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Renca-Luc
Tecido
Rim
Doença
Carcinoma do rim do ratinho
Sinónimos
Luciferase Reporter RenCa Cell Line

Documentos

Renca-Luc

Cell line · Número do produto 305696

Renca-Luc is a bioluminescent derivative of the murine Renca renal carcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. T...

€777.00sem impostos nem portes de envio

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Lote
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1

01Informações gerais

Descrição

A Renca-Luc é um derivado bioluminescente da linha celular murina Renca de carcinoma renal, modificada geneticamente para expressar de forma estável um gene repórter de luciferase de pirilampo. A linha celular parental Renca foi derivada espontaneamente de um carcinoma de células renais num rato BALB/c e é um dos modelos singénicos mais amplamente utilizados para o carcinoma de células renais (CCR) na investigação em imuno-oncologia. Os tumores Renca crescem de forma agressiva e apresentam baixa imunogenicidade em hospedeiros BALB/c, tornando este modelo valioso para avaliar abordagens de imunoterapia, incluindo inibidores de pontos de controlo, terapias com citocinas e vacinas contra o cancro, num contexto imunocompetente que reproduz o microambiente imunossupressor característico do RCC humano.

A integração estável da luciferase no Renca-Luc permite a obtenção de imagens por bioluminescência (BLI) sensíveis e não invasivas da carga tumoral em modelos ortotópicos de xenoenxertos sub-cápsula renal e subcutâneos em ratos BALB/c singénicos. Após a administração de luciferina, o sinal emitido correlaciona-se com o número de células tumorais viáveis, permitindo a monitorização longitudinal do enxerto tumoral, da cinética de crescimento e da resposta terapêutica sem a necessidade de procedimentos invasivos repetidos. O Renca-Luc é amplamente utilizado para a avaliação in vivo de agentes anti-RCC, estratégias de imunoterapia combinada e inibidores da angiogénese na investigação pré-clínica do cancro renal.

O Renca-Luc mantém as propriedades biológicas e imunológicas estabelecidas da linha parental Renca, incluindo a compatibilidade singénica com BALB/c e o seu fenótipo caracteristicamente pouco imunogénico. A modificação com luciferase aumenta substancialmente a sensibilidade experimental e permite a avaliação farmacodinâmica em tempo real da eficácia do tratamento. Os investigadores devem verificar a atividade da luciferase, a cinética de crescimento e as características imunológicas nas suas condições experimentais específicas antes da utilização in vivo em grande escala.

Tecido
Rim
Doença
Carcinoma do rim do ratinho
Sinónimos
  • Luciferase Reporter RenCa Cell Line

02Classificação

Organismo
Rato
Sexo
Masculino
Propriedades de crescimento
Aderente
Estatuto em matéria de OGM
GMO-S1
Detalhes sobre o estatuto dos OGM
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Nível de biossegurança
1

03Características

Morfologia
De tipo epitelial
Tumorigénico
Sim, em ratinhos singénicos
Tempo de duplicação
24 a 48 horas

04Identificadores

Referência
Renca-Luc (número de catálogo da Cytion 305696)
Número de identificação fiscal do NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IJ

05Expressão e suscetibilidade

Expressão do antígeno
Luc2 (firefly, com codões otimizados)

06Manuseamento e cultura

Meio de cultura
RPMI 1640, com: 2,1 mM de glutamina estável, com: 2,0 g/L NaHCO3 (número de artigo Cytion 820700a)
Atmosfera de incubação

37°C, 5%CO2, atmosfera humidificada.

Suplementos
Completar o meio com 10% de FBS
Reagente de dissociação
Accutase
Subcultura
Retirar o meio antigo das células aderentes e lavá-las com PBS sem cálcio e magnésio. Nos frascos T25, utilizar 3-5 ml de PBS e nos frascos T75, 5-10 ml. Em seguida, cobrir completamente as células com Accutase, utilizando 1-2 ml para os frascos T25 e 2,5 ml para os frascos T75. Deixar as células incubar à temperatura ambiente durante 8-10 minutos para as destacar. Após a incubação, misturar suavemente as células com 10 ml de meio para as ressuspender e, em seguida, centrifugar a 300xg durante 3 minutos. Deitar fora o sobrenadante, ressuspender as células em meio fresco e transferi-las para novos frascos que já contenham meio fresco.
Rácio de divisão
1 a 3
Densidade de sementeira
1 a 3 x 104 células/cm2
Renovação de fluidos
2 a 3 vezes por semana
Descongelamento e cultura
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Controlo de qualidade e criopreservação

Meio de congelação
Como meio de criopreservação, utilizamos um meio de crescimento completo + 10% de DMSO para uma viabilidade pós-descongelamento adequada.
Condições de armazenamento

Para conservação a longo prazo, colocar os frascos em azoto líquido em fase de vapor a uma temperatura entre -150 e -196 °C. O armazenamento a -80 °C é aceitável apenas como um curto passo intermédio antes da transferência para azoto líquido.

Condições de envio

As linhas celulares criopreservadas são expedidas em gelo seco em embalagens validadas e isoladas com refrigerante suficiente para manter aproximadamente -78 °C durante o transporte. Aquando da receção, inspecionar imediatamente o recipiente e transferir sem demora os frascos para um local de armazenamento adequado.

08Doador

Idade do dador
6 semanas
Etnia
BALB/c