem modeļiem nieru šūnu karcinomas (RCC) pētījumos imūnonkoloģijas jomā. Renca audzēji aug agresīvi un ir vāji imūngēni BALB/c saimniekorganismos, tādējādi padarot šo modeli vērtīgu imūnterapijas pieeju novērtēšanai, tostarp kontrolpunktu inhibitoru, citokīnu terapiju un vēža vakcīnu izmantošanai imūnkompetentā vidē, kas atspoguļo cilvēka RCC raksturīgo imūnsupresīvo mikrovidē.

Stabila luciferāzes integrācija Renca-Luc ļauj veikt jutīgu, neinvazīvu bioluminiscences attēlveidošanu (BLI), lai novērtētu audzēja apjomu ortotopiskos subrenālo kapsulas un subkutānos ksenotransplantātu modeļos singēniskās BALB/c pelēs. Pēc luciferīna ievadīšanas izstarotais signāls korelē ar dzīvotspējīgo audzēja šūnu skaitu, kas ļauj ilgtermiņā uzraudzīt audzēja implantāciju, augšanas kinētiku un terapeitisko atbildi bez atkārtotām invazīvām procedūrām. Renca-Luc tiek plaši izmantots in vivo novērtēšanai pret RCC vērstajiem līdzekļiem, kombinētajām imūnterapijas stratēģijām un angiogēnēzes inhibitoriem pirmsklīniskajos nieru vēža pētījumos.

Renca-Luc saglabā vecāku Renca līnijas iedibinātās bioloģiskās un imunoloģiskās īpašības, tostarp sinģēnisko saderību ar BALB/c pelēm un tās raksturīgo vāji imunogēno fenotipu. Luciferāzes modifikācija ievērojami uzlabo eksperimentālo jutību un ļauj reāllaikā veikt farmakodinamisko novērtējumu par ārstēšanas efektivitāti. Pirms plaša mēroga in vivo lietošanas pētniekiem ir jāpārbauda luciferāzes aktivitāte, augšanas kinētika un imunoloģiskās īpašības savos konkrētajos eksperimentālajos apstākļos.

Audums
Nieres
Slimība
Peles nieru karcinoma
Sinonīmi
  • Luciferase Reporter RenCa Cell Line

02Klasifikācija

Organisms
Pele
Sekss
Vīrietis
Augšanas īpašības
Atbalstītājs
ĢMO statuss
GMO-S1
Sīkāka informācija par ĢMO statusu
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloģiskās drošības līmenis
1

03Raksturlielumi

Morfoloģija
Epitēlijveidīgs
Tumorogēns
Jā, singēniskām pelēm
Laiks, kas nepieciešams, lai skaits dubultojās
24–48 stundas

04Identifikatori

Atsauce
Renca-Luc (Cytion kataloga numurs 305696)
NCBI nodokļu identifikācijas numurs
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IJ

05Pazīmes un uzņēmība

Antigēna ekspresija
Luc2 (spožā muša, kodonu optimizēts)

06Apstrāde un audzēšana

Barotne
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabils glutamīns, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytion izstrādājuma numurs 820700a)
Inkubācijas vide

37°C, 5%CO2, mitrināta atmosfēra.

Papildinājumi
Papildināt barotni ar 10% FBS
Disociācijas reaģents
Accutase
Pārstādīšana
Noņemt veco barotni no pielipušajām šūnām un mazgāt tās ar PBS, kurā nav kalcija un magnija. T25 kolbām izmantojiet 3-5 ml PBS, bet T75 kolbām - 5-10 ml. Pēc tam pilnībā pārklājiet šūnas ar Accutase, izmantojot 1-2 ml T25 kolbām un 2,5 ml T75 kolbām. Ļaujiet šūnām inkubēties istabas temperatūrā 8-10 minūtes, lai tās atdalītos. Pēc inkubācijas uzmanīgi samaisiet šūnas ar 10 ml barotnes, lai tās atkārtoti suspendētu, pēc tam centrifugējiet 3 minūtes ar 300xg. Izmetiet supernatantu, atkārtoti suspendējiet šūnas svaigā barotnē un pārvietojiet tās jaunās kolbās, kurās jau ir svaiga barotne.
Sadalījuma attiecība
no 1 līdz 3
Sēšanas blīvums
1 līdz 3 x 104 šūnas/cm2
Šķidruma atjaunošana
2 līdz 3 reizes nedēļā
Atkausēšana un kultivēšana
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvalitātes kontrole un kriokonservācija

Saldēšanas barotne
Kā kriokonservēšanas barotni mēs izmantojam pilnvērtīgu augšanas barotni + 10% DMSO, lai nodrošinātu pietiekamu dzīvotspēju pēc atkausēšanas.
Uzglabāšanas nosacījumi

Ilgstošai uzglabāšanai flakonus ievietojiet šķidrā slāpeklī ar tvaika fāzi aptuveni -150 līdz -196 °C temperatūrā. Uzglabāšana -80 °C temperatūrā ir pieļaujama tikai kā īss starpposms pirms pārvietošanas uz šķidro slāpekli.

Piegādes nosacījumi

Kriokonservētas šūnu līnijas tiek sūtītas uz sausā ledus apstiprinātā, izolētā iepakojumā ar pietiekamu dzesēšanas šķidruma daudzumu, lai visā transportēšanas laikā uzturētu aptuveni -78 °C temperatūru. Pēc saņemšanas nekavējoties pārbaudiet iepakojumu un nekavējoties pārvietojiet flakonus uz atbilstošu uzglabāšanas vietu.

08Ziedotājs

Donora vecums
6 nedēļas
Etniskā piederība
BALB/c