Przejdź do treści
Renca-Luc
Chusteczka
Nerka
Choroba
Rak nerki u myszy
Synonimy
Luciferase Reporter RenCa Cell Line

Dokumenty

Renca-Luc

Cell line · Numer produktu 305696

Renca-Luc is a bioluminescent derivative of the murine Renca renal carcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. T...

€777.00bez podatku i kosztów wysyłki

Dostosowanie / Zalecenia

W magazynie
Lot
Polecane (najświeższa partia)
  • CoA
1

01Informacje ogólne

Opis

Renca-Luc to bioluminescencyjna odmiana mysiej linii komórkowej Renca pochodzącej z raka nerki, zmodyfikowana genetycznie w celu stabilnej ekspresji genu reporterowego lucyferazy świetlika. Pierwotna linia komórkowa Renca została spontanicznie wyizolowana z raka nerkowokomórkowego u myszy BALB/c i jest jednym z najczęściej stosowanych modeli syngenicznych raka nerkowokomórkowego (RCC) w badaniach z zakresu immunoonkologii. Guzy Renca rosną agresywnie i wykazują słabą immunogenność u gospodarzy BALB/c, co sprawia, że model ten jest cenny w ocenie metod immunoterapii, w tym inhibitorów punktów kontrolnych, terapii cytokinowych i szczepionek przeciwnowotworowych, w warunkach z zachowaną odpornością, które odzwierciedlają immunosupresyjne mikrośrodowisko charakterystyczne dla ludzkiego RCC.

Stabilna integracja lucyferazy w modelu Renca-Luc umożliwia czułe, nieinwazyjne obrazowanie bioluminescencyjne (BLI) obciążenia nowotworowego w ortotopowych modelach przeszczepów podtorebkowych i podskórnych u myszy syngenicznych rasy BALB/c. Po podaniu lucyferyny emitowany sygnał koreluje z liczbą żywych komórek nowotworowych, co umożliwia długoterminowe monitorowanie przyżycia guza, kinetyki wzrostu oraz odpowiedzi na leczenie bez konieczności powtarzania inwazyjnych procedur. Renca-Luc jest szeroko stosowany do oceny in vivo środków przeciwko RCC, strategii immunoterapii skojarzonej oraz inhibitorów angiogenezy w przedklinicznych badaniach nad rakiem nerki.

Renca-Luc zachowuje ustalone właściwości biologiczne i immunologiczne macierzystej linii Renca, w tym syngeniczną zgodność z myszami BALB/c oraz charakterystyczny fenotyp o słabej immunogenności. Modyfikacja lucyferazą znacznie zwiększa czułość eksperymentalną i umożliwia ocenę farmakodynamiczną skuteczności leczenia w czasie rzeczywistym. Przed zastosowaniem in vivo na dużą skalę naukowcy powinni zweryfikować aktywność lucyferazy, kinetykę wzrostu oraz cechy immunologiczne w swoich konkretnych warunkach eksperymentalnych.

Chusteczka
Nerka
Choroba
Rak nerki u myszy
Synonimy
  • Luciferase Reporter RenCa Cell Line

02Klasyfikacja

Organizm
Mysz
Seks
Mężczyzna
Właściwości związane ze wzrostem
Zwolennik
Status GMO
GMO-S1
Szczegółowe informacje dotyczące statusu GMO
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Poziom bezpieczeństwa biologicznego
1

03Cechy charakterystyczne

Morfologia
Podobny do nabłonka
Nowotworotwórczy
Tak, u myszy syngenicznych
Czas podwojenia
24–48 godzin

04Identyfikatory

Źródło
Renca-Luc (numer katalogowy Cytion 305696)
Numer identyfikacji podatkowej NCBI
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IJ

05Ekspresja i podatność

Ekspresja antygenu
Luc2 (świetlik, zoptymalizowany pod kątem kodonów)

06Postępowanie i hodowla

Pożywka hodowlana
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabilnej glutaminy, w: 2,0 g/L NaHCO3 (numer artykułu Cytion 820700a)
Atmosfera inkubacyjna

37°C, 5%CO2, nawilżona atmosfera.

Suplementy
Uzupełnić podłoże 10% FBS
Odczynnik dysocjacyjny
Accutase
Hodowla komórek w subkulturze
Usuń starą pożywkę z przylegających komórek i przemyj je PBS, który nie zawiera wapnia i magnezu. W przypadku kolb T25 należy użyć 3-5 ml PBS, a w przypadku kolb T75 5-10 ml. Następnie całkowicie pokryj komórki Accutase, używając 1-2 ml dla kolb T25 i 2,5 ml dla kolb T75. Pozwól komórkom inkubować w temperaturze pokojowej przez 8-10 minut, aby je oddzielić. Po inkubacji delikatnie wymieszaj komórki z 10 ml pożywki, aby ponownie je zawiesić, a następnie odwiruj przy 300xg przez 3 minuty. Odrzucić supernatant, ponownie zawiesić komórki w świeżej pożywce i przenieść je do nowych kolb zawierających już świeżą pożywkę.
Współczynnik podziału
od 1 do 3
Gęstość wysiewu
1 do 3 x 104 komórek/cm2
Odnawianie płynów
2 do 3 razy w tygodniu
Rozmrażanie i hodowla
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kontrola jakości i kriokonserwacja

Pożywka do zamrażania
Jako pożywki do kriokonserwacji używamy kompletnej pożywki wzrostowej + 10% DMSO w celu zapewnienia odpowiedniej żywotności po rozmrożeniu.
Warunki przechowywania

W celu długotrwałego przechowywania należy umieścić fiolki w ciekłym azocie w fazie lotnej w temperaturze od -150 do -196 °C. Przechowywanie w temperaturze -80 °C jest dopuszczalne tylko jako krótki etap przejściowy przed przeniesieniem do ciekłego azotu.

Warunki wysyłki

Linie komórkowe poddane kriokonserwacji są wysyłane w suchym lodzie w zatwierdzonych, izolowanych opakowaniach z wystarczającą ilością czynnika chłodniczego, aby utrzymać temperaturę około -78°C przez cały czas transportu. Po otrzymaniu przesyłki należy natychmiast sprawdzić pojemnik i bezzwłocznie przenieść fiolki do odpowiedniego miejsca przechowywania.

08Darczyńca

Wiek dawcy
6 tygodni
Pochodzenie etniczne
BALB/c