Mine otse sisu juurde
Renca-Luc
Kude
Neerud
Haigus
Hiire neerukartsinoom
Sünonüümid
Luciferase Reporter RenCa Cell Line

Dokumendid

Renca-Luc

Cell line · Toote number 305696

Renca-Luc is a bioluminescent derivative of the murine Renca renal carcinoma cell line, engineered to stably express a firefly luciferase reporter gene. T...

€777.00ilma käibemaksu ja saatmiskuludeta

Kohandamine / Soovitused

Laos
Lot
Soovitatav (värskeim partii)
  • CoA
1

01Üldine teave

Kirjeldus

Renca-Luc on hiire Renca neerukartsinoomi rakuliini bioluminestsentne derivaat, mis on geneetiliselt muundatud nii, et see ekspresseerib stabiilselt särava liblika lusiferaasi reportergeeni. Algrakuliin Renca saadi spontaanselt BALB/c hiire neerurakk-kartsinoomist ja see on üks laialdasemalt kasutatavaid süngeneetilisi mudeleid neerurakk-kartsinoomi (RCC) uurimiseks immuuno-onkoloogias. Renca-tuumorid kasvavad agressiivselt ja on BALB/c-peremeesorganismides nõrgalt immunogeensed, mistõttu on see mudel väärtuslik immunoteraapia lähenemisviiside – sealhulgas kontrollpunkti inhibiitorite, tsütokiinravi ja vähivaktsiinide – hindamiseks immuunkompetentses keskkonnas, mis jäljendab inimese neerurakk-kartsinoomile iseloomulikku immunosupressiivset mikrokeskkonda.

Stabiilne lusiferaasi integratsioon Renca-Luc-is võimaldab tundlikku, mitteinvasiivset bioluminestsentskuvamist (BLI) kasvajakoormuse hindamiseks ortotopilistes neerukapsli all asuvates ja nahaalustes ksenotransplantaadi mudelites süngeneetsetel BALB/c hiirtel. Pärast lusiferini manustamist korreleerub kiirgatav signaal elujõuliste kasvajarakkude arvuga, võimaldades kasvaja juurdumise, kasvu kineetika ja ravivastuse pikaajalist jälgimist ilma korduvate invasiivsete protseduurideta. Renca-Luc’i kasutatakse laialdaselt neeruvähi prekliinilises uurimistöös anti-RCC-ravimite, kombinatsiooniliste immunoteraapiastrateegiate ja angiogeneesi inhibiitorite in vivo hindamiseks.

Renca-Luc säilitab emaliini Renca väljakujunenud bioloogilised ja immunoloogilised omadused, sealhulgas BALB/c-süngeense ühilduvuse ja selle iseloomuliku nõrgalt immunogeense fenotüübi. Lusiferaasi modifikatsioon suurendab oluliselt eksperimendi tundlikkust ja võimaldab ravi tõhususe reaalajas farmakodünaamilist hindamist. Teadlased peaksid enne laiaulatuslikku in vivo kasutamist kontrollima lusiferase aktiivsust, kasvukineetikat ja immunoloogilisi omadusi oma konkreetsetes katsetingimustes.

Kude
Neerud
Haigus
Hiire neerukartsinoom
Sünonüümid
  • Luciferase Reporter RenCa Cell Line

02Klassifikatsioon

Organism
Hiir
Sugu
Mees
Kasvuvõime
Järgija
GMO-staatus
GMO-S1
GMO-staatuse üksikasjad
GMO-S1: This cell line contains a stably integrated firefly luciferase reporter cassette (Luc2, codon-optimized) introduced via replication-incompetent lentiviral transduction. The resulting polyclonal cell population was maintained under puromycin selection (1–5 µg/mL). S1 containment is required. This classification applies only within Germany and may differ elsewhere.
Bioloogilise ohutuse tase
1

03Omadused

Morfoloogia
Epiteelilaadsed
Tuumorigeenne
Jah, süngeensetel hiirtel
Kahekordistumisaeg
24–48 tundi

04Tunnused

Viide
Renca-Luc (Cytioni katalooginumber 305696)
NCBI maksukood
10090
Cellosaurus
CVCL_E3IJ

05Avaldumine ja vastuvõtlikkus

Antigeeni ekspressioon
Luc2 (tulikärbes, kodonoptimeeritud)

06Käsitlemine ja kasvatamine

Kasvatuskeskkond
RPMI 1640, w: 2,1 mM stabiilne glutamiin, w: 2,0 g/L NaHCO3 (Cytioni artikli number 820700a)
Inkubatsiooni keskkond

37°C, 5%CO2, niisutatud atmosfäär.

Toidulisandid
Täiendada söötme 10% FBS-ga
Dissotsiatsioonireaktiiv
Accutase
Kultuuri edasikasvatamine
Eemaldage kleepunud rakkudelt vana söötme ja peske neid PBS-ga, milles puudub kaltsium ja magneesium. T25 kolbide puhul kasutage 3-5 ml PBS-i ja T75 kolbide puhul 5-10 ml. Seejärel katke rakud täielikult Accutase'iga, kasutades 1-2 ml T25 kolbide puhul ja 2,5 ml T75 kolbide puhul. Laske rakkudel inkubeerida 8-10 minutit toatemperatuuril, et need eralduksid. Pärast inkubeerimist segage rakud ettevaatlikult 10 ml söötmega, et neid resuspenseerida, seejärel tsentrifuugige 3 minutit 300xg juures. Visake supernatant ära, suspenseerige rakud uuesti värskes keskkonnas ja viige need uutesse kolvidesse, mis sisaldavad juba värsket keskkonda.
Jagamissuhe
1–3
Külvitihedus
1 kuni 3 x 104 rakku/cm2
Vedeliku vahetus
2 kuni 3 korda nädalas
Sulatamine ja kasvatamine
  1. Confirm that the vial remains deeply frozen upon delivery, as cells are shipped on dry ice to maintain optimal temperatures during transit.

  2. Upon receipt, either store the cryovial immediately at temperatures below -150°C to ensure the preservation of cellular integrity, or proceed to step 3 if immediate culturing is required.

  3. For immediate culturing, swiftly thaw the vial by immersing it in a 37°C water bath with clean water and an antimicrobial agent, agitating gently for 40-60 seconds until a small ice clump remains.

  4. Perform all subsequent steps under sterile conditions in a flow hood, disinfecting the cryovial with 70% ethanol before opening.

  5. Carefully open the disinfected vial and transfer the cell suspension into a 15 ml centrifuge tube containing 8 ml of room-temperature culture medium, mixing gently.

  6. Centrifuge the mixture at 200 x g for 5 minutes, carefully discard the supernatant containing freezing medium.

  7. Follow the procedure described under Post-Thaw Recovery

07Kvaliteedikontroll ja krüokonserveerimine

Külmutuskeskkond
Krüosäilitusvedelikuna kasutame täielikku kasvukeskkonda + 10% DMSO, et tagada piisav elujõulisus pärast sulatamist.
Säilitamistingimused

Pikaajaliseks säilitamiseks asetage viaalid aurufaasis vedela lämmastikuga umbes -150 kuni -196 °C juures. Säilitamine temperatuuril -80 °C on vastuvõetav ainult lühikese vaheetapina enne vedela lämmastikuga üleviimist.

Tarne- ja kohaletoimetamistingimused

Krüokonserveeritud rakuliinid transporditakse kuiva jääga valideeritud, isoleeritud pakendis, milles on piisavalt külmutusainet, et säilitada kogu transpordi jooksul ligikaudu -78 °C. Vastuvõtmisel kontrollige konteinerit kohe ja viige viaalid viivitamatult sobivasse hoiuruumi.

08Annetaja

Doonori vanus
6 nädalat
Etniline kuuluvus
BALB/c